基于液體活檢技術(shù)的多癌種聯(lián)合篩查專家共識(shí)(2025版)聯(lián)合篩查專家共識(shí)(2025版)系統(tǒng)梳理了基于液體活檢技術(shù)的MCED負(fù)擔(dān)日益加重。預(yù)計(jì)到2050年，新增惡性腫瘤病例數(shù)將超過3500萬，比2022年增加77%,惡性腫瘤死亡率與2022年比也將增加1倍。中國(guó)國(guó)家癌癥中心2024年數(shù)據(jù)顯示，2022年我國(guó)惡性腫瘤新發(fā)和死亡病例分別為482.5萬例和257.4萬例。我國(guó)惡性腫瘤發(fā)病率與世界較低的5年生存率。不適感和準(zhǔn)確性不足(如假陰性、假陽性問題突出)等缺陷，致使部近年來，隨著二代測(cè)序(next-generationsequ于液體活檢技術(shù)的MCED具有無創(chuàng)性，僅需采集患者適量體液樣本，自泛癌早篩產(chǎn)品Galleri的臨床數(shù)據(jù)發(fā)布以來，陸續(xù)有MCED相循證醫(yī)學(xué)證據(jù)收集于PubMed數(shù)據(jù)庫，檢索時(shí)間范圍為自建庫至2025年4月30日，并通過查閱美國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)和歐洲腫瘤內(nèi)科學(xué)證醫(yī)學(xué)證據(jù)等級(jí)參考牛津循證醫(yī)學(xué)中心的證據(jù)等級(jí)(表1)。初步推家投票結(jié)果，推薦等級(jí)分為強(qiáng)推薦、推薦和未達(dá)成共識(shí)3個(gè)級(jí)別，若投票同意率超過90%視為強(qiáng)推薦，70%～90%視為推薦，否則為未達(dá)成1級(jí)隨機(jī)對(duì)照研究2級(jí)隊(duì)列研究3級(jí)4級(jí)5級(jí)二液體活檢的概念液體活檢技術(shù)是一種非侵入性的新型檢測(cè)技術(shù)，借助對(duì)血液、唾液、尿液等體液樣本的分析來檢測(cè)腫瘤信號(hào)。相較于傳它具有無創(chuàng)、實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)、克服腫瘤異質(zhì)性以及便于重復(fù)采樣等優(yōu)勢(shì)，在惡性腫瘤診斷領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用潛力。在人體正常生理活動(dòng)過程中，細(xì)胞凋亡或壞死會(huì)產(chǎn)生游離的DNA雙鏈小片段，并釋放至外周血中，這些小片段被稱為循環(huán)游離DNA (circulatingfreeDNA,cfDNA)。腫瘤的生長(zhǎng)依賴于血液供應(yīng)，在其生長(zhǎng)和更新過程中，會(huì)持續(xù)向血液中釋放多種cfDNA,其中來源于腫瘤細(xì)胞的特異性cfDNA被定義為循環(huán)腫瘤DNA(circulatingtumorDNA,ctDNA)。此外，部分腫瘤細(xì)胞能夠脫離原發(fā)腫瘤部位，進(jìn)入循環(huán)液中，形成循環(huán)腫瘤細(xì)胞(circulatingt同時(shí)，腫瘤細(xì)胞還會(huì)釋放外泌體、RNA、蛋白質(zhì)以及小分子代謝物等物質(zhì)進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)。這些存在于體液中的生物標(biāo)志物，為液體活檢技術(shù)應(yīng)用于腫瘤診斷提供了重要基礎(chǔ)。三基于液體活檢的多癌篩查進(jìn)展和糖類抗原15-3(carbohydrateantigen15-3,CA15-3)等，成為僅能針對(duì)有限且特定的癌種進(jìn)行檢測(cè)。