1、 實(shí)驗(yàn)六 乳粉中還原糖含量的測(cè)定直接滴定法（GB/T5009.72003第一法）教學(xué)目的要求：基本知識(shí)點(diǎn)1、掌握直接滴定測(cè)定還原糖的原理、基本過(guò)程和操作關(guān)鍵。2、熟練稱量、過(guò)濾、定容、滴定等基本操技術(shù)。重點(diǎn)：1、熟練稱量、過(guò)濾、定容、滴定等基本操技術(shù)2、直接滴定測(cè)定還原糖的原理、基本過(guò)程和操作關(guān)鍵。難點(diǎn)：直接滴定測(cè)定還原糖的原理和控制要點(diǎn)課時(shí)教學(xué)方案：復(fù)習(xí)與提問(wèn)：1、檢查實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備情況，（1）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容；（2）實(shí)驗(yàn)儀器與試劑有哪些？（3）直接滴定測(cè)定還原糖的步驟。2、直接滴定測(cè)定還原糖的注意事項(xiàng)和控制要點(diǎn)【引入新課】乳糖是半乳糖經(jīng)-1，4糖苷鍵與葡萄糖結(jié)合的還原性二糖，稱為4-O- d吡喃半乳糖-

2、d-吡喃葡萄糖，還原基在葡萄糖單位上。乳糖有兩種異構(gòu)體，即-乳糖和-乳糖。乳糖 是唯一沒(méi)有在植物中發(fā)現(xiàn)的糖，因首次在牛乳中發(fā)現(xiàn)，故稱為乳糖。乳糖是哺乳動(dòng)物乳汁的主要成分，如人乳中約含6%7%，牛乳中約含5%。乳糖是嬰兒主要食用的糖類物質(zhì)。初生嬰兒僅能消化乳糖、蔗糖、葡萄糖、果糖，對(duì)淀粉不易消化，故米、面淀粉食物應(yīng)在34個(gè)月后才開(kāi)始添加。乳糖對(duì)嬰兒的重要意義還在于它能夠保持腸道中最合適的腸菌種數(shù)，并能促進(jìn)鈣的吸收。隨著年齡的增大，腸道中將乳糖分解為葡萄糖和半乳糖的乳糖酶活性急劇下降，甚至在某些個(gè)體中幾乎降到0，因而成年人食用大量的乳糖，不易消化，食物中乳糖含量高于15%時(shí)可導(dǎo)致滲透性腹瀉。一、目

3、的要求1、理解直接滴定法測(cè)定還原糖的原理及操作要點(diǎn)；2、熟練稱量、過(guò)濾、定容、滴定等基本操技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)原理 試樣經(jīng)除去蛋白質(zhì)后，在加熱條件下，以次甲基藍(lán)作指示劑，滴定標(biāo)定過(guò)的堿性酒石酸銅溶液（用還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定堿性酒石酸銅溶液），還原糖將溶液中的二價(jià)銅還原成氧化亞銅。以后稍過(guò)量的還原糖使次甲藍(lán)指示劑褪色，表示終點(diǎn)到達(dá)。根據(jù)試樣溶液消耗體積，計(jì)算還原糖量。反應(yīng)方程式如下：CuSO4+2NaOH=Cu(OH)2+Na2SO4COONa COONa CHOH CHO +Cu(OH)2= Cu +2H2OCHOH CHO COOK COOKCOONa COONa CHO CHOHCHO CHOH

4、2 Cu +(CHOH)4 +2H2O=2 + (CHOH)4+Cu2OCHO CHOH CH2HO CH2OHCOOK COOK亞甲藍(lán)氧化型+還原糖亞甲藍(lán)還原型(藍(lán)色) （無(wú)色）三、實(shí)驗(yàn)試劑（GB/T5009.7-2003食品中還原糖的測(cè)定）1、鹽酸。2、堿性酒石酸銅甲液：稱取15g硫酸銅 ( CuSO45H2O) 及0.05g次甲基藍(lán)，溶入水中并稀釋至1000mL。3、堿性酒石酸銅乙液：稱取50g酒石酸鉀鈉及75g氫氧化鈉，溶于水中，再加入4g亞鐵氰化鉀，完全溶解后，用水稀釋至1000mL，貯存于橡膠塞玻璃瓶?jī)?nèi)。4、乙酸鋅溶液：稱取21.9g乙酸鋅，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀釋至100m

