1、 批準執(zhí)行簽名批準執(zhí)行簽名 下面的簽名表示批準本文件及其附件，且表明已經(jīng)為執(zhí)行作好了準備。在批準后，對本文件的目的或驗收標準進行的 任何改變或修正都必須起改善的作用，在執(zhí)行以前就必須取得批準。 XXXX 有限公司 日期 Validation committeeDate 驗證委員會 Date Date 1 范圍范圍 本運行確認方案將會在 XXXX 有限公司的空調(diào)凈化系統(tǒng)上實施。 本文件描述了設(shè)備、檢驗程序及可接受標準、文件和參考文件，這些可以用來確定空調(diào)凈化系統(tǒng)的操作符合制 造商和 XXXX 有限公司的設(shè)計規(guī)范。 本運行確認文件提供了有關(guān) XXXX 有限公司責任的描述、有效的批準簽名、支持文件和

2、其他包含于文件包中的因 素。完成后所有的支持數(shù)據(jù)和文件將附于本驗證文件之后。 2 2 目的目的 進行性能確認的目的是確認空調(diào)凈化系統(tǒng)能夠連續(xù)、穩(wěn)定地使?jié)崈魠^(qū)的潔凈度符合設(shè)計標準及生產(chǎn)工藝的要求， 也就是對空氣交通化系統(tǒng)是否能達到規(guī)定的潔凈度做出判斷，因此，平時所做的不包括安裝確認及運行確認的驗證實 際上就是“性能確認”，在空氣凈化系統(tǒng)驗證中，性能確認也就是“潔凈度測定”，包括：懸浮粒子和微生物兩個方 面。 3 3 背景背景 本空調(diào)凈化系統(tǒng)是 XXXX 有限公司為 XXXX 車間改造的采辦的一套新系統(tǒng)。 21CFR Part 211.44 規(guī)定了通風、空氣過濾、空氣加熱與冷卻系統(tǒng)“提供足夠的通風

3、。提供足夠能控制空氣正壓、 微生物、塵土、溫度和濕度的設(shè)備，適應藥品生產(chǎn)、加工和貯存需要?？諝膺^濾系統(tǒng)，包括預過濾器和微粒物質(zhì)空氣 過濾器?？諝饨?jīng)過濾才送至生產(chǎn)區(qū)，如果空氣是再循環(huán)到生產(chǎn)區(qū)，應測量塵埃含量，控制從生產(chǎn)區(qū)帶來的塵埃。在生 產(chǎn)區(qū)、生產(chǎn)中發(fā)生空氣污染，應以排氣系統(tǒng)或其他系統(tǒng)充分抽出空氣，控制污染。” FDA 關(guān)于藥品生產(chǎn)的指南文件也規(guī)定: “對與環(huán)境有關(guān)的工廠建筑物、面積和位置進行審查。所有的操作包括 灰塵、溫度、濕度和細菌控制，都必須有充分的照明、通風、屏蔽和合適的物理屏障。必須有高純水、HEPA 和壓縮 空氣系統(tǒng)的合理設(shè)計圖。廠房須有足夠的更衣室、衛(wèi)生間和洗手設(shè)施?！?美國國家環(huán)

4、境平衡局：清潔驗證及可接受標準要求檢測“（1）風速及均勻性試驗；（2）高效過濾器安裝泄漏試 驗；（3）房間微粒計數(shù)試驗；（4）增壓試驗；（5）溫濕度均一性試驗；（6）聲音和震動試驗；（7）光照度和均 一性試驗；（8）自凈試驗；（9）傳導率試驗；（10）微粒輻射計數(shù)試驗；（11）靜電試驗” 4 4 介紹介紹 本運行確認方案文件特定用于 XXXX 有限公司的空調(diào)凈化系統(tǒng)。 作為本文件執(zhí)行過程中的測量設(shè)備，所有的儀表校驗、標準化和調(diào)整將會進行且記錄下來。使用的標準源自 ISO 14644-3。國家標準不涵蓋的地方，如果合適也可以使用其它的公認的標準。 運行確認的過程，以確認和證明系統(tǒng)的運行符合 cG

