1、leadership intention and meaning into the text. Although his eyes now write only a relatively small number of materials, but also quite difficult, even to a molding material herself seems not very satisfied with the quality of service needs to be enhanced.Three is a lot of work to implement passive,

2、 active and advanced. Most contractors do matters assigned by the leadership, work is often in the orders, to implement the task, do not want to lead, not want to think ahead, plan ahead, and to seek the leadership; seek deep into the research, provide information good staff seek. Especially in the

3、writing process of material, it encountered much, time tight, heavy課題3 血紅蛋白的提取和分離學(xué)業(yè)水平層次(A)1下列各項(xiàng)中，一般不影響凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的分離度的是()A層析柱的高度B層析柱的直徑C緩沖溶液 D樣品的分布【解析】分離度取決于柱高，為分離不同組分，凝膠柱必須有適宜的高度；樣品的分布也影響分離度；緩沖溶液的pH影響蛋白質(zhì)所帶的電荷，因此也影響分離度。只有層析柱的直徑一般不會(huì)影響分離度?！敬鸢浮緽2利用凝膠色譜法時(shí)什么樣的蛋白質(zhì)先洗脫出來(lái)()A相對(duì)分子質(zhì)量大的 B溶解度高的C相對(duì)分子質(zhì)量小的 D所帶電荷多的【解析

4、】相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)能進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道運(yùn)行，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢；相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)，運(yùn)行路程較短，移動(dòng)速度較快，首先被洗脫出來(lái)?！敬鸢浮緼3選用豬、牛、羊成熟的紅細(xì)胞作分離蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)材料，下列是其優(yōu)點(diǎn)的是()A血紅蛋白是無(wú)色蛋白 B紅細(xì)胞有細(xì)胞核C紅細(xì)胞蛋白質(zhì)含量高 D紅細(xì)胞DNA含量高【解析】哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核，核物質(zhì)也消失，所以紅細(xì)胞內(nèi)幾乎沒有DNA。血紅蛋白是有色蛋白。【答案】C4在蛋白質(zhì)的提取和分離中，關(guān)于對(duì)樣品處理過(guò)程中，分析無(wú)誤的是()A洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽B洗滌時(shí)離心速度過(guò)小，時(shí)間過(guò)短，白細(xì)胞等會(huì)沉淀，達(dá)不到分離的效果C洗滌過(guò)程

5、選用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的生理鹽水D透析的目的是去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)【解析】本題主要考查了血紅蛋白提取和分離中的樣品處理。洗滌紅細(xì)胞的目的主要是除去血漿中的蛋白質(zhì)；洗滌時(shí)離心速度過(guò)高，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)使白細(xì)胞等一同沉淀，達(dá)不到分離的效果；洗滌過(guò)程用到的是質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液。【答案】D5下列關(guān)于電泳的說(shuō)法，不正確的是()A電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程B帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)C蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少D用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳，蛋白質(zhì)的電泳遷移率完全取決于分子的大小【解析】蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于

6、它所帶凈電荷的多少以及分子的大小等因素。SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)SDS復(fù)合物，SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過(guò)了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差異，使電泳遷移率完全取決于分子的大小。【答案】C能力提升層次(B)6蛋白質(zhì)的分離與純化是蛋白質(zhì)研究的重要技術(shù)。下列有關(guān)敘述不正確的是()A根據(jù)蛋白質(zhì)分子不能透過(guò)半透膜的特性，可將樣品中各種不同的蛋白質(zhì)分離B根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小等，可通過(guò)電泳法分離蛋白質(zhì)C根據(jù)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小，可通過(guò)凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)D根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同，可通過(guò)離心沉降法分離蛋白質(zhì)【解析】蛋白質(zhì)分子是生物大分子，都不能通過(guò)