例如，CEA主要適用于肺癌、2018年，Science雜志報(bào)道了基于液體活檢的CancerSEEK技術(shù)蛋白質(zhì)標(biāo)志物相結(jié)合，能夠同時(shí)評(píng)估8種常見惡性腫瘤類型，包括卵究顯示，CancerSEEK的靈敏度為70%,特異度超過99%,并在某些癌種中達(dá)到98%的靈敏度；在所有真陽性患者中，能夠?qū)盒阅[瘤來源比例為63%,定位到首要和次要溯源器官(top2predictedorigins,TP02)的患者比例為83%。鑒于其腫瘤溯源能力有限，該技術(shù)目前已該技術(shù)利用低覆蓋全基因組測(cè)序(whole-genomes癌這7個(gè)癌種顯示出73%的靈敏度和98%的特異度，組織溯源TP01準(zhǔn)確率為61%。研究(circulatingcell-freegenomeatlas,CCGA)的第3個(gè)驗(yàn)證研究中(CCGA3),Galleri展現(xiàn)了99.5%的特異度和51.5%的整體靈Galleri的特異度保持在99.1%,陽性預(yù)測(cè)值(positivepredicitonvalue,PPV)為38%,TP01準(zhǔn)確性為85%,TP02準(zhǔn)確性為97%,展現(xiàn)研究，未來一段時(shí)間有望獲取多癌種聯(lián)合篩查的臨床效用評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)。血cfDNA甲基化檢測(cè)，結(jié)合大數(shù)據(jù)機(jī)器學(xué)習(xí)的OverC模型，可實(shí)現(xiàn)6種常見惡性腫瘤的早期篩查，整體特異度達(dá)98.9%,靈敏度為69.1%,組織溯源TP01和TP02的準(zhǔn)確率分別為83.2%和91.7%。另一項(xiàng)針對(duì)肺癌、腸癌、食管癌、胃癌和肝癌這5個(gè)癌種的研究，基于外周血異度達(dá)99.2%,靈敏度為69.6%,其中I~Ⅲ期靈敏度為65.8%,組織溯源TP01準(zhǔn)確率達(dá)87.4%。基于cfDNA片CanScan模型，分別可以對(duì)5個(gè)和13個(gè)癌種進(jìn)行檢測(cè)，其中CanScan的病例對(duì)照研究的獨(dú)立驗(yàn)證數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，綜合特異度為97.8%,靈敏度為87.4%,組織溯源TP01準(zhǔn)確率為83.5%?；谶@兩個(gè)技術(shù)的前專家共識(shí)意見1基于液體活檢技術(shù)的MCED通過對(duì)cfDNA甲基化等生物標(biāo)志物進(jìn)之一(證據(jù)等級(jí)：2級(jí)；專家推薦等級(jí)：推薦)。(一)樣本來源及標(biāo)志物選擇液(血漿、血清、全血、紅細(xì)胞)、尿液、唾液、腦脊液等。血漿能夠有效富集cfDNA,相關(guān)技術(shù)成熟，可應(yīng)用于肺癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌等眾多癌種的診斷。血清適用于循環(huán)游離RNA(circulatingfreeRNA,cfRNA)和蛋白質(zhì)標(biāo)志物檢測(cè)。蛋白質(zhì)標(biāo)志物既包括甲胎蛋白 (prostate-specificantigen,PSA)等傳統(tǒng)腫瘤標(biāo)志物，也包括外RNA檢測(cè)。腦脊液則用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤(如膠質(zhì)瘤)的ctDNA檢測(cè)分析。