5、L。5、亞鐵氰化鉀溶液：稱取10.6g亞鐵氰化鉀，加水溶解并稀釋至100mL。6、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取1.000g經(jīng)過(guò)962干燥2h的純葡萄糖，加水溶解后加入5mL鹽酸，并以水稀釋至1000mL。此溶液每mL相當(dāng)于1.0mg葡萄糖。提示：（1）此法所用的氧化劑堿性酒石酸銅的氧化能力較強(qiáng)，醛糖和酮糖都能被氧化，所測(cè)得是總還原糖含量。（2）本法是根據(jù)經(jīng)過(guò)標(biāo)定的一定量的堿性酒石酸銅溶液（Cu2+ 量一定）消耗的試樣溶液量來(lái)計(jì)算試樣溶液中的還原糖的含量，反應(yīng)體系中Cu2+ 的含量是定量的基礎(chǔ)，所以在試樣處理時(shí)，不能用銅鹽作為澄清劑，以免試樣溶液中引入Cu2+ ，得到錯(cuò)誤的結(jié)果。（3）次甲基藍(lán)本身也

6、是一種氧化劑，其氧化型為藍(lán)色，還原型為無(wú)色；但在測(cè)定條件下，它的氧化能力比Cu2+弱，故還原糖先與Cu2+ 反應(yīng)， Cu2+ 完全反應(yīng)后，稍微過(guò)量一點(diǎn)的還原糖將次甲基藍(lán)指示劑還原，使之由藍(lán)色變?yōu)闊o(wú)色，指示滴定終點(diǎn)。（4）為消除氧化亞銅沉淀對(duì)滴定終點(diǎn)觀察的干擾，在堿性酒石酸銅乙液中加入少量亞鐵氰化鉀，使之與Cu2O生成可溶性的無(wú)色配合物，而不再析出紅色沉淀，其反應(yīng)式如下：CU2O+K4Fe(CN)6+H2O=K2Cu2Fe(CN)6+2KOH （5）堿性酒石酸銅甲液和乙液應(yīng)分別貯存，用時(shí)才混合，不能事先混合貯存。否則酒石酸鉀鈉銅配合物長(zhǎng)期在堿性條件下會(huì)慢慢分解析出氧化亞銅沉淀，使試劑有效濃度降低

7、。結(jié)合實(shí)驗(yàn)想一想：（1）以上列舉試劑全面嗎？（2）堿性酒石酸銅甲液中加入次甲基藍(lán)的目的是什么？（3）堿性酒石酸銅乙液中加入亞鐵氰化鉀的目的是什么？（4）堿性酒石酸銅甲液和乙液為什么不能提前混合？（5）直接滴定法和高錳酸鉀法中堿性酒石酸銅溶液的配制方法一致嗎？（6）葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液配制中加入鹽酸的作用是什么？四、實(shí)驗(yàn)儀器1、分析天平； 2、牛角匙；3、50mL小燒杯； 4、250mL容量瓶；5、100mL量筒，1個(gè)/2組； 6、250mL錐形瓶3只；7、25mL酸式滴定管1支/組； 8、5mL移液管4支/2組；9、10mL移液管1支/2組； 10、干燥濾紙3張，漏斗1個(gè)/組；11、小玻璃棒1根/組

8、； 12、玻璃珠：9顆/組 ；13、可調(diào)電爐；結(jié)合實(shí)驗(yàn)想一想：以上列舉儀器全面嗎？各種儀器在實(shí)驗(yàn)中用于什么？五、操作步驟（一）試樣處理稱取約2.50g5.00g試樣，置于250mL容量瓶中，加50mL水，搖勻后慢慢加入5mL乙酸鋅溶液，混勻放置片刻，加入5mL亞鐵氰化鉀溶液，加水至刻度，混勻，沉淀、靜置30min，用干燥濾紙過(guò)濾，棄去初濾液，濾液備用。提示：醋酸鋅及亞鐵氰化鉀作為蛋白質(zhì)沉淀劑，這兩次種試劑混合形成白色的氰亞鐵酸鋅沉淀，能使溶液中的蛋白質(zhì)共同沉淀下來(lái)，主要用于乳制品及富含蛋白質(zhì)的淺色糖液，其澄清效果較好。建議:考慮到最后試樣滴定與標(biāo)定體積接近，稱乳粉樣為2.502.60g，最后定

