1、糖尿病動物模型的制作：李明緊、王婷、侯娟、盧志蒙、夏小卷、王明霞、高燕、周東、王炳斯、魏主旨：高燕、背景介紹：糖尿病是由遺傳因素、免疫功能障礙、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等致病因素作用于機體，導(dǎo)致胰島功能障礙、胰島素抵抗等一系列代謝紊亂。糖、蛋白質(zhì)、脂肪、水和電解質(zhì)等代謝紊亂的典型病例可表現(xiàn)出多尿、多飲、多食和消瘦等癥狀，即“三多三少”。一旦糖尿病(血糖)得不到很好的控制，就會引起并發(fā)癥，導(dǎo)致腎、眼、足等部位的衰竭性病變，無法治愈。糖尿病相關(guān)因素、遺傳因素：與1型糖尿病相似，2型糖尿病也具有家族發(fā)病的特點。因此，它可能與遺傳有關(guān)。這種遺傳特征在2型糖尿病中比在1型糖尿病中更明顯。

2、例如，雙胞胎中的一個患有1型糖尿病，另一個有40%的幾率患上這種疾病。但是如果是2型糖尿病，另一個有70%的幾率發(fā)展成2型糖尿病。遺傳因素：這種遺傳特征在2型糖尿病中比在1型糖尿病中更明顯。例如，雙胞胎中的一個患有一型糖尿病，另一個有40%的幾率患有這種疾病。然而，如果是二型糖尿病，還有70%的幾率發(fā)展成二型糖尿病。糖尿病相關(guān)因素、糖尿病相關(guān)因素、遺傳因素：2型糖尿病的這種遺傳特征比1型糖尿病更明顯。例如，其中一個雙胞胎患有一型糖尿病，另一個有40%的幾率患上這種疾病。然而，如果是二型糖尿病，還有70%的幾率發(fā)展成二型糖尿病。肥胖：肥胖可能是糖尿病的一個重要因素。遺傳原因會導(dǎo)致肥胖和糖尿病。以

3、身體為中心的肥胖患者體內(nèi)多余的脂肪集中在腹部，與脂肪集中在臀部和大腿的患者相比，他們更容易患糖尿病。肥胖：肥胖可能是2型糖尿病的一個重要因素。遺傳原因會導(dǎo)致肥胖和2型糖尿病。以身體為中心的肥胖患者體內(nèi)多余的脂肪集中在腹部，與脂肪集中在臀部和大腿的患者相比，他們更容易患2型糖尿病。年齡：年齡也是糖尿病的一個危險因素。一半的糖尿病患者大多在55歲以后患病。老年患者傾向于生活方式：吃高熱量食物和減少鍛煉也會導(dǎo)致糖尿病，這也與老年人超重的趨勢有關(guān)。有些人認(rèn)為現(xiàn)代糖尿病也是由肥胖引起的。像糖尿病一樣，肥胖在飲食和活動“西化”的亞裔美國人和拉美商人中更為常見。誘導(dǎo)原理，STZ直接損傷胰島細(xì)胞：主要是在注射

4、大劑量STZ后。STZ注射液可導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)輔酶(NAD)濃度降低，NAD依賴性能量和蛋白質(zhì)代謝停止，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。四氧嘧啶進(jìn)入體內(nèi)后能被胰島細(xì)胞迅速吸收，影響細(xì)胞膜的通透性和細(xì)胞內(nèi)三磷酸腺苷的生成，抑制葡萄糖介導(dǎo)的胰島素分泌。四氧嘧啶主要通過產(chǎn)生氧自由基破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細(xì)胞損傷和壞死，從而阻礙胰島素分泌和降低血清胰島素水平。藥物的制備，STZ溶液的制備：檸檬酸緩沖液的制備：將2.1克檸檬酸(FW :210.14)加入到100毫升雙蒸水中制成2.94克檸檬酸鈉(FW :294.10)為液體A，再加入到100毫升雙蒸水中制成液體B鏈脲佐菌素制備液：使用時，將液體A和液體B按一定比例(11.32或1