專家共識(shí)意見2以血漿為主的血液樣本技術(shù)成熟、流程標(biāo)準(zhǔn)，是當(dāng)下MCED液體助應(yīng)用(證據(jù)等級(jí)：2級(jí)；專家推薦等級(jí)：強(qiáng)推薦)。樣，主要包括cfDNA、cfRNA、蛋白質(zhì)和小分子代謝物等(表2)。能夠區(qū)分多階段的50多種惡性腫瘤，包括缺乏標(biāo)準(zhǔn)篩查方法的高死亡率癌種和早期癌種。Galleri特異度>99%,單一假陽性率<1%,避免了單癌種檢測(cè)中的累積假陽性率，整體靈敏度為54.9%,其中I~Ⅲ期惡性腫瘤的靈敏度為43.9%,且能以93%的準(zhǔn)確度定位癌種的組織起源，展現(xiàn)出了較強(qiáng)的應(yīng)用潛力(證據(jù)等級(jí)：2級(jí))。OverC通過cfDNA甲基化檢測(cè)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)中國(guó)6大高發(fā)癌種的檢測(cè)，且靈敏度達(dá)69.1%。CancerSEEK技術(shù)聯(lián)合檢測(cè)ctDNA突變(16個(gè)基因)與蛋白質(zhì)標(biāo)志物，用于篩查8種惡性腫瘤，但由于早期腫瘤突變豐度低且受健康人群克隆造血干擾，其靈敏度僅為43%(證據(jù)等級(jí)：3級(jí))。DELFI敏度達(dá)73%,能夠補(bǔ)充cfDNA甲基化與突變分析的不足(證據(jù)等級(jí)：人員對(duì)來自腫瘤誘導(dǎo)血小板的RNA圖譜進(jìn)行分析，成功檢測(cè)出18種不同的惡性腫瘤類型，并在5種腫瘤類型中實(shí)現(xiàn)了準(zhǔn)確的組織溯源 (證據(jù)等級(jí)：3級(jí))。盡管cfRNA能夠因其對(duì)細(xì)志物應(yīng)用潛力?；趍SMRTqPCR技術(shù)平臺(tái)的游離miRNA檢測(cè)方法已經(jīng)在多種單一癌種如胃癌(證據(jù)等級(jí)：2級(jí))以及肺癌和乳腺癌的篩查中應(yīng)用(證據(jù)等級(jí)：3級(jí))。目前一項(xiàng)基于游離miRNA和cfDNA甲基化聯(lián)合應(yīng)用于9種惡性腫瘤檢測(cè)的項(xiàng)目 應(yīng)用效果。志物已成為提高檢測(cè)性能的一種有前景的策略。例如，OncoSeek測(cè)CEA、CYFRA21-1),對(duì)9種惡性腫瘤類型實(shí)現(xiàn)了51.7%的靈敏度和92.9%的特異度，總體準(zhǔn)確率為84.3%,其中檢測(cè)早期癌(I~Ⅱ期)的靈敏度為49.5%,總體溯源準(zhǔn)確性為66.8%(證據(jù)等級(jí)：3級(jí))。此外，蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的新進(jìn)展，如糖蛋白和糖質(zhì)修飾檢測(cè)、Olink鄰位連接法和單分子陣列(Simoa),拓展了蛋白質(zhì)類標(biāo)志物檢測(cè)靈敏度的界限(證據(jù)等級(jí)：3級(jí))。靈敏度達(dá)93.5%;其中早期癌(I~Ⅱ期)檢測(cè)能力達(dá)到79.1%。另一項(xiàng)利用基質(zhì)輔助激光解吸/電離質(zhì)譜成像的多癌篩查技術(shù)，通過檢總體靈敏度93%,特異度91%;在外部驗(yàn)證隊(duì)列中靈敏度與特異度均達(dá)84%(證據(jù)等級(jí)：3級(jí))。度為88.9%,顯著優(yōu)于單特征標(biāo)志物，組織溯源準(zhǔn)確性為76.4%,高于單一甲基化標(biāo)志物(證據(jù)等級(jí)：3級(jí))。