7、半透膜，因此不能利用半透膜分離蛋白質(zhì)；蛋白質(zhì)分子所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小可以使蛋白質(zhì)分子在電場(chǎng)中獲得不同的遷移速度，因此可以利用電泳法分離蛋白質(zhì)；蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小不同，通過(guò)凝膠柱的時(shí)間不同，可通過(guò)凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)；蛋白質(zhì)的分子大小，密度不同，具有不同的離心力，可通過(guò)離心沉降法分離蛋白質(zhì)?！敬鸢浮緼7將經(jīng)處理破裂后的紅細(xì)胞混合液以2 000 r/min的速度離心10 min后，離心管中的溶液分為四層，從上到下的順序依次是()A血紅蛋白溶液、甲苯層、脂溶性物質(zhì)的沉淀層、暗紅色沉淀物層B甲苯層、暗紅色沉淀物層、血紅蛋白溶液、脂溶性物質(zhì)的沉淀層C脂溶性物質(zhì)的沉淀層、血紅蛋白溶液、甲苯層

8、、暗紅色沉淀物層D甲苯層、脂溶性物質(zhì)的沉淀層、血紅蛋白溶液、暗紅色沉淀層【解析】混合液經(jīng)離心后，在離心管中從上到下的順序：第1層為無(wú)色透明的甲苯層，第2層白色薄層固體是脂溶性物質(zhì)的沉淀層，第3層紅色透明液體是血紅蛋白溶液，第4層暗紅色沉淀物主要是紅細(xì)胞破碎物沉淀?！敬鸢浮緿8以下關(guān)于血紅蛋白提取和分離的過(guò)程及原理敘述正確的是()A紅細(xì)胞洗滌過(guò)程中要加入5倍體積的蒸餾水，重復(fù)洗滌3次B將血紅蛋白溶液放在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液中透析12小時(shí)C凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要均勻，不能有氣泡存在D蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較大的移動(dòng)速度慢【解析】紅細(xì)胞洗滌過(guò)程中要加入5倍體積的生理鹽水，重復(fù)洗滌3

9、次的目的是除去雜蛋白。透析時(shí)使用物質(zhì)的量濃度為20 mmol/L的磷酸緩沖液，而不是用0.9%的NaCl溶液。蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較大的在凝膠外部移動(dòng)，移動(dòng)速度快。在裝填凝膠柱時(shí)，不能有氣泡存在，氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。【答案】C9在血紅蛋白分離過(guò)程中，如果紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬，與其有關(guān)的是()A血紅蛋白釋放B色譜柱的裝填C洗脫過(guò)程 D樣品的處理【解析】如果凝膠色譜柱裝填得很成功、分離操作也正確的話，能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整，隨著洗脫液緩慢流出；如果紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬，說(shuō)明分離的效果不好，這與凝膠色譜柱的裝填有關(guān)?！敬鸢浮緽1

10、0(2015吉林高二檢測(cè))凝膠色譜技術(shù)由于設(shè)備簡(jiǎn)單，操作方便，不需要有機(jī)溶劑，對(duì)高分子物質(zhì)有很高的分離效果，目前已被廣泛應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域，請(qǐng)回答問題：(1)若選用SephadexG100，則“G”表示_。(2)通過(guò)凝膠色譜法可將從紅細(xì)胞中分離出的血紅蛋白樣品進(jìn)一步_。關(guān)于血紅蛋白提取和分離的相關(guān)操作，回答下列問題：實(shí)驗(yàn)時(shí)要對(duì)采集到的血液中的紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌，洗滌的目的是_。在_的作用下，紅細(xì)胞會(huì)破裂釋放出血紅蛋白。將釋放出的血紅蛋白收集到透析袋中透析，這是樣品的_，而透析的目的是_。實(shí)驗(yàn)最后經(jīng)過(guò)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行_。(3)若凝膠色譜操作最后觀察到的紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬，說(shuō)明與_有關(guān)。