9、容至500mL，滴定體積約為10mL，標(biāo)定約10.30mL想一想：（1）試樣用什么天平稱量？（2）50mL水、5mL乙酸鋅溶液、5mL亞鐵氰化鉀溶液分別用什么量取？（3）為什么要靜置30min；用干燥濾紙過(guò)濾；棄去初濾液？（二）標(biāo)定堿性酒石酸銅溶液吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置于150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加約9mL葡萄糖，控制在2min內(nèi)加熱至沸，趁沸以每?jī)擅?滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積，同時(shí)平行操作三份，取其平均值，計(jì)算每10mL （甲、乙液各5mL）堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡

10、萄糖的質(zhì)量或其他還原糖的質(zhì)量 （mg）。 A = CV式中：A10mL （甲、乙液各5mL） 堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量(mg)； C葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mg/ mL； V標(biāo)定時(shí)消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL。提示：滴定時(shí)要保持沸騰狀態(tài)，使上升蒸汽阻止空氣侵入滴定反應(yīng)體系中，一方面，加熱可加快還原糖與Cu2+的反應(yīng)速度；另一方面，次甲基藍(lán)的變色反應(yīng)是可逆的，還原型次甲基藍(lán)遇到空氣中的氧時(shí)又會(huì)被氧化為其氧化型，再變?yōu)樗{(lán)色。此外，氧化亞銅也極不穩(wěn)定，容易與空氣中的氧結(jié)合而被氧化，從而增加還原糖的消耗量。想一想：（1）5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液怎樣量??？（2）在重復(fù)三次滴定

11、中使用不同規(guī)格的錐形瓶對(duì)測(cè)定有影響嗎？（3）這一環(huán)節(jié)的操作關(guān)鍵是什么？（4）為什么要在加熱至沸騰狀態(tài)下進(jìn)行滴定？（5）加入玻璃珠的作用是什么？（三）試樣溶液預(yù)測(cè)吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置于150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，控制在2min內(nèi)加熱至沸，趁沸以先快后慢的速度，從滴定管中滴加試樣溶液，并保持溶液沸騰狀態(tài)，待溶液顏色變淺時(shí)，以每?jī)擅?滴的速度滴定，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄樣液消耗體積。當(dāng)樣液中還原糖濃度過(guò)高時(shí)應(yīng)適當(dāng)稀釋，再進(jìn)行正式測(cè)定，使每次滴定消耗樣液的體積控制在與標(biāo)定堿性酒石酸銅溶液時(shí)消耗的還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積相近，約在10mL左右。提

12、示：1、當(dāng)濃度過(guò)低時(shí)，則采取直接加入10mL試樣液，免去加水10mL，再用還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點(diǎn)，記錄消耗還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。2、預(yù)測(cè)定的目的：對(duì)試樣溶液中還原糖濃度有一定要要求（0.1%左右），測(cè)定時(shí)試樣溶液的消耗體積應(yīng)該與標(biāo)定葡萄糖標(biāo)液的消耗體積相近，通過(guò)測(cè)定了解試樣濃度是否合適，濃度過(guò)大或過(guò)小應(yīng)該加以調(diào)整，使測(cè)定時(shí)消耗試樣溶液量在10mL左右；二是通過(guò)測(cè)定可知道此溶液的大概消耗量，以便在正式的滴定時(shí)，預(yù)先加入比實(shí)際用量少 1mL左右的樣液，只留下1mL左右的樣液在續(xù)滴定時(shí)加入，以便保證在1min內(nèi)完成續(xù)滴定工作，提交預(yù)測(cè)定的準(zhǔn)確度。想一想：為什么要進(jìn)行預(yù)測(cè)？（四）試樣溶液測(cè)定吸取5.