2022年Lin等研發(fā)的TUFEST整合片段組與表觀調(diào)控組，泛癌種檢測(cè)的特異性達(dá)到95%,靈敏度超在泛癌篩查領(lǐng)域得到應(yīng)用。例如，癌癥區(qū)分分析技術(shù)(cancer基于大樣本量的回顧性和前瞻性臨床驗(yàn)證以及多年隨訪，驗(yàn)證了CDA技術(shù)多癌種篩查的能力。通過對(duì)19141名受試者的長(zhǎng)期跟蹤研究發(fā)的患者集中在高危組，7.5%處于中危組，而僅有1.1%位于低危組；同時(shí)，確診的癌前病變和良性腫瘤達(dá)到30種，且確診的患者人數(shù)明專家共識(shí)意見3其中以cfDNA甲基化應(yīng)用最為成熟和廣泛(證據(jù)等級(jí)：2級(jí));但不熟，基于其他類型標(biāo)志物的MCED會(huì)逐漸增多。甲基化聯(lián)合片段組、cfRNA、蛋白質(zhì)或代謝物有提升檢測(cè)性能的潛力，未來可進(jìn)一步探索多組學(xué)聯(lián)合優(yōu)化方案，但要考慮成本效益平衡(證據(jù)等級(jí)：3級(jí)；專(二)多癌篩查標(biāo)志物檢測(cè)不同類型的標(biāo)志物需采用不同的檢測(cè)方法(表2)。以cfDNA甲表2多癌篩查標(biāo)志物匯總甲基化NGS、PCR組織溯源性高；癌種特異性強(qiáng)；早期信號(hào)敏感(可檢測(cè)0.1%豐度)部分癌種甲基化信號(hào)弱(如肉瘤);核心標(biāo)志物：研究最廣，已臨床轉(zhuǎn)化；甲基化NGS直接反映驅(qū)動(dòng)基因變異；早期腫瘤豐度低；克隆造血干擾；需聯(lián)合其他標(biāo)志物提升靈敏度，單獨(dú)應(yīng)用受限，無法進(jìn)行組織溯源cfDNA片段無需先驗(yàn)分子信息；低成本泛癌篩查需大規(guī)模訓(xùn)練集驗(yàn)證；聯(lián)用可優(yōu)化性能動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)腫瘤微環(huán)境；外泌體RNA穩(wěn)定性高樣本易降解；與標(biāo)準(zhǔn)化瓶頸蛋白質(zhì)臨床驗(yàn)證成熟(如PSA);特異性低(單一標(biāo)志物);早期信號(hào)弱型蛋白質(zhì)組學(xué)聯(lián)合策略是趨勢(shì)反映腫瘤代謝重編程；綜合性能提升；個(gè)體差異大；缺乏癌種特異性標(biāo)志物成本高；特征復(fù)雜，難以進(jìn)行生物覆蓋互補(bǔ)信號(hào)學(xué)解釋；可作為補(bǔ)充應(yīng)用，同時(shí)需平衡成本效益注：cDNA為循環(huán)游離DNA;cDNA為循環(huán)腫瘤DNA;cRNA為循環(huán)游離RNA;NGS為二代測(cè)序；WGS為全基因組測(cè)序；qR驟和技術(shù)來解決，主要涉及血液cfDNA提取，甲基化轉(zhuǎn)化，甲基化低于化學(xué)轉(zhuǎn)化法，具有低背景噪音的優(yōu)勢(shì)。然而，酶法轉(zhuǎn)化時(shí)間長(zhǎng)、切的甲基化敏感限制性內(nèi)切酶技術(shù)(methylationsensitiverestrictionendonuclease,MSRE)等，但這些方法無法達(dá)到單堿基程中引入的偏差，常見的建庫方法有雙鏈建庫和單鏈建庫。雙鏈DNA專家共識(shí)意見4可通過探針富集特定區(qū)域來提高靈敏度(專家推薦等級(jí)：推薦)。(三)多癌篩查標(biāo)志物分析的腫瘤特征進(jìn)行分析，實(shí)現(xiàn)了多個(gè)癌種的檢測(cè)(證據(jù)等級(jí)：3級(jí))。2021年7月中國(guó)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的《人工智能醫(yī)用軟件產(chǎn)品分類界定指導(dǎo)原則》,明確了人工智能醫(yī)用軟件產(chǎn)品的類別界理。