2026年生物技術(shù)專(zhuān)業(yè)知識(shí)與實(shí)踐技能試題集一、單選題（共10題，每題2分）1.下列哪種基因編輯技術(shù)最常用于植物抗病性的改良？A.CRISPR-Cas9B.T-DNA插入C.ZFND.Meganucleases2.在單克隆抗體制備過(guò)程中，雜交瘤細(xì)胞的篩選通常依賴哪種標(biāo)志物？A.HLA類(lèi)型B.CD19表達(dá)C.融合基因的酶活性D.細(xì)胞表面黏附分子3.以下哪種培養(yǎng)基最適合用于培養(yǎng)乳酸菌？A.LB培養(yǎng)基B.Luria-Bertani培養(yǎng)基C.MRS培養(yǎng)基D.YPD培養(yǎng)基4.中國(guó)新藥審批中，I期臨床試驗(yàn)的主要目的是？A.評(píng)估藥物的有效性B.確定藥物的劑量范圍C.檢測(cè)藥物的長(zhǎng)期安全性D.比較不同劑量的療效差異5.下列哪種生物標(biāo)志物最常用于預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)？A.PSAB.CA19-9C.AFPD.CEA6.在基因測(cè)序中，二代測(cè)序（NGS）技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于？A.高通量、低成本B.高精度、長(zhǎng)讀長(zhǎng)C.單次測(cè)序完成全基因組D.實(shí)時(shí)測(cè)序結(jié)果分析7.以下哪種方法常用于檢測(cè)轉(zhuǎn)基因作物的外源基因表達(dá)？A.熒光顯微鏡觀察B.PCR檢測(cè)C.WesternBlot分析D.ELISA檢測(cè)8.中國(guó)藥監(jiān)局（NMPA）對(duì)生物類(lèi)似藥的審批要求中，以下哪項(xiàng)是關(guān)鍵指標(biāo)？A.生物學(xué)等效性B.臨床療效一致性C.制造工藝相似性D.價(jià)格競(jìng)爭(zhēng)力9.在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，以下哪種因素最容易導(dǎo)致細(xì)胞污染？A.pH值波動(dòng)B.溫度控制不當(dāng)C.空氣中的微生物D.培養(yǎng)基成分比例10.以下哪種技術(shù)常用于檢測(cè)病原體的耐藥性？A.基因芯片分析B.基因測(cè)序C.藥敏試驗(yàn)D.流式細(xì)胞術(shù)二、多選題（共5題，每題3分）1.以下哪些是植物基因工程中的常用載體？A.花椰菜花葉病毒（CaMV）B.農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒C.病毒載體D.真菌載體2.單克隆抗體制備過(guò)程中，以下哪些步驟是必要的？A.B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合B.雜交瘤細(xì)胞的篩選C.體外細(xì)胞增殖培養(yǎng)D.體內(nèi)動(dòng)物免疫接種3.以下哪些培養(yǎng)基成分適合用于培養(yǎng)酵母菌？A.蛋白胨B.酵母提取物C.磷酸氫二鉀D.葡萄糖4.中國(guó)藥品審評(píng)中心（CDE）對(duì)新藥的臨床試驗(yàn)方案審核要點(diǎn)包括？A.研究設(shè)計(jì)的科學(xué)性B.受試者的保護(hù)措施C.數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析方法D.藥品的成本效益分析5.以下哪些技術(shù)可用于檢測(cè)生物樣品中的微小RNA（miRNA）？A.RT-qPCRB.NorthernBlotC.基因芯片D.數(shù)字PCR三、判斷題（共10題，每題1分）1.CRISPR-Cas9技術(shù)可以用于人類(lèi)胚胎基因編輯，且不受倫理限制。（×）2.單克隆抗體在生產(chǎn)過(guò)程中，雜交瘤細(xì)胞需要經(jīng)過(guò)多次篩選才能獲得穩(wěn)定表達(dá)。（√）3.中國(guó)藥監(jiān)局要求生物類(lèi)似藥在臨床試驗(yàn)中必須與原研藥進(jìn)行頭對(duì)頭比較。（√）4.乳酸菌在MRS培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí)，會(huì)產(chǎn)生大量乳酸，導(dǎo)致pH值顯著下降。（√）5.二代測(cè)序（NGS）技術(shù)可以一次性測(cè)序整個(gè)基因組，無(wú)需分步進(jìn)行。