《NY/T4194.1-2022化學(xué)農(nóng)藥

鳥類急性經(jīng)口毒性試驗準(zhǔn)則

第1部分

：序貫法》(2026年)深度解析目錄01序貫法為何成為鳥類急性經(jīng)口毒性試驗新標(biāo)桿?專家視角解析標(biāo)準(zhǔn)核心價值與行業(yè)意義03試驗前期準(zhǔn)備藏著哪些關(guān)鍵要點?從供試物到試驗設(shè)施的全流程專家指導(dǎo)方案

序貫法試驗設(shè)計有何精妙之處?詳解分組

、

劑量設(shè)計及試驗周期的科學(xué)邏輯05數(shù)據(jù)處理如何兼顧精準(zhǔn)與高效?序貫法數(shù)據(jù)統(tǒng)計核心方法及結(jié)果判定規(guī)則解析07標(biāo)準(zhǔn)實施中常見疑點如何破解?專家答疑試驗誤差

、倫理合規(guī)等熱點問題09未來5年試驗技術(shù)如何演進(jìn)?基于標(biāo)準(zhǔn)的農(nóng)藥生態(tài)毒性評價發(fā)展趨勢預(yù)測02040608標(biāo)準(zhǔn)適用邊界如何界定?深度剖析NY/T4194.1-2022適用范圍