目前，已有40余款人工智能類產(chǎn)品獲醫(yī)療器械管理。2023年10月，國(guó)家衛(wèi)生健康委發(fā)布的《健康中國(guó)行動(dòng)一癌癥防治行動(dòng)實(shí)施方案(2023—2030年)》指出，應(yīng)積極運(yùn)用核心功能設(shè)定以及網(wǎng)絡(luò)安全等多方面需求，精準(zhǔn)且清晰地明確數(shù)據(jù)收集、算法性能以及硬件配置等維度的要求。尤為重要的是，需求分析要充分考慮泛化性要求，依據(jù)產(chǎn)品預(yù)期用途與使用場(chǎng)景，細(xì)致確定泛化性分組，或精準(zhǔn)識(shí)別影響泛化性的關(guān)鍵因素，以此為指導(dǎo)，在數(shù)據(jù)收集階段有針對(duì)性地開展數(shù)據(jù)采集工作，為后續(xù)的算法研究提供科學(xué)合理、適配性強(qiáng)的數(shù)據(jù)支撐。高質(zhì)量的數(shù)據(jù)是人工智能醫(yī)療器械取得成功的核心基石。要實(shí)現(xiàn)高質(zhì)量的數(shù)據(jù)收集，必須做到科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)、合規(guī)合法。這就需要建立一套涵蓋數(shù)據(jù)采集、數(shù)據(jù)整理、數(shù)據(jù)標(biāo)注、數(shù)據(jù)清洗以及數(shù)據(jù)集構(gòu)建等全流程活動(dòng)的規(guī)范與質(zhì)量控制要求，并嚴(yán)格依照要求執(zhí)行，以確保數(shù)據(jù)具備可追溯性、準(zhǔn)確性與一致性。此外，人員的專業(yè)資質(zhì)、培訓(xùn)效果以及考核情況也是影響數(shù)據(jù)質(zhì)量的關(guān)鍵要點(diǎn)。只有對(duì)相關(guān)人員實(shí)施良好的質(zhì)量管控，才能保證數(shù)據(jù)收集活動(dòng)的各個(gè)環(huán)節(jié)有序推進(jìn)。值得強(qiáng)調(diào)的是，遵循既定的數(shù)據(jù)收集規(guī)范對(duì)于保護(hù)患者隱私、遵守相關(guān)法規(guī)條例具有重要意義。在醫(yī)療行業(yè)中，患者數(shù)據(jù)敏感度極高，嚴(yán)格規(guī)范的數(shù)據(jù)收集流程是數(shù)據(jù)在倫理道德和法律法規(guī)層面得以合理使用的堅(jiān)實(shí)保障。人工智能建立的模型往往具有“黑盒”特性，即內(nèi)部工作原理不但我們?nèi)匀浑y以追蹤和理解它們?nèi)绾螐奶囟ǖ妮斎肷商囟ǖ妮敵?。這種復(fù)雜性源自于模型內(nèi)部多層次的非線性數(shù)據(jù)處理和海量參數(shù)的復(fù)雜交互，使得追溯和理解其決策路徑成為一項(xiàng)巨大挑戰(zhàn)。因此，對(duì)于應(yīng)用于多癌早篩的人工智能模型，有必要對(duì)其可解釋性提出要求，即對(duì)模型中的各個(gè)算法步驟進(jìn)行歸因，明確每個(gè)步驟的必要性以及所帶來的收益，以增加算法的可解釋性。專家共識(shí)意見5推薦將人工智能應(yīng)用于MCED,但需開展算法需求分析，建立評(píng)估模型泛化性的標(biāo)準(zhǔn)和評(píng)價(jià)體系，建立數(shù)據(jù)收集規(guī)范，并通過算法歸因來提高模型的可解釋性(證據(jù)等級(jí)：3級(jí)；專家推薦等級(jí)：強(qiáng)推薦)。五多癌篩查癌種的選擇多癌篩查所覆蓋癌種的確定，需緊密圍繞多癌篩查的核心目標(biāo)。