5、33366)混合調(diào)節(jié)酸堿度至4.2-4.5，這是制備STZ所需的檸檬酸緩沖溶液。注射時，STZ用濃度為1的檸檬酸緩沖液溶解，根據(jù)空腹體重注射相應(yīng)的STZ，注射在30分鐘內(nèi)完成。 STZ很容易失效。快速稱重后，仍需保持干燥和黑暗。建議使用干燥的鋁箔(或錫箔)紙。制備方法：將STZ(鏈脲佐菌素)和ALX(四氧嘧啶)組合，實驗動物：只大鼠/體重：200-280克，雄性注射法：只大鼠腹腔注射法：只，具體方法：只大鼠進(jìn)食12小時，稱重后空腹過夜，按大鼠總重量比稱取STZ，放入干滅菌瓶，外貼膜包裝，將檸檬酸緩沖液和裝有STZ的瓶子放入冰浴中，一起帶至動物室如果注射操作不熟練，兩組應(yīng)交替注射，STZ應(yīng)每組1

6、0或15只大鼠溶解。實驗組腹腔注射12毫克/毫升STZ檸檬酸鈉和20毫克/毫升ALX蒸餾水，每組0.5毫升。禁食1小時后，給大鼠喂食標(biāo)準(zhǔn)飼料塊并自由飲水。對照組：注射等量檸檬酸鈉蒸餾水。給藥后1周3天采集血樣進(jìn)行血糖測量。模型保存了12周。禁食與血糖的關(guān)系：禁食超過12小時(通常是整夜禁食，缺水)。禁食時間越長，STZ對胰島細(xì)胞的破壞力越明顯，即藥效越高。因此，可以通過延長相對禁食時間來減少STZ量。注射時，推速與血糖的關(guān)系：推速快，更易形成高血糖，推速慢，相對風(fēng)險低，但不易成型，常規(guī)操作通常需要快速注射。當(dāng)然，STZ的劑量是決定血糖水平的主要因素。死亡小鼠問題的解決由個體差異和小鼠禁食(低血

7、糖)抗性造成的死亡率差異可能是由于血糖突然升高、小鼠適應(yīng)不良或DKA癥(酮癥酸中毒)。首先，我們必須保證足夠的飲用水(飲用水不足很容易導(dǎo)致老鼠死亡)；第二，高血糖和低血糖都會導(dǎo)致老鼠死亡。有兩種方法可以避免死老鼠：1。高血糖癥很常見。胰島素補充法，一些中等效果的胰島素。例如，當(dāng)諾和靈N或NPH(中性精蛋白鋅胰島素)一次給藥2-3個單位時，在3-5天后，大鼠的總體死亡率較低。2.補糖法。禁食后的大鼠在注射時已經(jīng)處于低血糖狀態(tài)。模型建立后4小時腹腔注射20%葡萄糖，可防止大鼠在注射時因低血糖而死亡。同樣，防止動物互相殘殺。在食物和水短缺的情況下，他們會互相殘殺，吃同樣的食物。因此，食物和飲用水應(yīng)該有足夠的供應(yīng)量，最好是兩種方式。最后，防止感染。糖尿病大鼠容易感染，尤其是尿路感染和腹腔感染，因為它們有大量的尿液和潮濕的墊料，需要經(jīng)常更換墊料。腹膜內(nèi)注射、皮下注射、采血測定血糖等侵入性操作前后，應(yīng)注意消毒。例如，四環(huán)素(或金霉素眼膏)可用于局部治療傷口，以防止每次采血和血糖測量后的感染。預(yù)期結(jié)果經(jīng)檢測，實驗組非空腹血糖為16.7毫摩爾/升，表現(xiàn)為多飲、多食、多尿、消瘦、胰島素抵抗等“三多一少”癥狀