5、MP 的要求、ISO14644、XXXX 有限公司的工藝要求、XXXX 設(shè) 計院的設(shè)計要求運行的。運行確認將會檢驗空調(diào)凈化系統(tǒng)的相應運行過程。 任何與文件或規(guī)范的偏差或遇到任何例外的情況都要記錄下來，加以鑒別，以供文件偏差報告表的 審查。記錄的偏差和例外情況要進行調(diào)查，而且決定并采取相應的措施。文件偏差報告表中需記錄有調(diào)查、 糾正性措施及其理由。 最終文件包的批準必須由最初批準文件的人員、設(shè)計者或相同職位的另外人員來完成。 5 5 參考書目參考書目 本文件符合下面出版物的使用方針。除非另外注明，每一出版物為文件批準時的最新版本，附錄有效。 21CFR cGMP FDA. Guide to In

6、spections of Dosage Form Drug Manufacturers cGMPs. FDA藥品生產(chǎn)企業(yè)cGMP檢查指南。 USP 28 -美國藥典 中華人民共和國國家藥典 潔凈室施工與驗收規(guī)范 XXXX 項目空調(diào)凈化系統(tǒng)的技術(shù)規(guī)范和附件 6. 責任方及其責任責任方及其責任 61 蘇州恒威環(huán)境控制科技工程有限公司 在文件準備時提供支持和專業(yè)技術(shù)知識。 提供產(chǎn)生和執(zhí)行；文件需要的所有文件、數(shù)據(jù)、程序、手冊和圖表。 驗證過程的具體實施。 62 XXXX 有限公司 撰寫本文件。 確認執(zhí)行。 提供產(chǎn)生和執(zhí)行文件需要的所有程序、圖表、數(shù)據(jù)、手冊和文件，完成最終報告。 提供本文件執(zhí)行的檢驗

7、和化驗支持。 在文件準備和執(zhí)行時提供支持和專業(yè)技術(shù)知識。 審查和批準原始文件。 審查和批準完成的文件包和最終報告。 63 驗證組成員 （1）驗證協(xié)調(diào)人：XXX （2）組長：XXX （3）恒威工程師：XXX （4） 其他組員：XXX 64. 職責職責 6.41 驗證協(xié)調(diào)人：參見驗證管理SOP 6.42 組長：負責起草驗證方案和報告，按驗證計劃組織實施驗證工作。 6.43 恒威工程師： 在文件準備時提供支持和專業(yè)技術(shù)知識。 提供產(chǎn)生和執(zhí)行；文件需要的所有文件、數(shù)據(jù)、程序、手冊和圖表。 驗證過程的具體實施。 6.44 其他組員：協(xié)助驗證的實施。 7 7 系統(tǒng)說明系統(tǒng)說明 本空調(diào)系統(tǒng)為組合式上出風，尺

8、寸大小為 XXXmmXXXmmXXXmm(長寬高)，電源為三相 380V、50Hz，電機功率為 XX kW。本系統(tǒng)設(shè)計的總風量為 XXXXm3/h，新風量為 XXXXm3/h，空調(diào)風機機外余壓為 XXXXPa。制冷量為 XXXXkcal/h；制熱量為 XXXXkcal/h。整個空調(diào)系統(tǒng)框架為鋁合金，蓋板為雙層鋼板，保溫材料 為聚氨酯發(fā)泡，濾網(wǎng)為袋式初效過濾器及袋式中效過濾器。用橡皮防震墊防震，水盤為 SUS304 不銹鋼板，接管方向 （以面對回見側(cè)來決定）為（右/左）接，數(shù)量 X 臺。 8 8 檢驗程序檢驗程序 8.1 概述 8.1.1 性能確認周期 空調(diào)凈化系統(tǒng)連續(xù)運行的 3 個星期，分為

9、3 個周期，每個周期 7 天。 懸浮粒子數(shù)、浮游菌數(shù)、沉降菌數(shù)、靜壓差在連續(xù)運行的 3 個周期中，應符合設(shè)計要求及相應級別潔凈區(qū)標準規(guī) 定的要求。 溫濕度的性能確認結(jié)果應以全年為一個周期。只有經(jīng)歷了季節(jié)變化，才能全面評價空調(diào)凈化系統(tǒng)對潔凈區(qū)內(nèi)溫度 與相對濕度的控制能力。 8.1.2 檢測項目及檢測頻率 .懸浮粒子數(shù) 每天生產(chǎn)操作前監(jiān)測一次 .浮游菌數(shù) 每天生產(chǎn)操作前監(jiān)測一次 .沉降菌數(shù) 每天生產(chǎn)操作前監(jiān)測一次 .溫度、相對濕度 每日監(jiān)測，每天上下午各讀數(shù)記錄 1 次 .靜壓差 每日監(jiān)測，每天上下午各讀數(shù)記錄 1 次 82 潔凈室和潔凈室裝置的懸浮粒子等級計數(shù)與測量 821 目的 懸浮粒子等級計