多癌篩查旨在針對(duì)無癥狀人群，實(shí)現(xiàn)惡性腫瘤在可治愈階段的早期發(fā)現(xiàn)，進(jìn)而有效降低惡性腫瘤相關(guān)死亡率。在劃定篩查癌種范圍時(shí)，必須全面考量衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)學(xué)效益，以保障MCED具備良好的臨床可及性以及成本效益優(yōu)勢(shì)。惡性腫瘤篩查通常聚焦于發(fā)病率和死亡率雙高的惡性腫瘤，這些疾病嚴(yán)重威脅人群的健康與生命安全，是當(dāng)前亟待解決的重大公共衛(wèi)生問題。對(duì)于是否適宜納入MCED,還需有充足的證據(jù)表明該癌種的早期診斷能夠顯著改善患者的預(yù)后情況。例如，WHO或有關(guān)國(guó)家基于高級(jí)別循證醫(yī)學(xué)證據(jù)推薦進(jìn)行篩查的癌種，像結(jié)直腸癌、宮頸癌、乳腺癌、肺癌、食管癌、肝癌和胃癌(證據(jù)等級(jí)：1級(jí)),這些癌種的因此同樣建議將其納入多癌篩查的范圍(證據(jù)等級(jí)：1級(jí))?，F(xiàn)多個(gè)癌種的同步篩查。篩查的臨床價(jià)值可從以下3個(gè)方面進(jìn)行綜合考慮：(1)確診分期情況：確診時(shí)晚期占比高，借助篩查能夠顯著推動(dòng)疾病分期前移；(2)早晚期預(yù)后差異：早期可治愈率或早期預(yù)后顯著優(yōu)于晚期；(3)篩查窗口：在疾病發(fā)展進(jìn)程中存在適宜進(jìn)行在中國(guó)屬于高發(fā)/高死亡率且缺乏單癌篩查手段的“沉默癌種” (如胰腺癌、卵巢癌)目前臨床晚期患者占比偏多，早期預(yù)后更好，胰腺癌和卵巢癌的高發(fā)性、高死亡率以及早期篩查潛在的臨床價(jià)值，在設(shè)計(jì)和實(shí)施多癌篩查項(xiàng)目時(shí)，可將這2個(gè)癌種納入考量范圍。淋巴瘤在中國(guó)發(fā)病率位居第13位，死亡率位居第12位，彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤是其中侵襲性較強(qiáng)的亞型，且是中國(guó)人群中淋巴瘤主要亞型。相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，我國(guó)淋巴瘤的晚期分期占比達(dá)60%,晚期生存率為66%左右，而早期生存率則能達(dá)到85%以上。因此，開展淋巴瘤的早期篩前列腺癌在國(guó)外有一些指南作篩查推薦，但生存獲益的同時(shí)也暴露出過度診斷現(xiàn)象。與國(guó)外情況不同的是，前列腺癌在中國(guó)臨床中晚期占比偏高，多癌篩查是否納入前列腺癌，可以綜合檢測(cè)液體來源、標(biāo)志物預(yù)期性能以及單位成本綜合決定?；谝后w活檢的多癌篩查，其基礎(chǔ)在于惡性腫瘤會(huì)釋放可檢測(cè)成分如cfDNA、蛋白質(zhì)等標(biāo)志物進(jìn)入血液或其他體液中。因此在癌種選擇時(shí)，必須充分考慮液體活檢的可及性和技術(shù)通用性。從樣本可及性角度來看，某些腫瘤由于其解剖位置的特殊性，會(huì)限制液體活檢技術(shù)的應(yīng)用。以中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤為例，血腦屏障的存在以及腦脊液獲取的臨床難度，使得該類腫瘤在液體活檢方面面臨可及性受限的問題。在技術(shù)通用性方面，優(yōu)先選擇能夠基于同一技術(shù)實(shí)現(xiàn)高效篩查的癌種具有重要意義。例如，當(dāng)采用cfDNA甲基化作為標(biāo)志物進(jìn)行篩查時(shí)，泌尿系統(tǒng)腫瘤以尿液作為樣本來源，相較于其他樣本類型，在技術(shù)性能上表現(xiàn)更優(yōu)。