11、【解析】本題考查血紅蛋白的提取和分離。(1)凝膠中“G”表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度和分離范圍，100表示每克凝膠膨脹時(shí)可吸水100 g。(2)血紅蛋白的提取和分離實(shí)驗(yàn)，原理是依據(jù)蛋白質(zhì)的各種特性分離蛋白質(zhì)。實(shí)驗(yàn)步驟分為樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定四步。(3)若最終紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬，分離效果差，說(shuō)明與色譜柱裝填有關(guān)?！敬鸢浮?1)凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度和分離范圍(2)純化去除雜蛋白蒸餾水和甲苯粗分離去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)純度鑒定(3)色譜柱裝填拓展探究層次(C)11已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子，分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如圖所示，下列有關(guān)蛋白質(zhì)分離的敘

12、述正確的是()A若將樣品以2 000 r/min的速度離心10 min，分子戊在沉淀中，則丙也一定在沉淀中B若用凝膠色譜法分離樣品中的蛋白質(zhì)，則分子甲移動(dòng)速度最快C將樣品裝入透析袋中透析12 h，若分子丙保留在袋內(nèi)，則乙也一定保留在袋內(nèi)D若用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質(zhì)分子，則分子甲和分子丁形成的電泳帶相距最遠(yuǎn)【解析】分子丙的相對(duì)分子質(zhì)量大于戊，所以，在離心時(shí)戊存在于沉淀中，丙也一定在沉淀中，A項(xiàng)正確。用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)，甲相對(duì)分子質(zhì)量最小，容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部，則移動(dòng)速度最慢，B項(xiàng)錯(cuò)誤。分子丙的相對(duì)分子質(zhì)量大于乙，則丙保留在袋內(nèi)，乙可能在袋外也可能在袋內(nèi)，C項(xiàng)錯(cuò)誤。SDS聚丙

13、烯酰胺凝膠電泳的遷移速度完全取決于分子的大小，因此，分子甲與丙形成的電泳帶相距最遠(yuǎn)，D項(xiàng)錯(cuò)誤。【答案】A12樣品的加入和洗脫的操作不正確的是()A加樣前，打開色譜柱下端的流出口，使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到凝膠面的下面B加樣后，打開下端出口，使樣品滲入凝膠床內(nèi)C等樣品完全進(jìn)入凝膠層后，關(guān)閉下端出口D用吸管小心地將1 mL透析后的樣品加到色譜柱的頂端，不要破壞凝膠面【解析】加樣前，打開色譜柱下端的流出口，使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到與凝膠面平齊。【答案】A13(2015杭州模擬)下圖表示對(duì)某蛋白質(zhì)溶液進(jìn)行SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳的結(jié)果(類似于紙層析法分離色素)，下列相關(guān)敘述不正確的是()

14、A蛋白質(zhì)上某些基團(tuán)解離后可使蛋白質(zhì)帶電，電場(chǎng)中帶電的蛋白質(zhì)分子(或多肽)會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)B蛋白質(zhì)在SDS聚丙烯酰胺凝膠中的遷移速度完全取決于其所帶凈電荷多少C蛋白質(zhì)在SDS聚丙烯酰胺凝膠中的遷移速度基本取決于其相對(duì)分子質(zhì)量的大小D電泳結(jié)果表明溶液中蛋白質(zhì)可能有兩種，但也可能只有一種【解析】蛋白質(zhì)的氨基與羧基可發(fā)生解離，使其帶正電或負(fù)電，在電場(chǎng)中發(fā)生遷移。SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳所加的SDS可掩蓋蛋白質(zhì)本身所帶電荷，故電泳遷移速度與本身所帶電荷無(wú)關(guān)，而由其分子大小決定。SDS會(huì)使蛋白質(zhì)解聚成單條肽鏈，故結(jié)果所示可能只有一種蛋白質(zhì)(有兩種肽鏈)，也可能是兩種蛋白質(zhì)?！敬鸢浮緽14動(dòng)

