2025年免疫組化試題(有答案)一、選擇題（每題2分，共30分）1.以下關(guān)于單克隆抗體和多克隆抗體的描述，錯(cuò)誤的是：A.單克隆抗體特異性高，交叉反應(yīng)少B.多克隆抗體可識(shí)別同一抗原的多個(gè)表位C.單克隆抗體在組織固定不當(dāng)時(shí)易丟失抗原D.多克隆抗體更適用于檢測(cè)變性抗原2.乳腺癌組織中檢測(cè)到ER（+）、PR（-）、HER2（2+），需進(jìn)一步確認(rèn)HER2狀態(tài)時(shí)，首選的檢測(cè)方法是：A.FISH檢測(cè)HER2基因擴(kuò)增B.換用不同克隆號(hào)的HER2抗體重新染色C.檢測(cè)Ki-67增殖指數(shù)D.行CK5/6和EGFR染色3.胃黏膜活檢標(biāo)本中見(jiàn)異型細(xì)胞，懷疑為印戒細(xì)胞癌，最具診斷價(jià)值的標(biāo)志物組合是：A.CDX2（+）、CK7（-）、CK20（+）B.突觸素（Syn）（+）、嗜鉻素A（CgA）（+）C.波形蛋白（Vimentin）（+）、S-100（-）D.黏蛋白-1（MUC1）（-）、鈣黏蛋白（E-cadherin）（+）4.淋巴結(jié)活檢顯示小淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，CD3（+）、CD20（-）、CD5（+）、CD23（+），最可能的診斷是：A.套細(xì)胞淋巴瘤（MCL）B.慢性淋巴細(xì)胞白血病/小淋巴細(xì)胞淋巴瘤（CLL/SLL）C.濾泡性淋巴瘤（FL）D.彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）5.關(guān)于免疫組化中DAB顯色的描述，正確的是：A.顯色時(shí)間越長(zhǎng)，陽(yáng)性信號(hào)越強(qiáng)，結(jié)果越準(zhǔn)確B.顯色液需現(xiàn)用現(xiàn)配，避免接觸金屬離子C.終止顯色后無(wú)需水洗，直接脫水封片D.DAB顯色產(chǎn)物可被酒精溶解，需快速脫水6.軟組織腫瘤中，CD34（+）、DOG1（+）、SMA（-）、S-100（-）最支持的診斷是：A.平滑肌瘤B.神經(jīng)鞘瘤C.胃腸道間質(zhì)瘤（GIST）D.孤立性纖維性腫瘤（SFT）7.肺穿刺標(biāo)本中見(jiàn)異型細(xì)胞，CK7（+）、CK20（-）、TTF-1（+）、NapsinA（+），最可能的組織學(xué)類型是：A.肺鱗癌B.肺腺癌C.小細(xì)胞肺癌D.大細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌8.以下哪種情況會(huì)導(dǎo)致免疫組化出現(xiàn)假陰性結(jié)果？A.抗原修復(fù)過(guò)度導(dǎo)致表位破壞B.一抗?jié)舛冗^(guò)高C.二抗與組織內(nèi)源性生物素結(jié)合D.顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)9.鑒別肝母細(xì)胞瘤與肝細(xì)胞癌時(shí)，最有價(jià)值的標(biāo)志物是：A.AFP（甲胎蛋白）B.Glypican-3（磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3）C.HepPar-1（肝細(xì)胞抗原）D.β-catenin（β-連環(huán)蛋白）10.漿細(xì)胞腫瘤中，CD138（+）、CD38（+）、MUM1（+）、CD20（-），需進(jìn)一步排除的是：A.反應(yīng)性漿細(xì)胞增生B.多發(fā)性骨髓瘤C.漿母細(xì)胞淋巴瘤D.邊緣區(qū)淋巴瘤11.皮膚黑色素瘤與色素性基底細(xì)胞癌鑒別時(shí)，關(guān)鍵標(biāo)志物是：A.HMB-45（+）、Melan-A（+）B.CK（+）、EMA（+）C.CD34（+）、SMA（+）D.Desmin（+）、MyoD1（+）12.子宮內(nèi)膜樣腺癌與卵巢轉(zhuǎn)移性子宮內(nèi)膜樣癌鑒別時(shí)，首選的標(biāo)志物是：A.ER（+）、PR（+）B.PAX8（+）、WT1（-）C.CA125（+）、CEA（-）D.vimentin（+）、CK7（+）13.神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤（NET）分級(jí)中，Ki-67增殖指數(shù)的計(jì)數(shù)區(qū)域應(yīng)選擇：A.腫瘤壞死區(qū)周圍B.