專家共識(shí)意見6性，同時(shí)平衡成本效益(專家推薦等級(jí)：強(qiáng)推薦)。美國(guó)國(guó)家癌癥研究所早期癌癥診斷研究網(wǎng)絡(luò)將生物標(biāo)志物開發(fā)5個(gè)階段。以下將從研究開發(fā)階段角度對(duì)多癌篩查研究的開展進(jìn)行論(一)多癌篩查標(biāo)志物的挖掘的檢測(cè)甲基化位點(diǎn)。全基因組亞硫酸氫鹽測(cè)序(wholegenomebisulfiteseq有助于精準(zhǔn)發(fā)現(xiàn)那些在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中起關(guān)鍵作用的甲基化位專家共識(shí)意見7瘤組織對(duì)差異標(biāo)志物進(jìn)行初步挖掘，有助于提高標(biāo)志物的特異性(專(二)多癌篩查模型建立及評(píng)估并明確與相關(guān)人口統(tǒng)計(jì)學(xué)因素(如年齡、性別MCED的病例對(duì)照研究在研究設(shè)計(jì)層面上，病例和對(duì)照的選擇以人群中的健康人，其優(yōu)點(diǎn)是不易出現(xiàn)來自醫(yī)院對(duì)照可能面臨的選擇偏倚問題，但實(shí)施難度大、費(fèi)用高，所選對(duì)照可能不配合；同時(shí)應(yīng)包括來自同一個(gè)或多個(gè)醫(yī)療機(jī)構(gòu)中未患癌的、診斷為良性疾病的患者，優(yōu)點(diǎn)是易于選取、招募，可利用電子病歷等醫(yī)療材料，缺點(diǎn)是容易產(chǎn)生選擇偏倚。對(duì)照的選擇另一個(gè)難點(diǎn)是需要盡可能除外惡性腫瘤，但是體檢或臨床查體可能難以完全除外惡性腫瘤，建議進(jìn)行隨訪以進(jìn)一步除外對(duì)照患癌的可能性。匹配是病例對(duì)照研究中的重要方法，旨在通過選取具有相同或相似特征的研究對(duì)象，提高研究效率和減少混雜因素影響。例如年齡和性別與惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展有關(guān)，也會(huì)影響DNA甲基化的檢測(cè)，屬于研究的混雜因素。匹配設(shè)計(jì)可使對(duì)照組在年齡、性別方面與病例組保持一致，以排除這些因素對(duì)結(jié)果的干擾。該設(shè)計(jì)雖然增加了選擇對(duì)照和統(tǒng)計(jì)分析的難度，但能提升統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)?zāi)芰?，提高研究效率。然而，病例?duì)照研究中匹配過度會(huì)使匹配過程復(fù)雜、成本增加、耗時(shí)延長(zhǎng)，即匹配過多變量會(huì)使病例和對(duì)照過于相似，導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)效率降低。過度匹配得到的結(jié)果可能僅適用于匹配條件下的特定人群，無法推廣到更廣泛的總體人群，進(jìn)而限制研究結(jié)果的應(yīng)用范圍。在病例對(duì)照研究中，一般選擇2～3個(gè)最重要的混雜因素進(jìn)行匹配。除性別、年齡之外，對(duì)其他因素是否進(jìn)行匹配應(yīng)謹(jǐn)慎考慮。模型構(gòu)建除了內(nèi)部驗(yàn)證，還應(yīng)設(shè)置獨(dú)立驗(yàn)證集。這有助于確保模型的預(yù)測(cè)具有穩(wěn)健性，而不僅僅是輸入數(shù)據(jù)的反映，使模型具有外推MCED病例對(duì)照研究的評(píng)估指標(biāo)包括靈敏度、特異度以及組織溯時(shí)可以合并。