1、一、準(zhǔn)確性準(zhǔn)確度是指用這種方法測(cè)量的結(jié)果接近真實(shí)值或參考值的程度，通常用回收率(%)表示。精確度應(yīng)在規(guī)定范圍內(nèi)確定。1.化學(xué)藥物含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確性原料藥由對(duì)照品測(cè)定，或?qū)⒃摲椒ǐ@得的結(jié)果與另一種已知準(zhǔn)確度的方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較。制劑可以通過(guò)向處方量空白輔料中加入已知量的參照物質(zhì)來(lái)確定。如果不能獲得制劑輔料的所有成分，可以向待測(cè)制劑中加入已知量的被測(cè)物質(zhì)，或者將建立的方法的測(cè)試結(jié)果與另一種已知準(zhǔn)確度的方法的測(cè)試結(jié)果進(jìn)行比較。準(zhǔn)確度也可以從測(cè)定的精密度、線性和特異性中推斷出來(lái)。2.化學(xué)雜質(zhì)定量測(cè)定的準(zhǔn)確性已知量的雜質(zhì)可加入原料藥或制劑處方量的空白輔料中測(cè)定。如果無(wú)法獲得雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的對(duì)照品，

2、則可將已建立的方法測(cè)定的結(jié)果與另一種成熟的方法進(jìn)行比較，如藥典標(biāo)準(zhǔn)方法或驗(yàn)證方法。當(dāng)雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的校正因子無(wú)法測(cè)量或主成分的相對(duì)校正因子無(wú)法測(cè)量時(shí)，可以用主成分自控法計(jì)算雜質(zhì)含量，無(wú)需校正因子。應(yīng)當(dāng)清楚地表明，單一雜質(zhì)和雜質(zhì)的總量相當(dāng)于主要組分的重量比(%)或面積比(%)。3.中藥化學(xué)成分測(cè)定方法的準(zhǔn)確性加樣回收率可用對(duì)照品測(cè)定，即在已知被測(cè)成分含量的試驗(yàn)物質(zhì)中加入一定量的被測(cè)成分對(duì)照品，然后依法測(cè)定?；厥章实挠?jì)算方法是將測(cè)量值和試樣中的含量之差除以添加的參考物質(zhì)。在樣品添加和回收試驗(yàn)中，應(yīng)注意標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的添加量與試驗(yàn)產(chǎn)品中被測(cè)成分的含量之和必須在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)；添加的參考物質(zhì)的量應(yīng)該適

3、當(dāng)。如果太小，就會(huì)造成較大的相對(duì)誤差。如果太大，干擾成分將相對(duì)減少，真實(shí)性將變差?；厥章蕿?=(c-a)/s100%其中：a是被測(cè)產(chǎn)品中所含的被測(cè)成分的量；b是添加的參考物質(zhì)的量；c是測(cè)量值。4.校正系數(shù)的準(zhǔn)確性對(duì)于色譜方法，絕對(duì)(或定量)校正系數(shù)是指單位面積色譜峰所代表的待測(cè)物質(zhì)的量。待測(cè)物質(zhì)的絕對(duì)校正因子與所選參考物質(zhì)的比值即為相對(duì)校正因子。相對(duì)校正因子計(jì)算方法常用于化學(xué)藥物相關(guān)物質(zhì)的測(cè)定和中草藥及其復(fù)方制劑中多指標(biāo)成分的測(cè)定。校正因子有多種表達(dá)方式，本指導(dǎo)原則中的校正因子是指氣相色譜和高效液相色譜中的相對(duì)權(quán)重校正因子。通過(guò)比較替代物(參考物質(zhì))和替代物(測(cè)試物質(zhì))的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率，可以獲

4、得相對(duì)校正系數(shù)；當(dāng)使用紫外吸收檢測(cè)器時(shí)，可以比較和計(jì)算在特定波長(zhǎng)和溶劑條件下替代物(參考物質(zhì))和替代物(待檢測(cè)物質(zhì))的吸收系數(shù)之比。5.數(shù)據(jù)要求在規(guī)定的范圍內(nèi)，取相同濃度(相當(dāng)于100%濃度水平)的試樣，用至少6個(gè)試樣的測(cè)量結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)；或者設(shè)計(jì)三種不同的濃度，為每種濃度準(zhǔn)備三種測(cè)試溶液，并用九個(gè)樣品的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)估。對(duì)于化學(xué)藥物，中間濃度的添加量與待測(cè)樣品中待測(cè)組分的量之比一般控制在1 : 1左右。建議高、低濃度參考物質(zhì)的添加量與待測(cè)樣品中待測(cè)組分的量之比應(yīng)控制在1.2-: 1、1-3360 1、0.8-3360 1左右。應(yīng)報(bào)告已知添加量的回收率(%)，或測(cè)定結(jié)果的平均值與真值之差及其相對(duì)

