1、維生素C負(fù)荷試驗(yàn)摘要：負(fù)荷試驗(yàn)是評(píng)定人體水溶性維生素營養(yǎng)水平方法之一。其方法是先給被測(cè)者大劑量維生素，然后測(cè)定一定時(shí)間內(nèi)尿中該維生素排出量。若被測(cè)者體內(nèi)有充足的該維生素儲(chǔ)備，大劑量攝入后則將從尿中大量排出，反之，被測(cè)者的該維生素營養(yǎng)狀況較差，因而組織中儲(chǔ)備貧乏，攝入大劑量后組織將大部分或全部儲(chǔ)留，則尿中排出量減少。 進(jìn)行維生素C負(fù)荷試驗(yàn)時(shí)，被測(cè)者空腹，排尿后服維生素C500mg，飲水量可視季節(jié)而定，收集服用藥后四小時(shí)尿。在尿瓶中應(yīng)先加入1克草酸，使尿液pH保持在3-5，維生素C穩(wěn)定而不被破壞。還原型維生素C其強(qiáng)還原性可還原染料2，6-二氯酚靛酚，該染料在酸性溶液中呈紅色，被還原后失去紅色，其溶

2、液中過量，滴一滴染料時(shí)呈紅色。在無雜質(zhì)干擾時(shí)，被測(cè)溶液中維生素C還原的染料量與維生素C濃度成正比。關(guān)鍵詞：維生素C、尿液、負(fù)荷量1 材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備1.1.1實(shí)驗(yàn)材料及試劑1.1.1.1實(shí)驗(yàn)材料維生素C、220ml尿液(W)1.1.1.2實(shí)驗(yàn)試劑：(1) 1%草酸稱取草酸10克，溶解于100ml蒸餾水中。(2) 2，6-二氯酚靛酚溶液 稱取NaHCO3 40.2mg,溶解于200ml沸水中，待冷，稱取2，6-二氯酚靛酚染料50mg溶液于上述NaHCO3溶液中，冰箱內(nèi)過夜，次日過濾在250ml容量瓶中，蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，置棕色瓶中，冷藏保存。 標(biāo)定：取已標(biāo)定過的維生素C溶液2

3、ml及1%草酸溶液5ml于錐形瓶中。以待標(biāo)定的染料滴定，呈淡紅色，15秒內(nèi)不退色為終點(diǎn)。(3) 維生素C溶液稱取維生素C粉末20mg，以1%草酸稀釋至100ml，冷藏保存。標(biāo)定：吸取以上維生素C溶液2ml于錐形瓶中，加入6% KI溶液0.5ml，1%淀粉溶液2滴，再以標(biāo)準(zhǔn)的0.0010N KIO3溶液滴定至終點(diǎn)淡蘭色。(4) 0. 1000N KIO3溶液：精確稱取干燥的KIO3 0.3567克，用蒸餾水稀釋至100ml。(5) 0.0010N KIO3溶液：取上述溶液1ml，用水稀釋至100ml，次溶液1ml相當(dāng)于維生素C 0.088mg。(6) 1%淀粉溶液：稱取可溶性淀粉0.5mg，加水

4、一滴，攪拌成糊狀倒入50ml沸水中，混勻。冷藏待用。(7) KI 溶液：稱取KI 0.6g，溶解于10ml水中，臨用時(shí)配置。1.1.2實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備燒杯、容量瓶、錐形瓶、酸式滴定管、刻度吸管、量筒1.2 實(shí)驗(yàn)方法步驟（1） 留尿，在留尿樣前在燒杯中先放入0.2-0.3g草酸。（2） 保留約50ml尿樣在小燒杯中，其余棄入廁所。（3） 取2ml尿樣，以10%草酸稀釋至15ml，用2，6-二氯酚靛酚滴定，至出現(xiàn)淡紅色15秒內(nèi)部褪色為終點(diǎn)，記錄染料用量。2 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄與處理2.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 表2-1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)結(jié)果尿液量（ml）220消耗0.0010N KIO3溶液的量（ml）3.12

5、標(biāo)定維生素消耗染料ml數(shù)3.56標(biāo)定尿液消耗染料ml數(shù)0.792.2 數(shù)據(jù)處理2.2.1 維生素C濃度維生素C濃度（mg/ml）=消耗0.0010N KIO3溶液ml數(shù)*0.088（mg/ml） 所取維生素C ml數(shù) =3.12*0.088/2 =0.13728 mg/ml2.2.2 T的計(jì)算T（1ml染料/維生素Cmg數(shù)）=維生素C溶液濃度（mg/ml）*維生素C溶液ml數(shù)/消耗染料ml數(shù) =0.13728*2/3.56 =0.077122.2.3 尿中維生素C含量尿中維生素C含量（mg/4小時(shí)）=VT*尿量（ml） WV: 滴定尿樣時(shí)所用染料的ml數(shù)T：1ml染料相當(dāng)于維生素C mg數(shù)（m

6、g/ml）W：滴定時(shí)取尿樣ml數(shù)尿中維生素C含量（mg/4小時(shí)）=0.79*0.07712*220/2 =6.7 mg/4小時(shí)3 注意事項(xiàng) （1） 收取尿樣應(yīng)調(diào)節(jié)pH至3-5，以保持尿中維生素C。（2） 取樣后立即測(cè)定，操作過程迅速。（3） 所有試劑應(yīng)用蒸餾水配制，滴定過程中應(yīng)避免接觸金屬離子。（4） 尿樣用1%草酸稀釋，稀釋倍數(shù)視尿中維生素C含量而定，負(fù)荷尿?yàn)?-10倍，最好用去燃料量為1-4ml，結(jié)果較為準(zhǔn)確，否則可加大或減少尿樣量。4 結(jié)論負(fù)荷試驗(yàn)是評(píng)定人體水溶性維生素營養(yǎng)水平方法之一。其方法是先給被測(cè)者大劑量維生素，然后測(cè)定一定時(shí)間內(nèi)尿中該維生素排出量。若被測(cè)者體內(nèi)有充足的該維生素儲(chǔ)備，大劑量攝入后則將從尿中大量排出，反之，被測(cè)者的該維生素營養(yǎng)狀況較差，因而組織中儲(chǔ)備貧乏，攝入大劑量后組織將大部分或全部儲(chǔ)留，則尿中排出量減少。測(cè)得尿中維生素C含量為6.7 mg/4小時(shí)，口服500mg維生素C，4小時(shí)尿中排出