15、物血液常常被選作提取DNA和提取血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)材料，請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：(1)提取DNA和提取血紅蛋白，豬血都是適宜材料嗎？為什么？_。(2)無(wú)論是提取DNA還是提取血紅蛋白，都需要先用_對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌，其目的是_。(3)電泳是分離鑒定蛋白質(zhì)的常規(guī)方法。下圖為幾種蛋白質(zhì)通過(guò)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳的圖譜，據(jù)圖，你認(rèn)為相對(duì)分子質(zhì)量最大的蛋白質(zhì)是_，依此推理該樣品在凝膠色譜法中最后流出的蛋白質(zhì)應(yīng)該是_。【解析】(1)豬血是提取血紅蛋白的適宜材料，不是提取DNA的適宜材料，因?yàn)槠涑墒旒t細(xì)胞沒有細(xì)胞核，提取DNA應(yīng)該用雞血。(2)提取DNA和血紅蛋白，需要先用生理鹽水對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌，其目的是去除雜

16、蛋白。(3)圖為SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳的圖譜，球蛋白離點(diǎn)樣處最近，說(shuō)明質(zhì)量最大，清蛋白離點(diǎn)樣處最遠(yuǎn)，相對(duì)分子質(zhì)量最小；在凝膠色譜法中相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部的通道，路程長(zhǎng)，移動(dòng)速度慢；而相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)無(wú)法進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部，路程較短，移動(dòng)速度快，最后流出的蛋白質(zhì)應(yīng)該是相對(duì)分子質(zhì)量最小的清蛋白。【答案】(1)豬血是提取血紅蛋白的適宜材料，不是提取DNA的適宜材料，因?yàn)槠涑墒旒t細(xì)胞沒有細(xì)胞核(2)生理鹽水去除雜蛋白(3)球蛋白清蛋白15紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的功能主要是由血紅蛋白完成的，血紅蛋白的主要功能是攜帶O2或CO2，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血

17、液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來(lái)提取和分離血紅蛋白。根據(jù)材料回答下列問題。(1)實(shí)驗(yàn)前取新鮮血液，要在采血器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來(lái)，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是_。(2)在對(duì)樣品進(jìn)行處理及粗分離時(shí)，主要包括_、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液、透析等步驟。其中透析技術(shù)的原理是_ _。(3)同學(xué)甲利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，在電泳過(guò)程中，影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素包括蛋白質(zhì)分子的_、_以及分子的形狀等。(4)同學(xué)乙利用凝膠色譜法進(jìn)行血紅蛋白分離(如圖一)，他在操作中加樣的正確順序是_，在執(zhí)行圖一中所示操作時(shí)，色譜柱下端連接的尼龍管應(yīng)該_(填“打開”或“關(guān)閉”)。(5)

18、圖二、圖三分別是同學(xué)甲、乙利用同一種樣品分離得到的結(jié)果，則圖三中與圖二中蛋白質(zhì)P對(duì)應(yīng)的是_?！窘馕觥?1)加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固。(2)對(duì)樣品的處理及粗分離包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液、透析等步驟。其中透析的原理是小分子可以自由進(jìn)出透析袋(半透膜)，而大分子不能通過(guò)。(3)電泳時(shí)，影響蛋白質(zhì)遷移率的因素有蛋白質(zhì)分子大小、帶電性質(zhì)及分子的形狀等。(4)正確的加樣順序可依據(jù)樣品在色譜柱及凝膠層中的滲入量進(jìn)行分析，可以得出的是；同時(shí)進(jìn)行所示環(huán)繞加樣時(shí)，應(yīng)關(guān)閉下出口。(5)SDS凝膠電泳裝置是垂直的裝置，此種電泳方法主要取決于蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小，與電荷無(wú)關(guān)，同時(shí)加樣在“”極，通電后，樣品蛋白質(zhì)向“”極移動(dòng)，相對(duì)分子質(zhì)量相對(duì)小的，移動(dòng)距離大，因此從圖二的電泳結(jié)果分析，P比N、M移向“”距離大，說(shuō)明P的相對(duì)分子質(zhì)量相對(duì)比較小，因此洗脫出來(lái)的時(shí)間比較長(zhǎng)，符合圖三中的丙。【答案】(1)防止血液凝固(2)紅細(xì)胞的洗滌小分子可以自由進(jìn)