5、標(biāo)準(zhǔn)偏差，或?qū)τ谥兴帲虚g濃度的添加量與樣品中待測(cè)定組分的量之比左右控制在1 : 1。建議高、中、低濃度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的添加量與樣品中待測(cè)組分的量之比應(yīng)控制在1 .5: 1、1.33601和0.53360 1左右。應(yīng)報(bào)告樣品量、樣品中的含量和參考物質(zhì)的添加量。對(duì)于校正因子，應(yīng)報(bào)告測(cè)定方法、測(cè)定結(jié)果和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差%。在分析復(fù)雜基體、小于0.01%的組分和多組分時(shí)，可以適當(dāng)放寬回收率的限制。第二，精確度精度是指在特定條件下，對(duì)同一均勻樣品進(jìn)行多次取樣所測(cè)得的結(jié)果之間的接近程度。精度通常表示為偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。在相同的條件下，由同一個(gè)分析員測(cè)量的結(jié)果的精度稱為重復(fù)性；在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室中，不同的分

6、析員在不同的時(shí)間用不同的設(shè)備測(cè)量結(jié)果之間的精度，稱為中間精度；由不同實(shí)驗(yàn)室的不同分析員測(cè)量的結(jié)果之間的精確度被稱為再現(xiàn)性。雜質(zhì)的含量測(cè)定和定量測(cè)定應(yīng)考察方法的精密度。1.可重復(fù)性在規(guī)定的范圍內(nèi)，取相同濃度(相當(dāng)于100%濃度水平)的試樣，用至少6個(gè)結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)；或者設(shè)計(jì)三種不同的濃度，為每種濃度準(zhǔn)備三種測(cè)試溶液，并用九個(gè)樣品的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)估。當(dāng)使用9個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)時(shí)，對(duì)于化學(xué)藥物，中間濃度的添加量與待測(cè)樣品中待測(cè)組分的量之比通常控制在約1 : 1，并且建議高、中、低濃度參考物質(zhì)的添加量與待測(cè)樣品中待測(cè)組分的量之比應(yīng)控制在約1.2 : 1、1 3360 1和0.8 3360 1。對(duì)于中藥，

7、一般來(lái)說(shuō)，中間濃度的添加量與樣品中待測(cè)成分的量之比控制在1 : 1左右，建議高、中、低濃度對(duì)照品的添加量與樣品中待測(cè)成分的量之比控制在1.53360 1、1 3360 1和0.53360 1左右。2.中等精度考察不同日期、不同分析師、不同儀器等隨機(jī)變量對(duì)精度的影響，應(yīng)設(shè)計(jì)一個(gè)方案進(jìn)行中間精度檢驗(yàn)。3.再現(xiàn)性國(guó)家藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中采用的分析方法應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)，如通過(guò)不同的實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)獲得重現(xiàn)性結(jié)果。協(xié)作檢查的目的、過(guò)程和再現(xiàn)性結(jié)果應(yīng)記錄在起草說(shuō)明中。再現(xiàn)性試驗(yàn)應(yīng)注意樣品質(zhì)量的一致性以及儲(chǔ)存和運(yùn)輸環(huán)境對(duì)一致性的影響，以免影響再現(xiàn)性結(jié)果。4.數(shù)據(jù)要求應(yīng)報(bào)告偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差或置信區(qū)間。在復(fù)雜基

8、體的分析中，小于0.01%的含量和多組分，精密度是可以接受的范圍可以適當(dāng)放寬。第三，特殊性特異性是指用于正確確定當(dāng)采用色譜法和其他分離方法時(shí)，應(yīng)附上一份有代表性的圖譜以說(shuō)明該方法的特異性，并應(yīng)標(biāo)明圖譜中各成分的位置分離度應(yīng)符合要求。當(dāng)有雜質(zhì)對(duì)照品時(shí)，可在樣品中加入雜質(zhì)或輔料進(jìn)行含量測(cè)定，以檢查測(cè)定結(jié)果是否受到干擾，并將測(cè)定結(jié)果與無(wú)雜質(zhì)或輔料的樣品進(jìn)行比較。對(duì)于雜質(zhì)檢查，也可以向樣品中加入一定量的雜質(zhì)，以研究是否可以分離出包含雜質(zhì)的成分。當(dāng)沒(méi)有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物時(shí)，可以測(cè)定含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的樣品，并與另一種驗(yàn)證方法或藥典方法進(jìn)行比較。也可以通過(guò)強(qiáng)光照射、高溫、高濕、酸(堿)水解或氧化進(jìn)行加速破壞，

9、以研究可能的降解產(chǎn)物和降解途徑對(duì)含量測(cè)定和雜質(zhì)測(cè)定的影響。含量測(cè)定方法應(yīng)比較兩種方法的結(jié)果，雜質(zhì)檢查應(yīng)比較檢測(cè)到的雜質(zhì)數(shù)量。如有必要，可以使用光電二極管陣列檢測(cè)和質(zhì)譜分析來(lái)檢查峰純度。第四，檢測(cè)限檢測(cè)限是指樣品中可檢測(cè)的被測(cè)物的最小量。該方法的檢測(cè)限應(yīng)通過(guò)藥品鑒別試驗(yàn)和其他質(zhì)量檢查方法來(lái)確定。檢測(cè)限僅作為限檢指標(biāo)和定性鑒別的依據(jù)，沒(méi)有定量意義。常用的方法如下。1.直觀方法用已知濃度的被測(cè)物體測(cè)試可可靠檢測(cè)的最低濃度或數(shù)量。2.信噪比法一種用于顯示基線噪聲的分析方法，即，將已知低濃度樣品測(cè)量的信號(hào)與空白樣品測(cè)量的信號(hào)進(jìn)行比較，并計(jì)算可被可靠檢測(cè)的被測(cè)物質(zhì)的最低濃度或量。通常，當(dāng)信噪比為3 :1或