10、數(shù)是對粒徑分布在 0.1m 至 5.0m 之間的懸浮粒子 子測量方法的詳細規(guī)定,為了驗證或定期測量 設(shè)施的潔凈度等級。 822 儀器 塵埃粒子計數(shù)器，能夠計數(shù)并確定單一懸浮粒子的粒徑，并報告以等效光學直徑表示的粒徑數(shù)據(jù)。使用儀 器時應嚴格按照儀器說明書操作。 光散射離散粒子計數(shù)器測量技術(shù)要求 項目技術(shù)要求 敏感度/分辨率1在 0.1-5mm 間選擇，粒徑分辨率10% 誤差粒徑設(shè)定值的濃度誤差的20% 電子反應時間50s 校準間隔最多 12 個月或規(guī)定的性能鑒定 1 粒徑分辨率大于 10%的粒子計數(shù)結(jié)果，可以有達 1 個數(shù)量級的變化。 823 測量原理 光散射離散粒子計數(shù)器是一種光散射裝置，能夠

11、顯示或記錄空氣中離散粒子的數(shù)目和粒徑，并具粒徑鑒別能力， 可檢測所選級別之適當粒徑范圍內(nèi)的粒子總濃度。 824測量程序 （1） 儀器校準 儀器應有有效的校準證書。 （2）預測試測試條件 （1） 測試前，驗證潔凈室或潔凈區(qū)運行整體在各個方面都是完整的、工作正常的，符合其技術(shù)性能要求。主要的工 作有： 氣流量或風速測試； 空氣壓差測試； 隔離結(jié)構(gòu)泄漏測試； 安裝好的過濾器泄漏測試。 （2）預測試儀器架設(shè) 按照說明書架設(shè)儀器并對儀器進行預測試校準。 （3）確定點位置的確定 采樣點數(shù)目及其布置 懸浮粒子潔凈度監(jiān)測的采樣點數(shù)目及其布置要根據(jù)產(chǎn)品的生產(chǎn)及工藝關(guān)鍵操作區(qū)設(shè)置。 按公式求出最少的采樣點數(shù)目：

12、NL=A 其中： NL為最少采樣點數(shù)（四舍五入為整數(shù)）； A 為潔凈室或潔凈區(qū)的面積，以 m2計。 采樣點布置規(guī)則如下： 最少采樣點數(shù)目 潔凈度級別 面積(M2) 100 級10,000 級100,000 級300,000 級 9 t6.312.922.352.132.021.941.901.86 Xi1+Xi2+Xin n Xi1+Xi2+Xim m （A1-M）2 +（A2-M）2+ +（AL-M）2 L（L-1） 在采樣點只有 1 個或多于 9 個時,不用計算 95%置信上限。 8.2.8 結(jié)果評定 826可接受標準 每個采樣點測得的粒子濃度平均值及計算的 95%置信上限未超過下列所列的

13、粒子數(shù)目。 判斷懸浮粒子潔凈度級別應依據(jù)下述二個條件： （1） 每個采樣點的平均粒子濃度必須低于或等于規(guī)定的級別界限，即 Ai級別界限。 （2）全部采樣點的粒子濃度平均值均值的 95%置信上限必須低于或等于規(guī)定的級別界限，即 UCL級別界限。 潔凈室懸浮粒子潔凈度等級 ISO 等級 大于或等于表中所示粒徑的粒子最大濃度限值（個/m3空氣） 0.1m0.2m0.3m0.5m1m5m ISO5 級（百級）2370010200352083229 ISO7 級（萬級）832002930 ISO8 級（十萬級）29300 83 微生物測定 83 .1 微生物測定的目的 微生物測定的目的是確定浮游的生物微

