漢大學天然產(chǎn)物的提取葛根葛根簡介

葛根始載于《神農本草經(jīng)》,被列為中品。為豆科野葛或甘葛藤得干燥根。目前,在我國為藥食兩用得植物。她具有解肌退熱、生津止渴、透發(fā)麻疹升陽止瀉得功能。葛根中主要含有葛根素(puerarin)大豆苷(daidzin)和大豆苷元(daidzein)等異黃酮類有效成分。該成分都具有增加腦血流、改善微循環(huán)等功效。葛根及其提取物:葛根得主要成分葛根得主要有效成分就是大豆苷元,大豆苷,葛根素和大豆苷元4,7－二葡萄糖甙等異黃酮類化合物。除這4種主要得黃酮物質之外,日本學者柴田承二等還從葛屬植物P、ThunbergianaBenth等品種分離得到葛根素7－木糖甙;Bhutain等從葛屬植物P、Tuberosa中分離得到另一種新得異黃酮類物質4,6－二乙?；鸶?野原稔弘等還首次從葛根中分離鑒定出金雀黃素8－芹糖基－葡萄苷和大豆黃素8－糖基－葡萄苷兩種異黃酮物質。除上述主要有效成分異黃酮類化合物外,葛根中還含有少量得葛根苷(A,B,C),三萜類物質(葛皂醇A,B,C)和生物堿類物質葛根得主要有效成分中以葛根素含量為最高葛根得藥理作用改善心腦血管系統(tǒng)降血糖降血脂抗氧化抗腫瘤抑制血小板聚集增強免疫功能改善學習記憶改善心腦血管系統(tǒng)降低血壓,減慢心率,降低心肌耗氧量:葛根對正常和高血壓動物均有一定得降壓作用,葛根黃酮和葛根素使正常和心肌缺血狗心率明顯減慢。擴張冠狀血管,改善正常和缺血心肌得代謝:葛根總黃酮和葛根素明顯擴張冠狀血管,可使正常和痙攣得冠狀血管擴張,且其作用隨著劑量得增加而加強降血糖降血脂口服葛根素能使四氧嘧啶性高血糖小鼠血糖明顯下降,血清膽固醇含量減少,當選用最低有效劑量得葛根素與小劑量(無效量)阿司匹林組成復方后,降血糖作用加強,且可維持24h以上,并能明顯改善四氧嘧啶性小鼠得糖耐量,明顯對抗腎上腺素得升血糖作用,且認為葛根素可能就是葛根治療糖尿病得主要成分,口服葛根煎液能對抗飲酒大鼠因乙醇所致得血中APOA－1降低及膽固醇,甘油三酯得升高現(xiàn)象?？寡趸w內外實驗表明,葛根異黃酮明顯抑制小鼠肝,腎組織及大白兔血,腦組織得脂質過氧化產(chǎn)物丙二醛得升高,且對提高血,腦組織中超氧化物歧化酶活性有極顯著作用。本品能通過清除氧自由基和抗脂質過氧化而使酒精所致得血液粘度異常變化恢復正常狀態(tài)?？鼓[瘤大豆苷元可抑制白血細胞HL－60得增殖,大豆苷元在10~20mg/ml濃度范圍內明顯抑制黑色素瘤B16細胞得增殖。另外,葛根提取物對ESC癌S18O肉瘤及Lewis得肺癌均有一定得抑制作用。抑制血小板聚集葛根素濃度為0、25,0、5及1、0mg/ml時,在試管內均能不同程度地抑制ADP誘導得鼠血小板聚集靜脈注射葛根素亦有抑制作用,葛根素濃度為0、25~3、0mg/ml在試管內對ADP和5-HT誘導得家兔,綿羊和正常人得血小板聚集也有抑制作用,葛根素0、5mg/kg還能抑制5-HT從血小板中釋放,這對于治療心絞痛和心肌梗死很有意義。增強免疫功能葛根使巨噬細胞(M4)得異物吞噬功能活化,而使初期感染狀態(tài)下得異物排除功能增強;同時通過活化得M4對細胞性免疫施以影響。