（√）6.轉(zhuǎn)基因作物的外源基因表達(dá)檢測(cè)只能通過(guò)PCR方法進(jìn)行。（×）7.中國(guó)藥品審評(píng)中心對(duì)新藥的臨床試驗(yàn)方案審核時(shí)，不考慮倫理問(wèn)題。（×）8.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，空氣中的微生物污染是最難控制的因素之一。（√）9.耐藥性檢測(cè)可以通過(guò)基因芯片快速完成。（×）10.酵母菌的培養(yǎng)最適合在厭氧條件下進(jìn)行。（×）四、簡(jiǎn)答題（共5題，每題5分）1.簡(jiǎn)述CRISPR-Cas9技術(shù)在植物育種中的應(yīng)用原理。答：CRISPR-Cas9技術(shù)通過(guò)導(dǎo)向RNA（gRNA）識(shí)別目標(biāo)基因位點(diǎn)，Cas9酶進(jìn)行DNA雙鏈斷裂，隨后植物細(xì)胞會(huì)啟動(dòng)修復(fù)機(jī)制（如NHEJ或HDR），從而實(shí)現(xiàn)基因敲除或定點(diǎn)編輯。該技術(shù)可快速改良作物抗病性、產(chǎn)量及品質(zhì)等性狀。2.簡(jiǎn)述單克隆抗體制備的步驟及其關(guān)鍵環(huán)節(jié)。答：步驟包括：①B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合；②篩選雜交瘤細(xì)胞（如使用HAT培養(yǎng)基）；③克隆化培養(yǎng)；④抗體純化；⑤效價(jià)檢測(cè)。關(guān)鍵環(huán)節(jié)包括融合效率和篩選體系的可靠性。3.簡(jiǎn)述MRS培養(yǎng)基的組成及其在乳酸菌培養(yǎng)中的作用。答：MRS培養(yǎng)基含酵母提取物、蛋白胨、葡萄糖、乳酸鈉、磷酸鹽緩沖液等，特別添加了羅金氏鹽。其pH緩沖能力及乳酸鹽為乳酸菌提供最佳生長(zhǎng)環(huán)境，適用于乳酸菌的高效培養(yǎng)。4.簡(jiǎn)述中國(guó)藥品審評(píng)中心對(duì)新藥臨床試驗(yàn)方案的審核要點(diǎn)。答：要點(diǎn)包括：①研究設(shè)計(jì)的科學(xué)性與可行性；②受試者保護(hù)措施；③統(tǒng)計(jì)分析方法的合理性；④數(shù)據(jù)質(zhì)量控制；⑤倫理審查的合規(guī)性。5.簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)基因作物外源基因表達(dá)檢測(cè)的常用方法及其原理。答：常用方法包括PCR（檢測(cè)DNA水平）、RT-qPCR（檢測(cè)mRNA水平）、WesternBlot（檢測(cè)蛋白水平）、ELISA（檢測(cè)蛋白表達(dá)量）。原理基于分子雜交或抗原抗體反應(yīng)，特異性高。五、論述題（共2題，每題10分）1.論述CRISPR-Cas9技術(shù)在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用前景及其面臨的倫理挑戰(zhàn)。答：應(yīng)用前景：①抗病育種：通過(guò)編輯病原菌侵染相關(guān)基因，提高作物抗性；②品質(zhì)改良：優(yōu)化營(yíng)養(yǎng)成分或風(fēng)味基因；③環(huán)境適應(yīng)性提升：增強(qiáng)作物耐旱、耐鹽能力。倫理挑戰(zhàn)：①脫靶效應(yīng)可能導(dǎo)致非預(yù)期基因突變；②跨物種編輯可能引發(fā)生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)；③基因編輯作物是否應(yīng)標(biāo)注，涉及消費(fèi)者知情權(quán)。2.論述單克隆抗體制備在生物醫(yī)藥研發(fā)中的重要性及其面臨的挑戰(zhàn)。答：重要性：①精準(zhǔn)診斷：用于疾病標(biāo)志物檢測(cè)；②靶向治療：如單抗藥物（如利妥昔單抗）；③科研工具：如免疫熒光、流式細(xì)胞術(shù)。挑戰(zhàn)：①抗體生產(chǎn)成本高、周期長(zhǎng)；②雜交瘤細(xì)胞易污染；③抗體親和力及特異性需優(yōu)化；④臨床應(yīng)用需解決免疫原性問(wèn)題。答案與解析一、單選題答案與解析1.A解析：CRISPR-Cas9技術(shù)因高效、精準(zhǔn)，廣泛應(yīng)用于植物基因編輯，尤其用于抗病基因的敲除或功能驗(yàn)證。