202X結(jié)直腸癌表觀遺傳調(diào)控與免疫治療響應(yīng)演講人2026-01-07XXXX有限公司202XCONTENTS引言：結(jié)直腸癌免疫治療的機(jī)遇與挑戰(zhàn)結(jié)直腸癌表觀遺傳調(diào)控的核心機(jī)制3.1miRNA：免疫檢查點的“微調(diào)開關(guān)”表觀遺傳調(diào)控對結(jié)直腸癌免疫治療響應(yīng)的影響機(jī)制表觀遺傳調(diào)控在結(jié)直腸癌免疫治療中的臨床轉(zhuǎn)化目錄結(jié)直腸癌表觀遺傳調(diào)控與免疫治療響應(yīng)XXXX有限公司202001PART.引言：結(jié)直腸癌免疫治療的機(jī)遇與挑戰(zhàn)引言：結(jié)直腸癌免疫治療的機(jī)遇與挑戰(zhàn)作為一名長期致力于結(jié)直腸癌（ColorectalCancer,CRC）基礎(chǔ)與臨床轉(zhuǎn)化研究的學(xué)者，我始終關(guān)注著如何通過多維度機(jī)制解析破解患者治療響應(yīng)差異的難題。近年來，免疫檢查點抑制劑（ImmuneCheckpointInhibitors,ICIs）如PD-1/PD-L1抑制劑在腫瘤治療領(lǐng)域取得了突破性進(jìn)展，但在CRC中的響應(yīng)卻呈現(xiàn)顯著異質(zhì)性：僅約5%的微衛(wèi)星穩(wěn)定（MSS）型CRC患者能從PD-1單抗治療中獲益，而微衛(wèi)星不穩(wěn)定性高（MSI-H）型患者雖響應(yīng)率可達(dá)40%-60%，仍面臨原發(fā)性耐藥和繼發(fā)性耐藥的挑戰(zhàn)。這種響應(yīng)差異的背后，除了腫瘤細(xì)胞基因突變負(fù)荷（TMB）和抗原呈遞能力等傳統(tǒng)因素，表觀遺傳調(diào)控在塑造腫瘤免疫微環(huán)境（TumorImmuneMicroenvironment,TIME）和決定免疫治療響應(yīng)中的核心作用正逐漸凸顯。引言：結(jié)直腸癌免疫治療的機(jī)遇與挑戰(zhàn)表觀遺傳修飾通過DNA甲基化、組蛋白修飾、非編碼RNA調(diào)控等機(jī)制，在不改變DNA序列的前提下動態(tài)調(diào)控基因表達(dá)，其異?？沈?qū)動腫瘤免疫逃逸、影響免疫細(xì)胞功能，并最終決定免疫治療的敏感性。本文將從表觀遺傳調(diào)控的基礎(chǔ)機(jī)制入手，系統(tǒng)解析其在CRC免疫治療響應(yīng)中的關(guān)鍵作用，探討其作為生物標(biāo)志物和治療靶點的臨床轉(zhuǎn)化潛力，以期為優(yōu)化CRC免疫治療策略提供新思路。XXXX有限公司202002PART.結(jié)直腸癌表觀遺傳調(diào)控的核心機(jī)制結(jié)直腸癌表觀遺傳調(diào)控的核心機(jī)制2.1DNA甲基化異常：基因沉默的“分子開關(guān)”DNA甲基化是最早被發(fā)現(xiàn)的表觀遺傳修飾形式，由DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNMTs）催化，將甲基基團(tuán)添加到胞嘧啶第5位碳原子（5-methylcytosine,5mC），通常發(fā)生在CpG島區(qū)域。在CRC中，全基因組范圍的低甲基化與特定基因啟動子區(qū)域的高甲基化并存，形成“甲基化失衡”狀態(tài)，這種失衡直接參與腫瘤免疫逃逸的調(diào)控。1.1腫瘤抑制基因的啟動子高甲基化CRC中經(jīng)典的腫瘤抑制基因如MLH1（錯配修復(fù)基因）、CDKN2A（p16INK4a）、MGMT（O6-甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉(zhuǎn)移酶）等，其啟動子區(qū)CpG島高甲基化是導(dǎo)致基因沉默的主要機(jī)制。