后續(xù)診療差別大的癌種應(yīng)該盡量區(qū)分開，例如在既往專家共識(shí)意見8重要的指標(biāo)(專家推薦等級(jí)：強(qiáng)推薦)。(三)前瞻性驗(yàn)證性研究設(shè)計(jì)及評(píng)估MCED模型構(gòu)建完成后，在進(jìn)入正式臨床開發(fā)前需要開展前瞻性前瞻性篩查隊(duì)列研究的價(jià)值主要為：(1)驗(yàn)證模型的穩(wěn)定性：篩查篩查過程中會(huì)遇到更為多樣和復(fù)雜的非癌性因此，前瞻性隊(duì)列研究能夠進(jìn)一步驗(yàn)證MCED模型在適用人群中實(shí)際檢出惡性腫瘤的能力，確保模型在實(shí)際應(yīng)用場(chǎng)景下的穩(wěn)定性。(2)前瞻性隊(duì)列研究可分為觀察性研究和干預(yù)性研究，取決于MCED研究在MCED前瞻性驗(yàn)證中更為重要。前瞻性研究設(shè)計(jì)需考慮一些相關(guān)因素：(1)前瞻性研究納入的使用時(shí)的性能表現(xiàn)和安全性；(2)隊(duì)列規(guī)模應(yīng)依據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算來確結(jié)果的可靠性和有效性；(3)干預(yù)性研究中的確診方式應(yīng)按照臨床平略有增加，但這種焦慮在12個(gè)月內(nèi)下降到基線水平。為MCED技術(shù)的優(yōu)化和臨床應(yīng)用提供更為可靠的專家共識(shí)意見9前瞻性隊(duì)列研究具有驗(yàn)證模型穩(wěn)定性和安全性的重要價(jià)值，是(四)多癌篩查臨床效用評(píng)估及替代終點(diǎn)且有效的應(yīng)用(證據(jù)等級(jí)：1級(jí))。例如，基于低劑量計(jì)算機(jī)斷層掃的評(píng)估篩查效果的標(biāo)準(zhǔn)，但相關(guān)的RCT研究往往需要5～15年甚至更下降、基于診斷階段的死亡率預(yù)測(cè)模型、以及治療相關(guān)指標(biāo)(如微小殘留病灶、復(fù)發(fā)率等)。行性較強(qiáng)的指標(biāo)。例如，乳腺癌TMIST研究以及正在進(jìn)行的肝癌已報(bào)道的RCT研究進(jìn)行的Meta分析顯示，在乳腺癌、結(jié)直腸癌、肺癌和卵巢癌等癌種的篩查研究中，晚期(Ⅲ~IV期)發(fā)病率下降與死亡率的降低之間具有顯著相關(guān)性(證據(jù)等級(jí)：1級(jí))。其他研究也支持這一結(jié)論，通過肺、腸、乳腺和前列腺癌等33個(gè)大型RCT的Meta分析發(fā)現(xiàn)，晚期癌發(fā)病率下降可以作為死亡率下降的替代終點(diǎn)(證據(jù)等級(jí)：1級(jí))。專家共識(shí)意見10篩查技術(shù)的臨床價(jià)值(專家推薦等級(jí)：強(qiáng)推薦)。(1)累計(jì)吸煙≥100支；(2)根據(jù)美國(guó)國(guó)立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)指南，符合遺傳性腫瘤綜合征檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)；(3)有惡性腫瘤病史且完成根治性治療≥3年(證據(jù)等級(jí)：2級(jí))。而NHS-Galleri研究則選取了50~77歲、近3年無惡性腫瘤診斷或治療史、且未接受惡性腫瘤相關(guān)檢據(jù)顯示，40歲后惡性腫瘤發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)顯著上升，40歲以上人群的惡性腫瘤發(fā)病率是40歲以下人群的16倍。因此，40歲