14、粒濃度和生物微粒沉降密度，以此來判斷潔凈室是否達到規(guī)定的潔凈度。 83 .2 微生物測定的方法 微生物測定有浮游菌和沉降菌兩種測定方法。 浮游菌用計數(shù)濃度表示：CFU/L 或 CFU/m3；沉降菌用沉降濃度表示：CFU/（皿min） 兩種方法可以并存，也可任選一種。浮游菌與沉降菌的關(guān)系存在著以下的近似公式： Ng=Ns FT 其中：Ng 為在 F 面積上的細菌沉降數(shù)，CFU； N 為空氣中的浮游菌濃度，CFU/m3； s 為含菌粒子沉降速度，cm/s； F 為沉降面積，cm2； T 為沉降時間，s。 83 .2.1 浮游菌的測定方法 （1）方法提要 本方法采用計數(shù)濃度法，即通過收集懸游在空氣中

15、的生物性粒子于專門的培養(yǎng)基，經(jīng)若干時間，在適宜的生長 條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微生物數(shù)，以此來評定潔凈室（區(qū)） 的潔凈度。 （2）所用的儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基 a）浮游菌采樣器； b）真空抽氣泵； c）培養(yǎng)皿； d）培養(yǎng)基； e）恒溫培養(yǎng)箱。 （3）測試條件 浮游菌測試前，被測試潔凈室（或潔凈區(qū)）溫、濕度須達到規(guī)定的要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須 控制在規(guī)定值內(nèi)。 浮游菌測試前，被測試潔凈室（或潔凈區(qū)）已經(jīng)過消毒。 測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種，測試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報告中注明測試狀態(tài)。 （4）測試人員 測試人員必須穿戴符合環(huán)境級別

16、的工作服。 靜態(tài)測試時，室內(nèi)測試人員不得多于 2 人。 （5）測試時間 對單向流，如 100 級凈化房間及層流工作臺，測試應在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于 10 min 后開始。 對非單向流，如 10 000 級，100 000 級以上的凈化房間，測試應在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于 30 min 后 開始。 （6）采樣規(guī)則 采樣點數(shù)量及其布置 最少采樣點數(shù)目：浮游菌測試的最少采樣點數(shù)目分為日常監(jiān)測及環(huán)境驗證兩種情況，見表。 表 最少采樣點數(shù)目 潔 凈 度 級 別 10010 000100 000 面 積（m2） 驗證監(jiān)測驗證監(jiān)測驗證監(jiān)測 10 23 1212 102042212 20408321

17、2 40100164412 10020040 10 3 20040080 20 6 400160 40 13 注：1）表 1 中的面積，對于 100 級的單向流潔凈室（包括層流工作臺），指的是送風口表面積， 對于 10 000 級，100 000 級的非單向流潔凈室，指的是房間面積。 2）日常監(jiān)測的采樣點數(shù)目由生產(chǎn)工藝的關(guān)鍵操作點來確定。 a）對每個 100 級潔凈操作區(qū)域（如層流罩、層流工作臺），可在離藥物敞開口處 30cm 處設(shè)測點，每班一次。 b）對每個 10 000 級潔凈工作區(qū)域（如藥物開口工作區(qū)）可在工作面處設(shè)測點，每班一次。 采樣點的位置 采樣點位置可以同懸浮粒子測試點。 a）工

18、作區(qū)測點位置離地 0.81.5m 左右（略高于工作面）。 b）送風口測點位置離開送風面 30cm 左右。 c）可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加測點。 最小采樣量 采樣量根據(jù)日常檢測及環(huán)境驗證定，每次最小采樣量見表。 表 最小采樣量 采樣量，L/次潔凈度級別 日常監(jiān)測環(huán)境驗證 100 級 6001 000 10 000 級 400500 100 000 級 0100 采樣次數(shù) 每個采樣點一般每日采樣一次。 采樣注意事項 a）對于單向流或送風口，采樣器采樣管口朝向應正對氣流方向；對于非單向流，采樣管口向上。 b）布置采樣點時，至少應離開塵粒較集中的回風口 1m 以上。 c） 采樣時，測試人員應

19、站在采樣口的下風側(cè)。 （7）測試步驟 測試前儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴格消毒。 a）采樣器進入被測房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌，用于 100 級潔凈室的采樣器宜一直放在被測房間內(nèi)。 b）用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。 c） 采樣前，先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的 內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。 d）采樣口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對采樣管的外壁及內(nèi)壁進行消毒時，應將管中的殘留液 倒掉并晾干。 e）采樣者應穿戴與被測潔凈區(qū)域相應的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。 浮游菌采樣器的采樣程序 a）儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開動真空泵