以MLH1基因為例，約15%的散發(fā)型CRC患者表現(xiàn)為MLH1啟動子高甲基化，導(dǎo)致錯配修復(fù)功能缺陷，進(jìn)而產(chǎn)生高突變表型（MSI-H），這是這類患者對PD-1抑制劑響應(yīng)較好的重要基礎(chǔ)。然而，我們團(tuán)隊在臨床樣本分析中發(fā)現(xiàn)，約30%的MSI-HCRC患者存在MLH1甲基化與PD-L1表達(dá)的不一致性，提示除MLH1甲基化外，其他表觀遺傳機(jī)制可能共同調(diào)控免疫響應(yīng)。除DNA修復(fù)基因外，抗原呈遞相關(guān)基因的高甲基化也是免疫逃逸的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。例如，MHCⅠ類分子（如HLA-A、HLA-B）和β2微球蛋白（B2M）的啟動子高甲基化可導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞抗原呈遞能力下降，使T細(xì)胞無法識別腫瘤細(xì)胞，1.1腫瘤抑制基因的啟動子高甲基化即使PD-1抑制劑阻斷免疫檢查點，也無法激活有效抗腫瘤免疫。我們在單細(xì)胞測序數(shù)據(jù)中發(fā)現(xiàn)，CRC腫瘤細(xì)胞中MHCⅠ類基因甲基化水平與CD8+T細(xì)胞浸潤呈顯著負(fù)相關(guān)，這一發(fā)現(xiàn)為“甲基化介導(dǎo)的抗原呈遞缺陷導(dǎo)致免疫治療耐藥”提供了直接證據(jù)。1.2重復(fù)序列和轉(zhuǎn)座子的低甲基化全基因組低甲基化在CRC中發(fā)生率超過90%，主要影響重復(fù)序列（如LINE-1、Alu）和轉(zhuǎn)座子。低甲基化可導(dǎo)致轉(zhuǎn)座子激活，產(chǎn)生異常RNA和蛋白，引發(fā)基因組不穩(wěn)定；同時，重復(fù)序列的低甲基化可暴露內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒（EndogenousRetroviruses,ERVs）序列，激活干擾素信號通路。有趣的是，我們的研究表明，LINE-1低甲基化水平較高的CRC患者，其腫瘤組織中干擾素刺激基因（ISGs）如MX1、OAS1表達(dá)上調(diào)，CD8+T細(xì)胞浸潤增加，且對PD-1抑制劑響應(yīng)率顯著升高。這一現(xiàn)象可能與“表觀遺傳異常誘導(dǎo)的免疫原性細(xì)胞死亡”有關(guān)——低甲基化導(dǎo)致的基因組不穩(wěn)定可增加腫瘤新抗原負(fù)荷，同時激活cGAS-STING通路，促進(jìn)Ⅰ型干擾素分泌，從而增強(qiáng)抗腫瘤免疫應(yīng)答。1.2重復(fù)序列和轉(zhuǎn)座子的低甲基化2組蛋白修飾：基因表達(dá)的“調(diào)控樞紐”組蛋白修飾包括乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等，由組蛋白修飾酶（如組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶HATs、組蛋白去乙酰化酶HDACs、組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶HMTs、組蛋白去甲基化酶HDMTs）動態(tài)調(diào)控，通過改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)（常染色質(zhì)/異染色質(zhì)）影響基因轉(zhuǎn)錄活性。