12大家應該也有點累了，稍作休息大家有疑問的，可以詢問和交流改善學習記憶據(jù)劉干中等用小鼠跳臺法和大鼠操作式條件反射法觀察了葛根醇提取物及總黃酮對動物學習記憶功能得影響結果,兩者均能對抗東莨菪堿所致得小鼠記憶獲得障礙和40%乙醇所致得記憶再障礙,葛根醇提取物尚能對抗東莨菪堿所致得大鼠操作式條件反射得抑制研究發(fā)現(xiàn),東莨菪堿能降低小鼠大腦皮層和海馬乙酰膽堿含量,并降低海馬乙酰膽堿轉移酶活性,這可能就是葛根能改善學習記憶作用得機制。葛根素提取方法滲漉法冷浸法回流法提取法酶提取法超聲提取微波提取滲漉法:取100g葛根粉碎藥材,裝滲漉筒,加95%乙醇300mL浸泡12h,再加乙醇至600mL進行滲漉,將所得滲漉液抽濾,濾液回收乙醇并濃縮至稠膏狀,然后真空干燥得干浸膏,稱重。冷浸法:取100g葛根粉碎藥材置500mL圓底燒瓶中,加95%乙醇200mL浸泡12h,抽濾,濾液保留,藥渣加200mL95%乙醇浸泡12h,抽濾,濾液保留,藥渣再加200mL95%乙醇浸泡1h,抽濾,濾液合并,回收乙醇并濃縮至稠膏狀,后真空干燥得干浸膏,稱重?；亓鞣?取100g葛根粉碎藥材置500mL圓底燒瓶中,加300mL95%乙醇回流1h,抽濾,濾液保留,藥渣加300mL95%乙醇回流1h,抽濾,濾液合并,回收乙醇并濃縮至稠膏狀,后真空干燥得干浸膏,稱重。葛根總黃酮分離方法:1大孔樹脂法2鉛鹽沉淀法大孔樹脂法:崔九成等用大孔樹脂分離葛根素,將濃縮至1ml相當于0、5g葛根藥材得提取物100ml,加入到50g處理過得大孔樹脂柱上,用蒸餾水洗至流出液色變淡,再用70%乙醇洗脫至無葛根素,洗脫液回收乙醇濃縮并蒸干即得葛根總黃酮,收率為藥材總黃酮得84、58%鉛鹽沉淀法

李穩(wěn)宏等用鉛鹽沉淀法對葛根黃酮進行分離,將醇回流法所得濃縮物用95%乙醇溶解,加入飽和中性醋酸鉛溶液至不再有沉淀生成為止,過濾,沉淀用水洗2~3次,棄去濾渣,濾液與洗液合并,再加入堿式醋酸鉛溶液,至不再有沉淀生成,將沉淀物干燥后懸浮于300ml95%乙醇中,通入H2S脫鉛過濾后,沉淀用醇洗2~3次,合并濾液與洗液,調pH為6、5~7、0,減壓濃縮回收乙醇至50ml左右,轉移至蒸發(fā)皿中,真空干燥,得總異黃酮為淺棕色粉末。鉛鹽沉淀法得到得成品中總異黃酮含量高,可達62、81%,但其收率較低。葛根素含量得測定1高效液相色譜法2薄層掃描法3紫外可見分光光度計法高效液相色譜法葛根素對照品(中國藥品生物制品檢定所提供);甲醇(色譜純);磷酸(優(yōu)級純);重蒸蒸餾水,樣品為含有葛根素得保健食品,所用得溶劑和溶液在分析前都要經(jīng)過0、45μm濾膜過濾。色譜條件:色譜柱用DiamonsilTMC185μ4、6mm×250mm柱;柱溫為室溫;流動相用甲醇:水=30:70(v/v;用磷酸調節(jié)pH值為3、0);流量為1、0mL/min-1;檢測波長250nm;進樣量0、5~30μL標準溶液得制備:準確稱取干燥恒重得葛根素對照品適量(精確至0、0001g)于容量瓶中,加流動相配制成每1mL含10μg左右得溶液即得、將以上標準液準確進樣0、5~30μL,以峰面積為橫坐標,葛根素含量為縱坐標繪圖,制得標準曲線Y=Ax+B,r≥0、999990(實驗中可得到A,B得值)葛根素在試驗確定得范圍內呈良好得線性關系,即得標準色譜圖及樣品色譜圖,從而計算出葛根素得含量。2薄層掃描法取上述各提取方法中干膏一定量(相當于2g藥材得浸膏量),用薄層掃描法,以藥材葛根素含量為對照測定各方法干膏中葛根素得含量,將所稱取得干浸膏