20、抽氣，使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)，時間不少于 5min，并調(diào)好 流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。 b）關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。 c）置采樣口于采樣點后，依次開啟采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動定時器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時間。 培養(yǎng) a）全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 b）在 3035培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于 48h。 c）每批培養(yǎng)基應有對照試驗，檢驗培養(yǎng)基本身是否污染?？擅颗x定 3 只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。 菌落計數(shù) a）用肉眼直接計數(shù)、標記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用 510 倍放大鏡檢查，有否遺漏。 b） 若平板上有 2 個或 2 個以上的菌落重疊，可分辨時仍以 2 個或

21、2 個以上的菌落計數(shù)。 注意事項 a）使用前仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不能使用。 b） 采取一切措施防止采樣管的污染和其他人為對樣本的污染。 c） 對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細的記錄。 d）由于細菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生 長的菌落，并須注意細菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時用顯微鏡鑒別。 e）微生物培養(yǎng)采用：大豆酪蛋白消化瓊脂培養(yǎng)基 （8）記錄 測試報告中應記錄房間溫度、相對濕度、壓差及測試狀態(tài)。附件 3：浮游菌檢測記錄 （9）結(jié)果計算 a）用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。 b） 每個測

22、點的浮游菌平均濃度的計算，見式（1）。 菌落數(shù) 平均濃度（個/m3）= 采樣量 （1 ） （10）結(jié)果評定 用浮游菌平均濃度判斷潔凈室（區(qū)）空氣中的微生物。 a）每個測點的浮游菌平均濃度必須低于所選定的評定標準中關(guān)于細菌濃度的界限。 b）若某測點的浮游菌平均濃度超過評定標準，則必須對此區(qū)域先行消毒，然后重新采樣兩次，兩次測試結(jié)果必 須合格。 （11）浮游菌的測定可接受標準 空氣潔凈度評價標準 總浮游菌濃度平均值（CFU/m3）空氣潔凈度級別 驗證日常監(jiān)測 100 級12 10000 級220 級20100 測試狀態(tài)對單向流，測試在空氣凈化系統(tǒng)至少運行 10min 后進行； 對非單向流系統(tǒng)，至少

23、運行 30min 后進行。 83 .2.2 沉降菌的測定方法 沉降菌是用暴露法收集降落在培養(yǎng)皿中的活生物性粒子，然后加以培養(yǎng)、繁殖后加以計數(shù)得到的。根據(jù)國家標 準 GB/T 16293-16294-1996醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌、沉降菌的測試方法。 （1）測試方法 方法概述：本測試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時 間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并 以此來評定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。 所用的儀器和設(shè)備 a）高壓消毒鍋：使用時應嚴格按照儀器說明書操作。 b） 恒溫培養(yǎng)箱：必須定期對

24、培養(yǎng)箱的溫度計進行檢定。 c）培養(yǎng)皿：一般采用 90mm15mm 的硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿。 d）培養(yǎng)基：普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基或其他藥典認可的培養(yǎng)基。 （2）測試狀態(tài) 沉降菌測試前，被測試潔凈室（區(qū)）的溫濕度須達到規(guī)定的要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在 規(guī)定值內(nèi)。 沉降菌測試前，被測試潔凈室（區(qū)）已經(jīng)過消毒。 測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種，測試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并在報告中注明測試狀態(tài)。 （3） 測試人員 測試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級別的工作服。 靜態(tài)測試時，室內(nèi)測試人員不得多于二人。 （4）測試時間 對單向流，如 100 級凈化房間及層流工作臺，測試應在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于

25、 10min 后開始。 對非單向流，如 10 000 級、100 000 級以上的凈化房間，測試應在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于 30min 后開 始。 （5）采樣點數(shù)目及其布置 最少采樣點數(shù)目 沉降法的最少采樣點數(shù)可按表 1 確定。 表 1 沉降菌測定最少采樣點數(shù)目（個） 潔 凈 度 級 別面 積 m2 10010 000100 000 102322 20422 40822 401001642 10020040103 20040080206 40010001604013 1 0002 00040010032 200080020063 注：表中的面積，對于單向流潔凈室，指的是送風面面積，對非單向