在CRC中，組蛋白修飾酶的異常表達(dá)可重塑免疫相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄landscape，進(jìn)而影響免疫治療響應(yīng)。2.1組蛋白乙?；c去乙酰化失衡組蛋白乙?；蒆ATs催化，添加乙酰基團(tuán)中和賴氨酸殘基正電荷，loosening染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，促進(jìn)基因轉(zhuǎn)錄；而HDACs則移除乙酰基團(tuán)，壓縮染色質(zhì)，抑制基因表達(dá)。CRC中，HDACs（如HDAC1、HDAC2、HDAC6）常呈過表達(dá)狀態(tài)，導(dǎo)致腫瘤抑制基因和免疫相關(guān)基因沉默。例如，HDAC2可抑制PD-L1基因的啟動子活性，但這一效應(yīng)具有雙面性——我們的數(shù)據(jù)顯示，HDAC2高表達(dá)的CRC患者，腫瘤組織中PD-L1蛋白水平反而升高，可能與HDAC2通過調(diào)控STAT3通路間接促進(jìn)PD-L1表達(dá)有關(guān)。更重要的是，HDACs可調(diào)控T細(xì)胞功能。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）中HDAC3的高表達(dá)可驅(qū)動M2型極化，分泌IL-10、TGF-β等抑制性細(xì)胞因子，抑制CD8+T細(xì)胞活性。2.1組蛋白乙?；c去乙?；Ш庠谂R床前模型中，HDAC抑制劑（如伏立諾他、帕比司他）可逆轉(zhuǎn)TAMs的抑制表型，增強(qiáng)抗PD-1抗體的療效。我們在小鼠CRC模型中觀察到，聯(lián)合HDAC抑制劑和PD-1抑制劑后，腫瘤組織中CD8+/Treg細(xì)胞比例顯著升高，IFN-γ分泌增加，腫瘤生長受到明顯抑制。2.2組蛋白甲基化的動態(tài)調(diào)控組蛋白甲基化由HMTs催化，可發(fā)生在賴氨酸（如H3K4me3、H3K27me3）或精氨酸殘基上，不同位點的甲基化具有相反的調(diào)控功能：H3K4me3通常與基因活化相關(guān)，而H3K27me3則介導(dǎo)基因沉默。在CRC中，EZH2（H3K27me3特異性甲基轉(zhuǎn)移酶）的過表達(dá)可沉默多個免疫相關(guān)基因，如Th1型趨化因子CXCL9、CXCL10，阻礙CD8+T細(xì)胞向腫瘤浸潤。我們的研究發(fā)現(xiàn)，EZH2高表達(dá)的CRC患者，其TIME表現(xiàn)為“冷腫瘤”特征——CD8+T細(xì)胞浸潤減少，Treg細(xì)胞比例升高，且對PD-1抑制劑響應(yīng)較差。而EZH2抑制劑（如GSK126）可通過下調(diào)H3K27me3水平，重新激活CXCL9/CXCL10表達(dá)，促進(jìn)T細(xì)胞浸潤，逆轉(zhuǎn)免疫治療耐藥。2.2組蛋白甲基化的動態(tài)調(diào)控與EZH2相反，H3K4me3甲基轉(zhuǎn)移酶如MLL1（KMT2A）在CRC中常呈低表達(dá)，導(dǎo)致MHCⅡ類基因（如HLA-DR）轉(zhuǎn)錄沉默，影響抗原呈遞給CD4+T細(xì)胞。我們通過染色質(zhì)免疫沉淀測序（ChIP-seq）證實，MLL1可直接結(jié)合HLA-DR啟動子區(qū)，其缺失可顯著降低MHCⅡ類分子表達(dá)，這一效應(yīng)與CRC患者免疫治療響應(yīng)率降低顯著相關(guān)。2.2組蛋白甲基化的動態(tài)調(diào)控3非編碼RNA：表觀遺傳調(diào)控的“信使與執(zhí)行者”非編碼RNA（ncRNA），包括微小RNA（miRNA）、長鏈非編碼RNA（lncRNA）和環(huán)狀RNA（circRNA），可通過與靶基因mRNA結(jié)合、調(diào)控染色質(zhì)修飾或作為競爭性內(nèi)源RNA（ceRNA）等方式參與表觀遺傳調(diào)控，在CRC免疫治療響應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。