10、2 : 1時(shí)，檢測(cè)限由相應(yīng)的濃度或注入儀器的量決定。3.數(shù)據(jù)要求通過(guò)上述計(jì)算方法獲得的檢測(cè)限數(shù)據(jù)必須用類似含量的樣品進(jìn)行驗(yàn)證。應(yīng)附上測(cè)定圖表，解釋測(cè)試過(guò)程和檢測(cè)極限結(jié)果。V.定量極限定量限是指樣品中可定量測(cè)定的被測(cè)物質(zhì)的最小量，測(cè)定結(jié)果應(yīng)滿足準(zhǔn)確度和精密度的要求。在分析痕量或痕量藥物以及定量測(cè)定藥物雜質(zhì)和降解產(chǎn)物時(shí)，應(yīng)確定該方法的定量限度。常用的方法如下。1.直觀方法使用已知濃度的被測(cè)物質(zhì)，測(cè)試能夠可靠定量確定的最低濃度或數(shù)量。2.信噪比法顯示基線噪聲的分析方法是將已知低濃度樣品測(cè)得的信號(hào)與空白樣品測(cè)得的信號(hào)進(jìn)行比較，并計(jì)算可可靠量化的被測(cè)物質(zhì)的最低濃度或量。通常，當(dāng)信噪比為10 :1時(shí)，定量

11、限值由相應(yīng)的濃度或注入儀器的量決定。3.數(shù)據(jù)要求通過(guò)上述計(jì)算方法獲得的定量限數(shù)據(jù)必須用類似含量的樣品進(jìn)行驗(yàn)證。應(yīng)附上測(cè)定圖表，解釋試驗(yàn)過(guò)程和定量極限結(jié)果，包括準(zhǔn)確度和精密度驗(yàn)證數(shù)據(jù)。第六，線性線性是指測(cè)量響應(yīng)值與樣品中被測(cè)物濃度在設(shè)計(jì)范圍內(nèi)的比例關(guān)系。線性關(guān)系應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測(cè)量?？梢酝ㄟ^(guò)精確稀釋相同的參考物質(zhì)儲(chǔ)備溶液，或者分別精確稱量參考物質(zhì)并制備一系列參考物質(zhì)溶液來(lái)測(cè)定，并且可以制備至少5種不同濃度的參考物質(zhì)溶液。使用測(cè)得的響應(yīng)信號(hào)繪制出被測(cè)對(duì)象的濃度，觀察其是否為線性，然后使用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。必要時(shí)，可以轉(zhuǎn)換響應(yīng)信號(hào)范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用及其線性、準(zhǔn)確度和精密度結(jié)果和要求來(lái)

12、確定。原料和制劑的含量測(cè)定一般為測(cè)定濃度的80%-120%；制劑的含量均勻度一般為測(cè)定濃度的70%-130%，特殊劑型如氣霧劑和噴霧劑的范圍可適當(dāng)放寬；溶出度的測(cè)定溶出度或釋放度一般為限值的30%。如果指定了限制范圍，則應(yīng)為下限的-20%到上限的20%；根據(jù)初步實(shí)際測(cè)量數(shù)據(jù)，雜質(zhì)測(cè)定范圍應(yīng)為規(guī)定限值的20%。如果同時(shí)進(jìn)行含量測(cè)定和雜質(zhì)檢查，并使用峰面積歸一化法進(jìn)行計(jì)算，則線性范圍應(yīng)為規(guī)定雜質(zhì)限值的-20%至含量限值(或上限的20%)。在中藥分析中，應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和結(jié)果以及線性、準(zhǔn)確度和精密度的要求確定分析范圍。對(duì)于具有特殊功效或藥理作用的毒性成分，其驗(yàn)證范圍應(yīng)大于限量范圍。測(cè)量校準(zhǔn)系數(shù)時(shí)，通常應(yīng)根據(jù)其應(yīng)用對(duì)象的測(cè)量范圍來(lái)確定范圍。八.持久性耐久性是指當(dāng)測(cè)量條件發(fā)生微小變化時(shí)，測(cè)量結(jié)果不會(huì)受到影響的公差程度，它為日常檢查中使用的既定方法提供了基礎(chǔ)。當(dāng)我們開(kāi)始研究分析方法時(shí)，我們應(yīng)該考慮它的持久性。如果測(cè)定條件苛刻，應(yīng)在方法中說(shuō)明，并指出可接受的變化范圍。首先通過(guò)均勻