、

對象及排除情形試驗操作環(huán)節(jié)如何把控質(zhì)量?給藥

、觀察及記錄的規(guī)范流程與關(guān)鍵控制點試驗報告撰寫有哪些硬性要求?核心要素

、格式規(guī)范及審核要點全梳理與國際同類標(biāo)準(zhǔn)相比有何優(yōu)勢?NY/T4194.1-2022國際化適配性及特色分析、序貫法為何成為鳥類急性經(jīng)口毒性試驗新標(biāo)桿？專家視角解析標(biāo)準(zhǔn)核心價值與行業(yè)意義序貫法相較于傳統(tǒng)方法的突破性優(yōu)勢傳統(tǒng)試驗需預(yù)設(shè)大量試驗動物，存在資源浪費(fèi)與倫理爭議。序貫法按實時結(jié)果動態(tài)調(diào)整劑量，減少50%以上動物用量，兼顧科學(xué)性與倫理要求。同時縮短試驗周期，傳統(tǒng)法需30天，序貫法14天即可完成核心流程，適配農(nóng)藥研發(fā)高效需求。（二）標(biāo)準(zhǔn)制定的行業(yè)背景與政策驅(qū)動隨著《生物多樣性公約》履約深化，農(nóng)藥生態(tài)風(fēng)險評價要求升級。此前無統(tǒng)一序貫法標(biāo)準(zhǔn)，試驗結(jié)果可比性差。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部牽頭整合科研機(jī)構(gòu)數(shù)據(jù)，歷時3年制定，填補(bǔ)國內(nèi)空白，契合綠色農(nóng)藥發(fā)展政策導(dǎo)向。12（三）標(biāo)準(zhǔn)對農(nóng)藥行業(yè)發(fā)展的核心指導(dǎo)價值為農(nóng)藥登記提供統(tǒng)一試驗依據(jù)，避免企業(yè)重復(fù)試驗。明確高毒農(nóng)藥篩選閾值，引導(dǎo)企業(yè)研發(fā)低毒產(chǎn)品。其規(guī)范的試驗流程降低檢測機(jī)構(gòu)間數(shù)據(jù)偏差，提升國內(nèi)農(nóng)藥出口的國際認(rèn)可度。、標(biāo)準(zhǔn)適用邊界如何界定？深度剖析NY/T4194.1-2022適用范圍、對象及排除情形適用的農(nóng)藥類型與試驗?zāi)康慕缍?1適用于化學(xué)農(nóng)藥原藥、單劑及混合制劑的急性經(jīng)口毒性評價，含殺蟲劑、殺菌劑等。試驗?zāi)康南薅闇y定LD50值及毒性分級，不適用于慢性毒性、生殖毒性等其他評價指標(biāo)，明確與其他準(zhǔn)則的分工。02優(yōu)先選用敏感物種，如鵪鶉、麻雀等非保護(hù)鳥類。規(guī)定供試鳥齡為成年鳥，體重波動不超過平均體重±10%，健康狀況需經(jīng)7天檢疫確認(rèn)。排除幼鳥、孕鳥及患病個體，確保試驗穩(wěn)定性。（二）供試鳥類的選擇標(biāo)準(zhǔn)與范圍010201（三）明確的排除適用情形說明01排除固體農(nóng)藥無法制成均勻混懸液的情形，因劑量準(zhǔn)確性無法保證。對揮發(fā)性強(qiáng)（蒸氣壓>10Pa/20℃)農(nóng)藥不適用，避免經(jīng)呼吸道中毒干擾結(jié)果。同時排除鳥類不攝食的特殊劑型，如種衣劑。02、試驗前期準(zhǔn)備藏著哪些關(guān)鍵要點？從供試物到試驗設(shè)施的全流程專家指導(dǎo)方案供試物采集、保存與表征要求供試物需從批量產(chǎn)品中隨機(jī)抽樣，樣品量不少于試驗用量3倍。原藥需測定純度，制劑需明確有效成分含量。保存溫度控制在0-4℃,避光密封，保存期不超過3個月，每批樣品需附質(zhì)量檢測報告。12（二）試驗鳥類的檢疫與飼養(yǎng)管理規(guī)范01檢疫期7天內(nèi)，每日觀察采食、飲水及糞便狀況，淘汰異常個體。飼養(yǎng)環(huán)境溫度20-25℃,濕度40%-70%，光照12h/12h交替。飼料需符合GB14924.3標(biāo)準(zhǔn)，飲水經(jīng)滅菌處理，提前適應(yīng)環(huán)境3天。02（三）試驗設(shè)施與儀器的校準(zhǔn)及驗證飼養(yǎng)籠具需經(jīng)消毒滅菌，尺寸滿足每鳥≥0.15㎡活動空間。電子天平精度需達(dá)0.001g，定期經(jīng)計量機(jī)構(gòu)校準(zhǔn)。灌胃針需匹配鳥體大小，預(yù)試驗驗證無損傷，試驗前需用75%酒精消毒。、序貫法試驗設(shè)計有何精妙之處？詳解分組、劑量設(shè)計及試驗周期的科學(xué)邏輯序貫法試驗分組的核心原則01采用單只序貫分組，不預(yù)設(shè)固定組數(shù)，根據(jù)前一只鳥反應(yīng)確定下一只劑量。首只劑量參考預(yù)試驗結(jié)果，選預(yù)期LD50附近值。相鄰劑量比控制在1:2-1:3，確保劑量梯度合理覆蓋毒性范圍。02（二）劑量設(shè)計的數(shù)學(xué)模型與參數(shù)設(shè)定01基于Bliss法數(shù)學(xué)模型，設(shè)定置信水平95%，LD50估計誤差≤20%。根據(jù)預(yù)試驗死亡率調(diào)整劑量，若前只存活則提高劑量，死亡則降低劑量。當(dāng)連續(xù)3只出現(xiàn)生死交替時，進(jìn)入劑量密集區(qū)。02總周期14天，含預(yù)試驗3天、正式試驗7天、恢復(fù)期4天。預(yù)試驗每日記錄毒性癥狀，確定劑量范圍。正式試驗給藥后4h內(nèi)每小時觀察，之后每日2次。恢復(fù)期觀察體重回升及癥狀消失情況。（三）試驗周期的分段設(shè)計與時間節(jié)點把控010201、試驗操作環(huán)節(jié)如何把控質(zhì)量？給藥、觀察及記錄的規(guī)范流程與關(guān)鍵控制點采用灌胃法給藥，灌胃針插入深度為鳥喙至胸骨劍突1/2處。劑量按體重計算，每100g體重給藥0.5-1.0mL，確保藥液送入嗉囊。給藥后觀察5min，確認(rèn)無嘔吐后放入飼養(yǎng)籠，嘔吐則需補(bǔ)做。經(jīng)口給藥的操作規(guī)范與劑量準(zhǔn)確性控制010201毒性癥狀觀察的重點指標(biāo)與分級標(biāo)準(zhǔn)重點觀察神經(jīng)系統(tǒng)（共濟(jì)失調(diào)、震顫）、消化系統(tǒng)（嘔吐、腹瀉）及呼吸系統(tǒng)（呼吸困難）癥狀。按嚴(yán)重程度分4級：輕微（僅行為異常）、中度（出現(xiàn)體征變化）、重度（功能障礙）、死亡。每日記錄癥狀出現(xiàn)及持續(xù)時間。原始記錄的填寫要求與溯源性保障使用統(tǒng)一記錄表，填寫供試物信息、鳥只編號、劑量、給藥時間及觀察結(jié)果。記錄需實時手寫，簽字確認(rèn)，不得涂改。原始數(shù)據(jù)需含體重變化曲線、癥狀照片等佐證材料，保存期不少于5年。010302六