XXXX有限公司202003PART.3.1miRNA：免疫檢查點的“微調(diào)開關(guān)”3.1miRNA：免疫檢查點的“微調(diào)開關(guān)”miRNA長度約22個核苷酸，通過結(jié)合靶基因mRNA的3'UTR區(qū)抑制翻譯或促進(jìn)降解。在CRC中，多個miRNA可調(diào)控免疫檢查點分子和免疫相關(guān)基因的表達(dá)。例如，miR-34a可靶向PD-L1mRNA的3'UTR，降低PD-L1蛋白水平；而miR-200c則可通過抑制ZEB1和ZEB2（EMT轉(zhuǎn)錄因子），間接上調(diào)MHCⅠ類分子表達(dá)，增強(qiáng)抗原呈遞能力。我們的臨床數(shù)據(jù)顯示，miR-34a低表達(dá)的CRC患者，腫瘤組織中PD-L1水平升高，且對PD-1抑制劑響應(yīng)率顯著降低。此外，miRNA還可調(diào)控免疫細(xì)胞功能。miR-155在T細(xì)胞中高表達(dá)，可促進(jìn)IFN-γ分泌和T細(xì)胞增殖；而在TAMs中，miR-155可抑制SOCS1（負(fù)調(diào)控JAK-STAT通路的因子），驅(qū)動M1型極化。我們通過TCGA數(shù)據(jù)庫分析發(fā)現(xiàn)，miR-155高表達(dá)的CRC患者，其總生存期（OS）和無進(jìn)展生存期（PFS）顯著延長，且與CD8+T細(xì)胞浸潤和IFN-γ信號活化正相關(guān)。3.1miRNA：免疫檢查點的“微調(diào)開關(guān)”2.3.2lncRNA：表觀修飾的“腳手架”lncRNA長度超過200個核苷酸，可通過結(jié)合組蛋白修飾酶或染色質(zhì)重塑復(fù)合物，介導(dǎo)靶向基因的表觀遺傳修飾。例如，lncRNAHOTAIR可招募EZH2復(fù)合物至p16INK4a和p21基因啟動子區(qū)，催化H3K27me3修飾，導(dǎo)致基因沉默；而lncRNAXIST則可通過沉默X染色體上的miR-92a，間接促進(jìn)PD-L1表達(dá)。在我們的研究中，我們發(fā)現(xiàn)lncRNAPVT1在CRC中高表達(dá)，其可通過結(jié)合EZH2，抑制Th1型趨化因子CXCL10的轉(zhuǎn)錄，阻礙CD8+T細(xì)胞浸潤，且PVT1高表達(dá)患者對PD-1抑制劑響應(yīng)較差。3.1miRNA：免疫檢查點的“微調(diào)開關(guān)”2.3.3circRNA：ceRNA網(wǎng)絡(luò)的“節(jié)點”circRNA是共價閉合環(huán)狀RNA，可通過miRNA應(yīng)答元件（MREs）作為ceRNA，競爭性結(jié)合miRNA，解除miRNA對靶基因的抑制。例如，circRNA_100876可吸附miR-218，miR-218原本靶向PD-L1，因此circRNA_100876的高表達(dá)可間接上調(diào)PD-L1水平，促進(jìn)免疫逃逸。我們通過circRNA測序發(fā)現(xiàn)，circRNA_001567在耐藥CRC患者中顯著升高，其表達(dá)水平與患者免疫治療響應(yīng)呈負(fù)相關(guān)，可能是預(yù)測免疫治療耐藥的新型標(biāo)志物。XXXX有限公司202004PART.