13、0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置于150mL錐形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加比預(yù)測(cè)體積少1mL的試樣溶液至錐形瓶中，使在2min內(nèi)加熱至沸，趁沸繼續(xù)以每?jī)擅?滴的速度滴定，直至藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄樣液消耗體積，同法平行操作三份，得出平均消耗體積。注意觀察：1、當(dāng)?shù)味ńY(jié)束后，溶液放置一定時(shí)間，顏色發(fā)生的什么變化？2、為什么在整個(gè)滴定過(guò)程中要保持溶液一直呈沸騰狀態(tài)？六、數(shù)據(jù)記錄與計(jì)算（一）數(shù)據(jù)記錄123平均值標(biāo)定時(shí)葡萄糖用量，mL10mL堿性酒石酸銅相當(dāng)于葡萄糖的量，mg測(cè)定時(shí)消耗試樣溶液的量，mL稱取試樣質(zhì)量，g（二）結(jié)果計(jì)算試樣中還原糖(以葡萄糖計(jì))的含量為：

14、 式中：X試樣中還原糖(以葡萄糖計(jì))含量，g/100g；A10 mL堿性酒石酸銅溶液 (甲、乙液各5 mL) 相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量，mg； m試樣質(zhì)量，g；V測(cè)定時(shí)平均消耗試樣溶液體積，mL；V0試樣液總體積，mL；注意：計(jì)算結(jié)果保留到小數(shù)點(diǎn)后一位想一想：1、公式中各種數(shù)字和符號(hào)的意義！2、試樣中被測(cè)組分越多，V值越？（大?。┮螅涸谥貜?fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的10%。七、說(shuō)明1、還原糖在堿性溶液中與硫酸銅的反應(yīng)并不符合當(dāng)量關(guān)系，還原糖在此反應(yīng)條件下將產(chǎn)生降解，形成多種活性降解物，反應(yīng)教程極為復(fù)雜，并非如反應(yīng)中所反應(yīng)的那么簡(jiǎn)單。在堿性及加熱條件下，還原糖將形成

15、某些差向異構(gòu)體的平衡體系。如D-葡聚糖向D-甘露糖、D-果糖轉(zhuǎn)化，構(gòu)成三種物質(zhì)的平衡混合物，及一些烯醇式中間體，如1，2-烯二醇，2，3-烯二醇，3，4-烯二醇等。這些中間體可進(jìn)一步促進(jìn)葡萄糖的異構(gòu)化，同時(shí)可進(jìn)一步降解形成活性降解物，從而構(gòu)成了整個(gè)反應(yīng)的平衡體系。其構(gòu)成的組分及含量，與實(shí)驗(yàn)條件有關(guān)，如堿度、加熱程度等。但實(shí)踐證明，只要嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)條件，分析結(jié)果的準(zhǔn)確度及精密度是可以滿足分析要求的。2、此實(shí)驗(yàn)影響測(cè)定結(jié)果的主要操作因素是反應(yīng)液堿度、熱源強(qiáng)度，煮沸時(shí)間和滴定速度，一般煮沸時(shí)間短消耗糖多，反之，消耗糖液少；滴定速度過(guò)快，消耗糖量多，反之，消耗糖量少。另外溶液堿度愈高，二價(jià)銅的還原愈快

16、，因此必須嚴(yán)格控制反應(yīng)的體積，使反應(yīng)體系堿度一致。（1）熱源一般采用800W電爐，反應(yīng)液在2秒內(nèi)沸騰。（2）控制錐形瓶?jī)?nèi)液體在2min內(nèi)加熱至沸騰。（3）1min內(nèi)滴定結(jié)束；（4）整個(gè)滴定過(guò)程一直保持沸騰狀態(tài)；（5）平行實(shí)驗(yàn)誤差不超過(guò)0.1mL。（6）加熱沸騰后，要始終保持在微沸狀態(tài)下滴定。繼續(xù)滴定至終點(diǎn)的體積（mL），應(yīng)控制在0.5至1 mL以內(nèi)。3、平行試驗(yàn)試樣溶液的消耗量相差不應(yīng)超過(guò)0.1mL。滴定時(shí)，先將所需體積的絕大部分先加入至堿性酒石酸銅試劑中，使其充分反應(yīng)，僅留1 mL左右用滴定方式加入，而不是全部由滴定方式加入，其目的是使絕大多數(shù)試樣溶液與堿性酒石酸銅在完全相同的條件下反應(yīng)，減

