1、噬菌體侵染細(xì)菌的實驗誤差分析貴州省思南中學(xué)勾華強(qiáng) 在噬菌體侵染細(xì)菌的實驗中，赫爾希和蔡斯分別用35S和32P標(biāo)記的T2噬菌體侵染大腸桿菌，在理論上，用35S標(biāo)記的T2噬菌體侵染大腸桿菌后，上清液具有很高的放射性，下層沉淀物中不含放射性。用32P標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌后，上清液中不含放射性，下層沉淀物中具有很高的放射性；而實際上，實驗的最終結(jié)果顯示：用35S標(biāo)記的T2噬菌體侵染大腸桿菌后，在離心的下層沉淀物中，具有一定的放射性，而上清液中的放射性強(qiáng)度比理論值略低。用32P標(biāo)記的T2噬菌體侵染大腸桿菌后，在離心的上層清液中，具有一定的放射性，而下層沉淀物中的放射性強(qiáng)度比理論值略低。 在此實驗中，

2、是什么原因?qū)е聦嶒灁?shù)據(jù)與理論數(shù)據(jù)之間存在著誤差呢？我們不妨來對此實驗過程進(jìn)行一下誤差分析： 一、誤差的主要來源： （一）35S標(biāo)記的T2噬菌體侵染大腸桿菌的誤差來源： 1、在實驗中，35S標(biāo)記的T2噬菌體與大腸桿菌混合培養(yǎng)后，在攪拌器中攪拌不充分，使吸附在大腸桿菌外被35S標(biāo)記的噬菌體蛋白質(zhì)外殼沒有與大腸桿菌完全分離開，所以離心后下層沉淀物中存在放射性，而上清液中的放射性比理論值略低。 2、在實驗中，被35S標(biāo)記的一部分噬菌體沒有侵染到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，經(jīng)離心后少量存在于沉淀物中，使沉淀物中出現(xiàn)放射性，而上清液中的放射性比理論值略低。 （二）32P標(biāo)記的T2噬菌體侵染大腸桿菌的誤差來源： 1、在

3、實驗中，32P標(biāo)記的噬菌體和大腸桿菌混合培養(yǎng)的時間過長，噬菌體在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)增殖后釋放出來，經(jīng)離心后分布于上清液，使上清液出現(xiàn)放射性，而下層的放射性強(qiáng)度比理論值略低。 2、在實驗中，仍然有一部分噬菌體沒有侵染到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，經(jīng)離心后少量分布于上清液中，使上清液出現(xiàn)放射性，而下層沉淀物中的放射性強(qiáng)度比理論值略低。 二、減小誤差的主要方法： 在此實驗中要減小實驗數(shù)據(jù)和理論數(shù)據(jù)之間的誤差，應(yīng)注意以下幾點(diǎn)。 1、用被35S和32P標(biāo)記的T2噬菌體侵染大腸桿菌時，要控制好條件，使之讓T2噬菌體處于最適于侵染的環(huán)境中，達(dá)到充分侵染的目的。 2、嚴(yán)格控制好從噬菌體和大腸桿菌混合培養(yǎng)到用離心機(jī)分離的時間，

4、時間過短未充分侵染，時間過長侵染進(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)的噬菌體增殖后釋放出來，都會使實驗誤差增大，故嚴(yán)格控制好時間是減小誤差的關(guān)鍵因素之一。 3、在攪拌器中攪拌時一定要迅速、充分，使被35S標(biāo)記的噬菌體蛋白質(zhì)外殼與大腸桿菌完全分離開，減小誤差。綜合練習(xí)題：在赫爾希和蔡斯的噬菌體侵染細(xì)菌實驗中，用32P標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌，在理論上，上清液中不含放射性，下層沉淀物中具有很高的放射性；而實際上，實驗的最終結(jié)果顯示：在離心上層液體中，也具有一定的放射性，而下層的放射性強(qiáng)度比理論值略低。 （1）在赫爾希和蔡斯的噬菌體侵染細(xì)菌實驗中，用32P標(biāo)記噬菌體的DNA所體現(xiàn)的實驗方法是。 （2）在理論上，上層液

5、體放射性應(yīng)該為0，其原因是。 （3）由于實驗數(shù)據(jù)和理論數(shù)據(jù)之間有較大的誤差，由此對實驗過程進(jìn)行誤差分析： a、在實驗中，從噬菌體和大腸桿菌混合培養(yǎng)，到用離心機(jī)分離，這一段時間如果過長，會使上層液的放射性含量，其原因是。 b、在實驗中，如果有一部分噬菌體沒有侵染到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，是否是誤差的來源呢？。理由是：。 （4）噬菌體侵染細(xì)菌實驗證明了。（5）請設(shè)計一個方法，來大量制備用35S標(biāo)記的噬菌體（簡要說明）。 答案：（1）同位素標(biāo)記法（同位素示蹤法）（2）噬菌體將含32P的DNA全部注入到大腸桿菌內(nèi)（3）a、升高；噬菌體在大腸桿功菌內(nèi)增殖后釋放出來，經(jīng)離心后分布于上清液。b、是；沒有侵入大腸桿菌的噬菌體