腫瘤細(xì)胞最密集、增殖最活躍的“熱點(diǎn)區(qū)”C.腫瘤與正常組織交界區(qū)D.隨機(jī)選取3個(gè)高倍視野14.以下哪項(xiàng)不屬于免疫組化質(zhì)量控制的內(nèi)容？A.使用已知陽(yáng)性的組織作為陽(yáng)性對(duì)照B.用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照C.定期校準(zhǔn)顯微鏡光源強(qiáng)度D.記錄抗體的克隆號(hào)、濃度及孵育時(shí)間15.腎細(xì)胞癌中，CD10（+）、RCC（+）、PAX8（+）、CK7（-），最可能的亞型是：A.透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌B.乳頭狀腎細(xì)胞癌C.嫌色細(xì)胞腎細(xì)胞癌D.集合管癌二、簡(jiǎn)答題（每題8分，共40分）1.簡(jiǎn)述免疫組化中抗原修復(fù)的原理及常用方法。2.列舉5種上皮源性腫瘤的特異性標(biāo)志物，并說(shuō)明其適用范圍。3.簡(jiǎn)述淋巴瘤免疫組化診斷中B細(xì)胞和T細(xì)胞的核心標(biāo)志物組合及意義。4.分析免疫組化結(jié)果時(shí)，如何區(qū)分“真陽(yáng)性”與“非特異性染色”？5.軟組織肉瘤診斷中，如何通過(guò)免疫組化鑒別橫紋肌肉瘤與平滑肌肉瘤？三、案例分析題（每題15分，共30分）案例1：患者男性，65歲，因“咳嗽、痰中帶血1月”就診，胸部CT示右肺上葉3cm腫塊，邊界不清。支氣管鏡活檢病理：異型細(xì)胞呈腺管樣排列，核大深染，可見(jiàn)核仁。免疫組化結(jié)果：CK7（+，細(xì)胞膜/胞質(zhì)）、CK20（-）、TTF-1（+，胞核）、NapsinA（+，胞質(zhì)）、p40（-）、Ki-67（約30%+）。問(wèn)題：（1）該病例最可能的診斷是什么？（2）列舉支持診斷的關(guān)鍵標(biāo)志物及依據(jù)。（3）需與哪些疾病鑒別？對(duì)應(yīng)的鑒別標(biāo)志物是什么？案例2：患者女性，42歲，發(fā)現(xiàn)左大腿包塊2月，大小約5cm×4cm，質(zhì)硬，活動(dòng)度差。MRI提示軟組織占位，邊界不清。手術(shù)切除標(biāo)本病理：梭形細(xì)胞呈束狀排列，核分裂象約5/10HPF。免疫組化結(jié)果：CD34（+，胞膜）、DOG1（+，胞膜/胞質(zhì)）、SMA（-）、S-100（-）、Ki-67（約5%+）。問(wèn)題：（1）該病例最可能的診斷是什么？（2）說(shuō)明各標(biāo)志物的診斷意義。（3）若需明確危險(xiǎn)度分級(jí)，還需檢測(cè)哪些指標(biāo)？答案一、選擇題1.D（多克隆抗體因識(shí)別多個(gè)表位，對(duì)變性抗原的檢測(cè)能力較弱；單克隆抗體僅識(shí)別單一表位，固定不當(dāng)時(shí)易丟失）2.A（HER22+需通過(guò)FISH確認(rèn)基因擴(kuò)增，不能僅依賴IHC）3.A（印戒細(xì)胞癌多為胃來(lái)源，CDX2（腸型分化）、CK20（+）、CK7（-）支持胃腸道原發(fā)）4.B（CLL/SLL特征為T細(xì)胞標(biāo)記CD3（+）為背景T細(xì)胞，B細(xì)胞標(biāo)記CD20（-）（弱表達(dá)）、CD5（+）、CD23（+））5.B（DAB需避光、現(xiàn)配，金屬離子可加速氧化；顯色時(shí)間需嚴(yán)格控制，過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致背景過(guò)深；終止后需充分水洗；DAB產(chǎn)物不溶于酒精）6.C（GIST典型標(biāo)記為CD34、DOG1陽(yáng)性，SMA（平滑?。?、S-100（神經(jīng)源性）陰性）7.B（肺腺癌特征性標(biāo)記：CK7（+）、CK20（-）、TTF-1（+）、NapsinA（+））8.A（抗原修復(fù)過(guò)度破壞表位導(dǎo)致假陰性；一抗?jié)舛冗^(guò)高會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性；內(nèi)源性生物素可致假陽(yáng)性；顯色過(guò)長(zhǎng)致背景深）9.D（肝母細(xì)胞瘤常伴β-catenin核陽(yáng)性，肝細(xì)胞癌多為胞質(zhì)陽(yáng)性）10.A（反應(yīng)性漿細(xì)胞增生CD20可部分陽