、

數(shù)據(jù)處理如何兼顧精準(zhǔn)與高效？

序貫法數(shù)據(jù)統(tǒng)計核心方法及結(jié)果判定規(guī)則解析（七）

數(shù)據(jù)篩選與異常值處理的科學(xué)方法采用Grubbs

法檢驗異常值，當(dāng)數(shù)據(jù)偏差超過3倍標(biāo)準(zhǔn)差時，

需核查試驗過程

。

若因操作失誤導(dǎo)致異常，

需注明原因并剔除；

無法解釋則保留，

在報告中說明

。體重變化超過±20%且無毒性癥狀，

視為飼養(yǎng)誤差。（八）

序貫法專用統(tǒng)計軟件的應(yīng)用要點推薦使用Probit

或Bliss

統(tǒng)計軟件，

輸入劑量

、

反應(yīng)（生死）

數(shù)據(jù)

。

軟件自動計算LD50及95%置信區(qū)間，

繪制劑量-反應(yīng)曲線

。

需驗證軟件計算結(jié)果，

手工復(fù)核關(guān)鍵數(shù)據(jù)點，

確保統(tǒng)計模型適配性。（九）

毒性分級結(jié)果的判定依據(jù)與表述規(guī)范按LD50值分為極高毒（

<5mg/kg）、

高毒（5-50mg/kg）

、

中毒（50-300mg/kg）

、

低毒（

>300mg/kg）

四級

。

結(jié)果表述需含LD50值

、

95%置信區(qū)間及試驗

只數(shù)