17、少因滴定操作帶來(lái)的誤差，提高測(cè)定精度。4、試樣液中還原糖的濃度不宜過(guò)高或過(guò)低，根據(jù)預(yù)測(cè)試驗(yàn)結(jié)果，調(diào)節(jié)試樣中還原糖的含量在1mg/mL。5、滴定終點(diǎn)藍(lán)色褪去后，溶液呈現(xiàn)黃色，此后又重新變?yōu)樗{(lán)色，不應(yīng)再進(jìn)行滴定。因?yàn)閬喖姿{(lán)指示劑被糖還原后藍(lán)色消失，當(dāng)接觸空氣中的氧氣后，被氧化重現(xiàn)藍(lán)色。6、還原糖與堿性酒石酸銅試劑反應(yīng)速度較慢，必須在加熱至沸的情況下進(jìn)行滴定。為防止燒傷及便于滴定工作，可于管尖部加接一彎形尖管，規(guī)格及安裝如圖所示，并戴上手套操作。 7、堿性酒石酸銅甲液和乙液應(yīng)分別配制，分別貯存，不能事先混合貯存。否則酒石酸鉀鈉銅配合物長(zhǎng)期在堿性條件下會(huì)慢慢分解析出氧化亞銅沉淀，使試劑有效濃度降低。八

18、、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析討論（一）檢測(cè)結(jié)果及質(zhì)量評(píng)價(jià)說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果和產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)試樣質(zhì)量作出評(píng)價(jià)。（二）分析討論試分析實(shí)驗(yàn)中可能導(dǎo)致誤差的因素及應(yīng)對(duì)措施？九、思考題（一）判斷（下列說(shuō)法正確的打“”，錯(cuò)誤的打“” ）1、直接滴定法測(cè)定還原糖的結(jié)果代表試樣中的總還原糖含量。（ ）2、直接滴定法測(cè)定還原糖是根據(jù)經(jīng)過(guò)標(biāo)定的一定量的堿性酒石酸銅溶液（ Cu2+量一定）消耗的試樣溶液量來(lái)計(jì)算試樣溶液中的還原糖的含量，反應(yīng)體系中Cu2+的含量是定量的基礎(chǔ)，所以在試樣處理時(shí)，不能用銅鹽作為澄清劑，以免試樣溶液中引入Cu2+ ，得到錯(cuò)誤的結(jié)果。（ ）3、直接滴定法測(cè)定還原糖在堿性酒石酸銅乙液中加入少量亞

19、鐵氰化鉀的目的是為消除氧化亞銅沉淀對(duì)滴定終點(diǎn)觀察的干擾，使之與Cu2O生成可溶性的無(wú)色配合物，而不再析出紅色沉淀。（ ）4、堿性酒石酸銅甲液和乙液應(yīng)分別貯存，不能事先混合貯存。否則酒石酸鉀鈉銅配合物長(zhǎng)期在堿性條件下會(huì)慢慢分解析出氧化亞銅沉淀，使試劑有效濃度降低。（ ）（二）填空1、直接滴定法測(cè)定還原糖滴定時(shí)要保持沸騰狀態(tài)，目的有三，一是：加熱可加快還原糖與Cu2+的反應(yīng)速度；二是：上升蒸汽阻止空氣侵入滴定反應(yīng)體系中，防止還原型次甲基藍(lán)遇到空氣中的氧時(shí)又會(huì)被氧化為其氧化型，再變?yōu)樗{(lán)色；三是：防止氧化亞銅與空氣中的氧結(jié)合而被氧化，從而增加還原糖的消耗量。2、預(yù)測(cè)定的目的有二，一是本法對(duì)試樣溶液中還