(yáng)性，而腫瘤性漿細(xì)胞CD20（-），需結(jié)合臨床及克隆性檢測(cè)）11.A（黑色素瘤HMB-45、Melan-A陽(yáng)性；基底細(xì)胞癌CK、EMA陽(yáng)性）12.B（PAX8為苗勒管來(lái)源標(biāo)記，WT1在卵巢上皮性腫瘤中可陽(yáng)性，子宮內(nèi)膜癌WT1（-））13.B（Ki-67計(jì)數(shù)需選擇增殖最活躍的“熱點(diǎn)區(qū)”，避免壞死或退變區(qū)域）14.C（顯微鏡校準(zhǔn)屬于設(shè)備維護(hù)，非IHC質(zhì)量控制內(nèi)容）15.A（透明細(xì)胞腎癌CD10、RCC、PAX8陽(yáng)性，CK7（-）；乳頭狀腎癌CK7常（+））二、簡(jiǎn)答題1.抗原修復(fù)原理：組織固定（如甲醛）會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)交聯(lián)，掩蓋抗原表位，通過(guò)物理或化學(xué)方法打斷交聯(lián)，暴露表位。常用方法：①熱修復(fù)（最常用）：高壓蒸汽、微波、水浴加熱（pH6.0檸檬酸鹽緩沖液或pH9.0EDTA緩沖液）；②酶消化修復(fù)（胃蛋白酶、胰酶）：適用于熱修復(fù)后仍陰性的標(biāo)本（如某些病毒抗原）。2.上皮源性腫瘤特異性標(biāo)志物：①CK（細(xì)胞角蛋白）：廣譜上皮標(biāo)記，CK7/CK20組合可鑒別原發(fā)部位（如CK7+、CK20-多見(jiàn)于肺/乳腺，CK7-、CK20+多見(jiàn)于結(jié)直腸）；②EMA（上皮膜抗原）：腺樣上皮及間皮來(lái)源腫瘤（如胸腺瘤、間皮瘤）；③p63：鱗狀上皮及肌上皮標(biāo)記（鱗癌、尿路上皮癌）；④TTF-1：肺腺癌及甲狀腺濾泡上皮癌；⑤NapsinA：肺腺癌（特異性高于TTF-1）。3.B細(xì)胞核心標(biāo)志物：CD20（成熟B細(xì)胞）、CD79a（胞質(zhì)標(biāo)記，前B細(xì)胞至成熟B細(xì)胞）、PAX5（核標(biāo)記，B細(xì)胞譜系特異性）；T細(xì)胞核心標(biāo)志物：CD3（胞膜/胞質(zhì)，T細(xì)胞譜系）、CD4/CD8（輔助/細(xì)胞毒性T細(xì)胞亞群）、CD5（部分T細(xì)胞及CLL/SLL）。意義：通過(guò)譜系標(biāo)記確定B/T細(xì)胞來(lái)源，結(jié)合CD10（濾泡中心）、BCL-2（抗凋亡，F(xiàn)L特征）、CyclinD1（MCL）等進(jìn)行分型。4.區(qū)分方法：①定位特異性：真陽(yáng)性信號(hào)與抗原分布一致（如膜/核/胞質(zhì)），非特異性染色多為彌漫性或顆粒狀；②對(duì)照驗(yàn)證：陽(yáng)性對(duì)照應(yīng)陽(yáng)性，陰性對(duì)照（PBS替代一抗）應(yīng)陰性；③強(qiáng)度與背景：真陽(yáng)性信號(hào)強(qiáng)于背景，非特異性染色背景深且均勻；④重復(fù)實(shí)驗(yàn)：更換抗體克隆號(hào)或檢測(cè)方法（如FISH）驗(yàn)證。5.橫紋肌肉瘤與平滑肌肉瘤鑒別：①橫紋肌肉瘤：Desmin（+，胞質(zhì)）、MyoD1（+，核）、Myogenin（+，核，特異性更高）；②平滑肌肉瘤：SMA（平滑肌肌動(dòng)蛋白，胞質(zhì)）、Calponin（胞質(zhì)）、h-Caldesmon（胞質(zhì)）；③共同標(biāo)記：Vimentin（+），但橫紋肌肉瘤MyoD1/Myogenin陽(yáng)性可排除平滑肌肉瘤。三、案例分析題案例1：（1）診斷：肺腺癌（非小細(xì)胞肺癌，腺泡型可能）。（2）支持依據(jù)：CK7（+）提示上皮來(lái)源，CK20（-）排除胃腸道轉(zhuǎn)移；TTF-1（+）（肺腺癌及甲狀腺癌標(biāo)記，但結(jié)合CK20（-）排除甲狀腺）、NapsinA（+）（肺腺癌特異性標(biāo)記）；p40（-）排除鱗癌。（3）需鑒別疾病及標(biāo)志物：①肺鱗癌：p40（+）、p63（+）、CK5/6（+）；②大細(xì)胞癌：缺乏腺/鱗分化標(biāo)記（TTF-1、NapsinA、p40均（-））；③轉(zhuǎn)移性腺癌（如乳腺癌）：GCDFP-15（+）、ER/PR（+）、mammaglobin（+）。案例2：（1）診斷：胃腸道間質(zhì)瘤（GIST，低危險(xiǎn)度）。（2）標(biāo)志物意義：CD34（+）（GIST、SFT等間葉腫瘤標(biāo)記）、DOG1（+）