。

當(dāng)置信區(qū)間過寬（跨度>10倍）

，

需重新試驗。七

、

試驗報告撰寫有哪些硬性要求？核心要素

、格式規(guī)范及審核要點全梳理（十）

試驗報告的核心要素與結(jié)構(gòu)框架含摘要

、

試驗?zāi)康?/p>

、供試物信息

、

試驗設(shè)計

、

操作流程

、

數(shù)據(jù)處理

、

結(jié)果與討論

、

結(jié)論8部分

。

摘要需簡述LD50結(jié)果及毒性分級

。

討論部分需分析結(jié)果合理性，對比同類農(nóng)藥數(shù)據(jù)，

說明試驗局限性。（十一）

報告格式的規(guī)范性要求與編制技巧采用A4紙張，

字體為宋體，

標(biāo)題三號加粗，

正文小四

。

圖表需編號并附說明，

照片需標(biāo)注鳥只編號及拍攝時間

。

引用標(biāo)準(zhǔn)需注明全稱及編號，

參考文獻(xiàn)符合

GB/T

7714格式

。報告需裝訂成冊，

含封面

、目錄及簽字頁。（十二）

報告審核的關(guān)鍵節(jié)點與質(zhì)量把控措施實行三級審核：

試驗人員自審

、

科室負(fù)責(zé)人復(fù)審

、機(jī)構(gòu)技術(shù)負(fù)責(zé)人終審

。自審核查數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性，

復(fù)審確認(rèn)流程合規(guī)性，

終審判定結(jié)果可靠性

。

審核需出具意見并簽字，

不合格需返回修改，

直至通過。八

、標(biāo)準(zhǔn)實施中常見疑點如何破解？

專家答疑試驗誤差

、倫理合規(guī)等熱點問題（十三）

試驗誤差的來源分析與控制對策主要誤差來源為供試物均勻性

、

鳥只個體差異及操作一致性

。

對策：

制劑需超聲混勻并過0.45

μm濾膜；

鳥只按體重分層隨機(jī)分配；

操作人員需經(jīng)培訓(xùn)考核，

統(tǒng)一操作規(guī)范，

定期開展比對試驗。（十四）

試驗動物倫理的合規(guī)要求與實踐方案遵循“3R”原則，

減少動物用量，

采用替代方法預(yù)篩

。

試驗中對重度中毒鳥實施安樂死，

避免痛苦

。

需經(jīng)機(jī)構(gòu)動物倫理委員會審批，

獲得倫理審查批件

。

試驗后存活鳥需觀察

14天

，

確認(rèn)健康后放生。（十五）

不同劑型農(nóng)藥試驗的特殊問題解決方案油劑農(nóng)藥需用食用油稀釋，

避免刺激嗉囊；

水分散粒劑需充分溶解，

超聲脫氣防氣泡

。

緩釋制劑需延長觀察周期至21天

，

監(jiān)測毒性持續(xù)時間

。

混合制劑需明確各成分比例，

單獨(dú)開展原藥毒性試驗作對比。九

、

與國際同類標(biāo)準(zhǔn)相比有何優(yōu)勢？

NY/T4194.1-2022

國際化適配性及特色分析（十六）

與OECD205標(biāo)準(zhǔn)的核心差異對比OECD205為傳統(tǒng)固定劑量法，

NY/T4194.1采用序貫法，

動物用量減少40%

。

OECD205劑量梯度為1:4，

本標(biāo)準(zhǔn)為

1:2-1:3

，

結(jié)果更精準(zhǔn)

。本標(biāo)準(zhǔn)增加恢復(fù)期觀察，

OECD205無明確恢復(fù)期要求，

更適配國內(nèi)農(nóng)藥評價需求。（十七）

標(biāo)準(zhǔn)的國際化適配性與跨境應(yīng)用價值核心技術(shù)指標(biāo)與國際接軌，

LD50計算方法采用國際通用Bliss

法

。

試驗結(jié)果獲FAO/WHO

農(nóng)藥評價機(jī)構(gòu)認(rèn)可，

可作為農(nóng)藥國際登記的試驗數(shù)據(jù)

。針對亞洲鳥類物種特性調(diào)整供試鳥選擇，

比國際標(biāo)準(zhǔn)更具區(qū)域適用性。（十八）

我國標(biāo)準(zhǔn)的自主創(chuàng)新點與技術(shù)突破首創(chuàng)“預(yù)試驗-正式試驗-恢復(fù)期”三段式流程，

提高結(jié)果可靠性

。

建立敏感物種篩選庫，

涵蓋5種本土鳥類，

解決國際標(biāo)準(zhǔn)物種不適配問題

。

開發(fā)序貫法數(shù)據(jù)處理簡化公式，

降低中小企業(yè)使用門檻。十

、

未來5年試驗技術(shù)如何演進(jìn)？

基于標(biāo)準(zhǔn)的農(nóng)藥生態(tài)毒性評價發(fā)展趨勢預(yù)測（十九）

試驗技術(shù)的智能化升級方向與路徑未來5年將實現(xiàn)飼養(yǎng)環(huán)境智能監(jiān)控，自動調(diào)節(jié)溫濕度及光照

。

開發(fā)AI

毒性癥狀識別系統(tǒng)，

實時抓拍分析行為異常

。

序貫法統(tǒng)計軟件將集成云端數(shù)據(jù)庫，

實現(xiàn)數(shù)據(jù)自動比對與結(jié)果預(yù)判。（二十）

替代試驗方法的研發(fā)進(jìn)展與應(yīng)用前景