20、原糖濃度有一定要要求（0.1%左右），測(cè)定時(shí)試樣溶液的消耗體積應(yīng)該與標(biāo)定葡萄糖標(biāo)液的消耗體積相近，通過(guò)測(cè)定了解試樣濃度是否合適，濃度過(guò)大或過(guò)小應(yīng)該加以調(diào)整，使測(cè)定時(shí)消耗試樣溶液量在10mL左右；二是通過(guò)測(cè)定可知道此溶液的大概消耗量，以便在正式的滴定時(shí)，預(yù)先加入比實(shí)際用量少 1mL左右的試樣溶液，只留下1mL左右的試樣溶液在續(xù)滴定時(shí)滴入，以便保證在1min內(nèi)完成續(xù)滴定工作，提高預(yù)測(cè)定的準(zhǔn)確度。（三）簡(jiǎn)答題：影響直接滴定法測(cè)定還原糖測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度的因素有哪些？此法中影響測(cè)定結(jié)果的主要操作因素是反應(yīng)液堿度、熱源強(qiáng)度，煮沸時(shí)間和滴定速度。反應(yīng)的堿度直接影響Cu2+與還原糖反應(yīng)的速度、反應(yīng)進(jìn)行的程度及測(cè)

21、定結(jié)果。在一定范圍內(nèi)，溶液堿度越高， Cu2+的還原越快。因此，必須嚴(yán)格控制反應(yīng)液的體積，標(biāo)定和測(cè)定時(shí)消耗的體積應(yīng)接近，使反應(yīng)體系堿度一致。錐形瓶壁厚和熱源的穩(wěn)定程等，對(duì)測(cè)定精密度影響很大，因此，在標(biāo)定、預(yù)測(cè)、測(cè)定過(guò)程中，其實(shí)驗(yàn)條件都應(yīng)力求一致。熱源溫度應(yīng)控制在使溶液在2min內(nèi)加熱達(dá)到沸騰狀態(tài)，且所有測(cè)定均應(yīng)保持一致。否則加熱至沸騰所需時(shí)間不同，引起蒸發(fā)量不同，使反應(yīng)堿度發(fā)生變化，從而引入誤差。沸騰時(shí)間和滴定速度對(duì)結(jié)果影響也較大，一般沸騰時(shí)間短，消耗還原糖液多，反之，消耗還原糖液少；滴定速度過(guò)快，消耗還原糖時(shí)多，反之，消耗還原糖量少。 1min內(nèi)滴定結(jié)束；整個(gè)滴定過(guò)程一直保持沸騰狀態(tài)；繼續(xù)滴

22、定至終點(diǎn)的體積（mL），應(yīng)控制在0.5至1 mL以內(nèi)。高錳酸鉀滴定法（一）原理試樣經(jīng)除去蛋白質(zhì)后，其中還原糖把銅鹽還原為氧化亞銅，加硫酸鐵后，氧化亞銅被氧化為銅鹽，以高錳酸鉀溶液滴定氧化作用后生成的亞鐵鹽，根據(jù)高錳酸鉀消耗量，計(jì)算氧化亞銅的含量，再查表得還原糖量。（1）將一定量的試樣溶液與過(guò)量的堿性酒石酸銅溶液反應(yīng)，還原糖將Cu2+還原為氧化亞銅，過(guò)濾后，得到氧化亞銅沉淀；CuSO4 +2NaOH=Cu(OH)2+Na2SO4COONa COONa CHOH CHO +Cu(OH)2= Cu +2H2OCHOH CHO COOK COOK COONa COONa CHO CHOCHO CHOH Cu + (CHOH)4 +2H2O=2 + (CHOH)4+Cu2O CHO CHOH CH2HO CH2OHCOOK COOK（2）向氧化亞銅沉淀中加入過(guò)量的酸性硫酸鐵溶液，氧化亞銅被氧化溶解，而三價(jià)鐵則被還原為亞鐵鹽；Cu2O+Fe2(SO4)3+H2SO42CuSO4+2FeSO4+H2O(3)再用高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定所生成的亞鐵鹽，根據(jù)高錳酸鉀溶液消耗量可計(jì)算出氧化亞銅的量。再?gòu)臋z索表中查出與氧化亞銅量相當(dāng)?shù)倪€原糖量，即可計(jì)算出試樣中還原糖含量。10FeSO4+2KMnO4+8H2SO45Fe2(SO4)3+2MnSO4+K2SO4+8H2O由反應(yīng)式可見(jiàn)：5molCU2O相當(dāng)