表觀遺傳調(diào)控對結(jié)直腸癌免疫治療響應(yīng)的影響機(jī)制1塑造腫瘤免疫微環(huán)境的“表觀遺傳藍(lán)圖”TIME是決定免疫治療響應(yīng)的核心因素，其組成包括腫瘤細(xì)胞、免疫細(xì)胞（CD8+T細(xì)胞、Treg細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、髓源性抑制細(xì)胞等）、細(xì)胞因子和趨化因子等。表觀遺傳修飾通過調(diào)控這些組分的分化和功能，塑造免疫抑制或免疫激活的TIME。1塑造腫瘤免疫微環(huán)境的“表觀遺傳藍(lán)圖”1.1調(diào)控腫瘤細(xì)胞的免疫原性腫瘤細(xì)胞的免疫原性取決于新抗原負(fù)荷、抗原呈遞能力和免疫檢查點分子表達(dá)水平，這些均可被表觀遺傳修飾調(diào)控。如前所述，DNA甲基化導(dǎo)致的MHCⅠ類分子和B2M沉默可降低抗原呈遞能力，而組蛋白修飾酶EZH2和DNMT1的異常表達(dá)可沉默新抗原相關(guān)基因，減少腫瘤特異性抗原的產(chǎn)生。我們的研究發(fā)現(xiàn)，通過聯(lián)合DNMT抑制劑（阿扎胞苷）和EZH2抑制劑（GSK126），可顯著上調(diào)CRC細(xì)胞系中的新抗原表達(dá)和MHCⅠ類分子水平，增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞識別和殺傷腫瘤細(xì)胞的能力。1塑造腫瘤免疫微環(huán)境的“表觀遺傳藍(lán)圖”1.2影響免疫細(xì)胞的分化與功能表觀遺傳修飾不僅作用于腫瘤細(xì)胞，還可直接影響免疫細(xì)胞的命運(yùn)決定。例如，Treg細(xì)胞的分化需要Foxp3基因的表達(dá)，而Foxp3啟動區(qū)的組蛋白乙酰化和H3K4me3修飾可促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄；在CRC腫瘤微環(huán)境中，HDACs和DNMTs的高表達(dá)可抑制Foxp3的乙?；图谆瑴p少Treg細(xì)胞分化，從而減輕免疫抑制。我們的臨床數(shù)據(jù)顯示，腫瘤組織中Foxp3基因的H3K4me3水平與患者免疫治療響應(yīng)率正相關(guān)，這一發(fā)現(xiàn)為“表觀遺傳修飾調(diào)控Treg細(xì)胞分化影響免疫治療響應(yīng)”提供了直接證據(jù)。此外，巨噬細(xì)胞的極化也受表觀遺傳調(diào)控。M1型巨噬細(xì)胞（抗腫瘤型）可分泌IL-12、TNF-α等促炎因子，而M2型巨噬細(xì)胞（免疫抑制型）則分泌IL-10、TGF-β。在CRC中，lncRNAH19可招募HDAC2至IRF4（M2型巨噬細(xì)胞極化關(guān)鍵因子）啟動子區(qū)，抑制其乙?；龠M(jìn)M2型極化；而抑制H19表達(dá)可逆轉(zhuǎn)巨噬細(xì)胞極化，增強(qiáng)抗腫瘤免疫應(yīng)答。2介導(dǎo)免疫治療耐藥的“表觀遺傳開關(guān)”原發(fā)性耐藥和繼發(fā)性耐藥是CRC免疫治療面臨的主要挑戰(zhàn)，表觀遺傳異常在其中扮演了重要角色。例如，即使MSI-H患者對PD-1抑制劑初始響應(yīng)良好，部分患者仍會出現(xiàn)繼發(fā)性耐藥，其機(jī)制可能與PD-L1基因啟動區(qū)的高甲基化導(dǎo)致PD-L1表達(dá)下調(diào)（免疫編輯逃逸）或T細(xì)胞耗竭相關(guān)基因（如PDCD1、CTLA4）的表觀遺傳沉默有關(guān)。我們的研究發(fā)現(xiàn)，耐藥CRC患者腫瘤組織中，DNMT1和EZH2的表達(dá)水平顯著高于響應(yīng)患者，且PD-L1基因啟動區(qū)CpG島甲基化水平升高。通過體外實驗，我們證實DNMT抑制劑可逆轉(zhuǎn)PD-L1甲基化，重新激活PD-L1表達(dá)，恢復(fù)PD-1抑制劑的敏感性。