2.C解析：?jiǎn)慰寺】贵w制備的核心是融合基因的表達(dá)，通過(guò)酶活性篩選可快速確定陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞。3.C解析：MRS培養(yǎng)基專(zhuān)為乳酸菌設(shè)計(jì)，其乳酸鹽和pH緩沖體系最適于乳酸菌生長(zhǎng)。4.B解析：I期臨床試驗(yàn)主要評(píng)估藥物的耐受性及劑量范圍，為后續(xù)試驗(yàn)提供依據(jù)。5.D解析：CEA是結(jié)直腸癌常用標(biāo)志物，其持續(xù)升高提示復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。6.A解析：NGS通過(guò)并行測(cè)序?qū)崿F(xiàn)高通量、低成本，是目前主流測(cè)序技術(shù)。7.B解析：PCR檢測(cè)外源基因DNA片段是最快速、靈敏的方法。8.B解析：生物類(lèi)似藥需與原研藥臨床療效一致，這是NMPA的核心審批標(biāo)準(zhǔn)。9.C解析：空氣中的微生物（如支原體）是細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)的污染源。10.C解析：藥敏試驗(yàn)通過(guò)體外培養(yǎng)測(cè)定病原體對(duì)藥物的敏感性，是最直接的耐藥性檢測(cè)方法。二、多選題答案與解析1.A,B,C解析：CaMV、Ti質(zhì)粒、病毒載體是植物基因工程常用載體，真菌載體較少使用。2.A,B,C,D解析：?jiǎn)慰怪苽湫枞诤?、篩選、培養(yǎng)及免疫接種等步驟，缺一不可。3.A,B,C,D解析：酵母培養(yǎng)基需含蛋白胨、酵母提取物、磷酸鹽及碳源（葡萄糖）。4.A,B,C解析：CDE審核關(guān)注科學(xué)性、倫理及統(tǒng)計(jì)分析，成本效益非關(guān)鍵指標(biāo)。5.A,B,C,D解析：RT-qPCR、NorthernBlot、基因芯片、數(shù)字PCR均可檢測(cè)miRNA。三、判斷題答案與解析1.（×）解析：人類(lèi)胚胎基因編輯存在倫理爭(zhēng)議，多數(shù)國(guó)家限制或禁止。2.（√）解析：雜交瘤細(xì)胞需多次篩選以排除陰性克隆，確保抗體特異性。3.（√）解析：NMPA要求生物類(lèi)似藥與原研藥頭對(duì)頭比較以證明一致性。4.（√）解析：MRS培養(yǎng)基的乳酸鹽被乳酸菌代謝，導(dǎo)致pH下降。5.（√）解析：NGS可一次性測(cè)序全基因組，但需分步進(jìn)行數(shù)據(jù)拼接。6.（×）解析：檢測(cè)外源基因表達(dá)可結(jié)合多種方法，如PCR、WesternBlot等。7.（×）解析：CDE審核需嚴(yán)格審查倫理方案，保障受試者權(quán)益。8.（√）解析：空氣中的微生物難以完全避免，是污染高風(fēng)險(xiǎn)環(huán)節(jié)。9.（×）解析：耐藥性檢測(cè)需通過(guò)藥敏試驗(yàn)，基因芯片僅用于基因分型。10.（×）解析：酵母菌培養(yǎng)需微氧環(huán)境，厭氧條件不利于其生長(zhǎng)。四、簡(jiǎn)答題答案與解析1.CRISPR-Cas9技術(shù)在植物育種中的應(yīng)用原理答：通過(guò)gRNA靶向切割目標(biāo)基因，植物細(xì)胞修復(fù)時(shí)可能發(fā)生基因突變（如敲除）或通過(guò)供體DNA修復(fù)（HDR）實(shí)現(xiàn)定點(diǎn)編輯，從而改良性狀。2.單克隆抗體制備的步驟及其關(guān)鍵環(huán)節(jié)答：步驟：①融合（B細(xì)胞+骨髓瘤細(xì)胞）；②篩選（HAT培養(yǎng)基）；③克??；④純化；⑤檢測(cè)。關(guān)鍵：融合效率、篩選體系、抗體純度。3.MRS培養(yǎng)基的組成及其作用答：含酵母提取物、蛋白胨、乳酸鈉、磷酸鹽等，乳酸鈉提供代謝底物，磷酸鹽緩沖pH，利于乳酸菌生長(zhǎng)。4.CDE對(duì)新藥臨床試驗(yàn)方案的審核要點(diǎn)答：科學(xué)性（設(shè)計(jì)合理）、倫理（受試者保護(hù)）、統(tǒng)計(jì)分析（方法適用）、數(shù)據(jù)質(zhì)量（控制嚴(yán)格）。5.轉(zhuǎn)基因作物外源基因表達(dá)檢測(cè)方法及原理答：方法：PCR（DNA）、RT-qPCR（mRNA）、WesternBlot（蛋白）、ELISA（蛋白）。原理：分子雜交