26、流潔凈室是指的房間面積。 在滿足最少測點數(shù)的同時，還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)，見表 2。 表表 2 最少培養(yǎng)皿數(shù)最少培養(yǎng)皿數(shù) 潔凈度級別所需 90mm 培養(yǎng)皿數(shù)（以沉降 0.5h 計） 100 10 000 100 000 14 2 2 采樣點的布置 采樣點的位置可以同懸浮粒子測試點。 a）工作區(qū)采樣點的位置離地 0.8m1.5m 左右（略高于工作面）。 b）可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加采樣點。 （6） 測試步驟 采樣方法 將已制備好的培養(yǎng)皿按 8.4.5.2 的要求放置，打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露 0.5h，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。 培養(yǎng) a）全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培

27、養(yǎng)。 b） 在 3035培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于 48h。 c）每批培養(yǎng)基應有對照試驗，檢驗培養(yǎng)基本身是否污染?？擅颗x定 3 只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。 菌落計數(shù) a）用肉眼直接計數(shù)，標記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用 510 倍放大鏡檢查，不否遺漏。 b） 若培養(yǎng)皿上有 2 個或 2 個以上的菌落重疊，可分辨時仍以 2 個或 2 個以上菌落計數(shù)。 （7）注意事項 測試用具要作滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。 采取一切措施防止人為對樣本的污染。 對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細的記錄。 由于細菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生 長的菌落，

28、并須注意細菌菌落與培養(yǎng)基沉定物的區(qū)別，必要時用顯微鏡鑒別。 采樣前應仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應剔除。 （8）記錄 測試報告中應記錄房間溫度、相對濕度、壓差及測試狀態(tài)。附件 4：沉降菌檢測記錄 （9）結(jié)果計算 用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。 平均菌落數(shù)的計算，見式（1）。 M1+M2+Mn 平均菌落數(shù) M= n （1 ） 式中：M平均菌落數(shù)； M11 號培養(yǎng)皿菌落數(shù)； M22 號培養(yǎng)皿菌落數(shù)； Mnn 號培養(yǎng)皿菌落數(shù)； n培養(yǎng)皿總數(shù)。 （10）結(jié)果評定 用平均菌落數(shù)判斷潔凈室（區(qū)）空氣中的微生物。 潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)必須低于所選定的評定標準。 若某潔凈室（區(qū)

29、）內(nèi)的平均菌落數(shù)超過評定標準，則必須對此區(qū)域先進行消毒，然后重新采樣兩次，測試結(jié) 果均須合格. （11） 沉降菌的測定可接受標準 沉降菌測定合格限度 空氣潔凈度級別沉降菌落數(shù)（CFU/皿） 100 級平均1 10000 級平均3 級平均10 8.3 靜壓差確認 8.3.1 空氣潔凈度等級不同的靜壓差應大于 5Pa，潔凈室區(qū)與室外大氣的靜壓差應大于 10Pa。 8.3.2 方法 （1） 測量前應將所有門都關(guān)閉，測量時不允許有人穿越房間，并開啟房間中的排風機或除塵器，通過墻壁上 安裝的微壓表，讀出房間這間的壓差。 （2）從平面上最里面的房間依次向外測定。 （4）每天上、下午各進行一次測定，將測定時

30、間和測定結(jié)果記錄下來。附件 5：靜壓差測定結(jié)果表 8.4 溫濕度確認 8.4.1 合格標準 溫度： 18-26 相對濕度： 45-65% 8.4.2 方法 （1）通過墻壁上安裝的經(jīng)過校準的溫濕度計，直接讀出房間的溫度和相對濕度。 （2）每天上、下午各進行一次測定，將測定時間和測定結(jié)果記錄下來。附件 6：溫濕度測定結(jié)果表 9 9 驗收標準驗收標準 檢驗設(shè)備和材料 文件執(zhí)行過程中的所有檢驗設(shè)備和材料都必須有記錄。如果檢驗設(shè)備沒有校正，必 須寫明并證明理由。 執(zhí)行文件需要的數(shù)據(jù)表格必須完整、準確和正確填寫。 必須符合數(shù)據(jù)表指定的所有標準。 文件附件中略述的所有的驗證測驗必須成功的執(zhí)行，在合適的頁面上標明結(jié)果。所有的驗證必須回答 “是”，否則必須記下偏差。描述并證明重新測試。 所有的偏差必須糾正，或提出一個偏差糾正計劃。 10 附件 附件 1：校對證書 附件 2：塵埃粒子測定測定濃度表 附件 3：浮游菌檢測記錄 附件 4：沉降菌檢測記錄 附件 5：靜壓差測定結(jié)果表 附件 6：溫濕度測定結(jié)果表 附件附件 2：塵埃粒子測定測