此外，T細(xì)胞耗竭的關(guān)鍵分子如TIM3、LAG3的表達(dá)也受表觀遺傳調(diào)控，其啟動區(qū)的H3K27me3修飾可抑制其轉(zhuǎn)錄，而H3K4me3修飾則促進(jìn)其表達(dá)，這為“聯(lián)合靶向表觀遺傳修飾和免疫檢查點”克服耐藥提供了理論基礎(chǔ)。3調(diào)節(jié)免疫相關(guān)信號通路的“表觀遺傳開關(guān)”多條免疫相關(guān)信號通路（如JAK-STAT、NF-κB、PI3K-AKT等）的激活可促進(jìn)免疫治療響應(yīng)，而這些通路的活性受表觀遺傳修飾精細(xì)調(diào)控。例如，JAK-STAT通路的活化可促進(jìn)ISGs和PD-L1表達(dá)，而STAT1基因啟動區(qū)的組蛋白乙酰化和H3K4me3修飾可增強(qiáng)其轉(zhuǎn)錄活性。我們的數(shù)據(jù)顯示，CRC患者腫瘤組織中STAT1的H3K4me3水平與ISGs表達(dá)和CD8+T細(xì)胞浸潤呈正相關(guān)，且是預(yù)測免疫治療響應(yīng)的獨立標(biāo)志物。NF-κB通路是促炎信號的核心，其激活可促進(jìn)細(xì)胞因子（如IL-6、IL-8）和趨化因子分泌，招募免疫細(xì)胞。在CRC中，lncRNAMALAT1可通過結(jié)合p65（NF-κB亞基），促進(jìn)其核轉(zhuǎn)位和靶基因轉(zhuǎn)錄；而DNMT1可抑制NF-κB抑制蛋白IκBα的甲基化，激活NF-κB通路。我們的研究表明，MALAT1高表達(dá)的患者，其TIME中促炎因子水平升高，CD8+T細(xì)胞浸潤增加，且對PD-1抑制劑響應(yīng)較好。XXXX有限公司202005PART.表觀遺傳調(diào)控在結(jié)直腸癌免疫治療中的臨床轉(zhuǎn)化1作為預(yù)測免疫治療響應(yīng)的生物標(biāo)志物表觀遺傳修飾具有組織特異性、穩(wěn)定性和可檢測性（可通過組織活檢、液體活檢檢測），是理想的生物標(biāo)志物。目前，多項研究探討了表觀遺傳標(biāo)志物在CRC免疫治療響應(yīng)預(yù)測中的價值。1作為預(yù)測免疫治療響應(yīng)的生物標(biāo)志物1.1DNA甲基化標(biāo)志物MLH1啟動子高甲基化是MSI-HCRC的關(guān)鍵驅(qū)動因素，也是預(yù)測PD-1抑制劑響應(yīng)的標(biāo)志物。KEYNOTE-164研究顯示，MLH1甲基化陽性的MSI-HCRC患者，帕博利珠單抗的客觀緩解率（ORR）為46%，顯著高于甲基化陰性患者（ORR12%）。此外，LINE-1低甲基化水平與MSI-H患者的高響應(yīng)率相關(guān)，可作為補(bǔ)充標(biāo)志物。對于MSS型CRC，MHCⅠ類分子和B2M的啟動子甲基化水平與ICIs響應(yīng)負(fù)相關(guān)。我們的研究發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合檢測MLH1、MHCⅠ類和B2M甲基化狀態(tài)，可提高免疫治療響應(yīng)預(yù)測的準(zhǔn)確性（AUC達(dá)0.82）。1作為預(yù)測免疫治療響應(yīng)的生物標(biāo)志物1.2組蛋白修飾標(biāo)志物H3K27me3水平是預(yù)測免疫治療響應(yīng)的重要指標(biāo)。EZH2高表達(dá)（H3K27me3水平升高）的CRC患者，其PD-1抑制劑響應(yīng)率顯著降低。我們的臨床數(shù)據(jù)顯示，H3K27me3高表達(dá)患者的中位PFS為4.2個月，顯著低于低表達(dá)患者（10.6個月）。1作為預(yù)測免疫治療響應(yīng)的生物標(biāo)志物1.3非編碼RNA標(biāo)志物miR-34a、miR-155等miRNA表達(dá)水平與免疫治療響應(yīng)相關(guān)。例如，miR-34a低表達(dá)患者，PD-1抑制劑ORR僅為15%，而高表達(dá)患者ORR達(dá)45%。此外，circRNA_001567高表達(dá)與原發(fā)性耐藥顯著相關(guān)，其敏感性達(dá)83%，特異性為76%，是預(yù)測耐藥的潛在標(biāo)志物。2作為免疫治療的靶點：表觀遺傳藥物與免疫治療的聯(lián)合策略表觀遺傳藥物（如DNMT抑制劑、HDAC抑制劑、EZH2抑制劑等）可通過逆轉(zhuǎn)異常表觀遺傳修飾，重塑TIME，增強(qiáng)免疫治療的敏感性。目前，多種聯(lián)合策略已在CRC中顯示出良好前景。2作為免疫治療的靶點：表觀遺傳藥物與免疫治療的聯(lián)合策略2.1DNMT抑制劑與ICIs的聯(lián)合DNMT抑制劑（如阿扎胞苷、地西他濱）可逆轉(zhuǎn)DNA高甲基化，重新激活沉默的腫瘤抑制基因和免疫相關(guān)基因（如MHCⅠ類分子、抗原呈遞相關(guān)基因）。在臨床前研究中，阿扎胞苷聯(lián)合PD-1抑制劑可顯著抑制CRC生長，增加CD8+T細(xì)胞浸潤。臨床試驗NCT03608631顯示，阿扎胞苷聯(lián)合帕博利珠單治療MSS型CRC的ORR達(dá)25%，顯著高于單藥（0%），且安全性可控。2作為免疫治療的靶點：表觀遺傳藥物與免疫治療的聯(lián)合策略2.2HDAC抑制劑與ICIs的聯(lián)合HDAC抑制劑（如伏立諾他、帕比司他）可增加組蛋白乙酰化，促進(jìn)免疫相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄，并抑制Treg細(xì)胞功能。NCT02920413研究顯示，帕比司他聯(lián)合納武利尤單抗治療晚期CRC的疾病控制率（DCR）為58%，其中MSS型患者DCR達(dá)50%。我們的研究發(fā)現(xiàn)，HDAC抑制劑可通過上調(diào)腫瘤細(xì)胞中PD-L1的表達(dá)，增強(qiáng)ICIs的療效，這種“雙重調(diào)控”效應(yīng)為聯(lián)合治療提供了理論基礎(chǔ)。2作為免疫治療的靶點：表觀遺傳藥物與免疫治療的聯(lián)合策略2.3EZH2抑制劑與ICIs的聯(lián)合EZH2抑制劑（如GSK126、tazemetostat）可降低H3K27me3水平，重新激活沉默的趨化因子（如CXCL9、CXCL10），促進(jìn)T細(xì)胞浸潤。臨床前模型中，GSK126聯(lián)合PD-1抑制劑可完全抑制CRC生長，并產(chǎn)生長期免疫記憶。目前，NCT03460977研究正在評估tazemetostat聯(lián)合帕博利珠單抗治療EZH2突變型CRC的療效，初步結(jié)果顯示ORR為30%。2作為免疫治療的靶點：表觀遺傳藥物與免疫治療的聯(lián)合策略2.4多靶點表觀遺傳聯(lián)合策略單一表觀遺傳藥物可能無法完全逆轉(zhuǎn)復(fù)雜的表觀遺傳異常，多靶點聯(lián)合策略成為趨勢。例如，DNMT抑制劑聯(lián)合HDAC抑制劑可同時調(diào)控DNA甲基化和組蛋白乙?；?，產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)。我們的研究表明，三聯(lián)聯(lián)合（DNMT抑制劑+HDAC抑制劑+EZH2抑制劑）可顯著上調(diào)CRC細(xì)胞中MHCⅠ類分子、抗原呈遞相關(guān)基因和趨化因子的表達(dá)，增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞的殺傷活性，為“深度表觀