1、高效液相色譜習(xí)題及參考答案一、單項(xiàng)選擇題1. 在液相色譜法中，按分離原理分類，液固色譜法屬于（ ）。A、分配色譜法 B、排阻色譜法 C、離子交換色譜法 D、吸附色譜法2. 在高效液相色譜流程中，試樣混合物在（ ）中被分離。A、檢測(cè)器 B、記錄器 C、色譜柱 D、進(jìn)樣器3. 液相色譜流動(dòng)相過(guò)濾必須使用何種粒徑的過(guò)濾膜？A、0.5m B、0.45m C、0.6m D、0.55m4. 在液相色譜中，為了改變色譜柱的選擇性，可以進(jìn)行如下哪些操作？A、改變流動(dòng)相的種類或柱子 B、改變固定相的種類或柱長(zhǎng)C、改變固定相的種類和流動(dòng)相的種類 D、改變填料的粒度和柱長(zhǎng)5. 一般評(píng)價(jià)烷基鍵合相色譜柱時(shí)所用的流動(dòng)相

2、為（ ）A、甲醇/水（83/17） B、甲醇/水（57/43） C、正庚烷/異丙醇（93/7） D、乙腈/水（1.5/98.5）6. 下列用于高效液相色譜的檢測(cè)器，（ ）檢測(cè)器不能使用梯度洗脫。A、紫外檢測(cè)器 B、熒光檢測(cè)器 C、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器 D、示差折光檢測(cè)器7. 在高效液相色譜中，色譜柱的長(zhǎng)度一般在（ ）范圍內(nèi)。A 、1030cm B、 2050m C 、12m D、25m8. 在液相色譜中, 某組分的保留值大小實(shí)際反映了哪些部分的分子間作用力（ ）A、組分與流動(dòng)相 B、組分與固定相 C、組分與流動(dòng)相和固定相 D、組分與組分9. 在液相色譜中，為了改變柱子的選擇性，可以進(jìn)行（ ）的操作

3、A、改變柱長(zhǎng) B、改變填料粒度C、改變流動(dòng)相或固定相種類 D、改變流動(dòng)相的流速10. 液相色譜中通用型檢測(cè)器是（ ）A、紫外吸收檢測(cè)器 B、示差折光檢測(cè)器 C、熱導(dǎo)池檢測(cè)器 D、氫焰檢測(cè)器11. 在環(huán)保分析中，常常要監(jiān)測(cè)水中多環(huán)芳烴，如用高效液相色譜分析，應(yīng)選用下述哪種檢波器A、熒光檢測(cè)器 B、示差折光檢測(cè)器 C、電導(dǎo)檢測(cè)器 D、紫外吸收檢測(cè)器12. 在液相色譜法中，提高柱效最有效的途徑是（ ）A、提高柱溫 B、降低板高 C、降低流動(dòng)相流速 D、減小填料粒度13. 在液相色譜中，不會(huì)顯著影響分離效果的是（ ）A、改變固定相種類 B、改變流動(dòng)相流速C、改變流動(dòng)相配比 D、改變流動(dòng)相種類14. 不

4、是高液相色譜儀中的檢測(cè)器是（ ）A、紫外吸收檢測(cè)器 B、紅外檢測(cè)器 C、差示折光檢測(cè) D、電導(dǎo)檢測(cè)器15. 高效液相色譜儀與氣相色譜儀比較增加了（ ）A、恒溫箱 B、進(jìn)樣裝置 C、程序升溫 D、梯度淋洗裝置16. 在高效液相色譜儀中保證流動(dòng)相以穩(wěn)定的速度流過(guò)色譜柱的部件是（ ） A、貯液器 B、輸液泵 C、檢測(cè)器 D、溫控裝置17. 高效液相色譜、原子吸收分析用標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制一般使用（ ）水A國(guó)標(biāo)規(guī)定的一級(jí)、二級(jí)去離子水 B國(guó)標(biāo)規(guī)定的三級(jí)水 C不含有機(jī)物的蒸餾水 D無(wú)鉛(無(wú)重金屬)水18. 高效液相色譜儀與普通紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)完全不同的部件是（ ） A、流通池 B、光源 C、分光系統(tǒng) D、檢

5、測(cè)系統(tǒng)19. 下列哪種是高效液相色譜儀的通用檢測(cè)器 A、紫外檢測(cè)器 B、熒光檢測(cè)器 C、安培檢測(cè)器 D、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器20. 高效液相色譜儀中高壓輸液系統(tǒng)不包括 A、貯液器 B、高壓輸液泵 C、過(guò)濾器 D、梯度洗脫裝置 E、進(jìn)樣器二、判斷題：1. 液相色譜分析時(shí)，增大流動(dòng)相流速有利于提高柱效能。2. 高效液相色譜流動(dòng)相過(guò)濾效果不好，可引起色譜柱堵塞。 3. 高效液相色譜分析的應(yīng)用范圍比氣相色譜分析的大。4. 反相鍵合相色譜柱長(zhǎng)期不用時(shí)必須保證柱內(nèi)充滿甲醇流動(dòng)相。5. 高效液相色譜分析中，使用示差折光檢測(cè)器時(shí)，可以進(jìn)行梯度洗脫。6. 在液相色譜法中，提高柱效最有效的途徑是減小填料粒度。7. 在

6、液相色譜中，范第姆特方程中的渦流擴(kuò)散項(xiàng)對(duì)柱效的影響可以忽略。8. 由于高效液相色譜流動(dòng)相系統(tǒng)的壓力非常高，因此只能采取閥進(jìn)樣。9. 高效液相色譜儀的色譜柱可以不用恒溫箱，一般可在室溫下操作。10. 高效液相色譜中，色譜柱前面的預(yù)置柱會(huì)降低柱效。11. 液相色譜中，化學(xué)鍵合固定相的分離機(jī)理是典型的液液分配過(guò)程。12. 高效液相色譜分析中，固定相極性大于流動(dòng)相極性稱為正相色譜法。13. 高效液相色譜分析不能分析沸點(diǎn)高，熱穩(wěn)定性差，相對(duì)分子量大于400的有機(jī)物。14. 在液相色譜法中，約7080的分析任務(wù)是由反相鍵合相色譜法來(lái)完成的。15. 在高效液相色譜儀使用過(guò)程中，所有溶劑在使用前必須脫氣。16

7、. 填充好的色譜柱在安裝到儀器上時(shí)是沒(méi)有前后方向差異的。17. 保護(hù)柱是在安裝在進(jìn)樣環(huán)與分析柱之間的，對(duì)分析柱起保護(hù)作用，內(nèi)裝有與分析柱不同固定相。18. 檢測(cè)器、泵和色譜柱是組成高效液相色譜儀的三大關(guān)鍵部件。19. 紫外可見(jiàn)光檢測(cè)器是利用某些溶質(zhì)在受紫外光激發(fā)后，能發(fā)射可見(jiàn)光的性質(zhì)來(lái)進(jìn)行檢測(cè)的。20. 應(yīng)用光電二極管陣列檢測(cè)器可以獲得具有三維空間的立體色譜光譜圖。三、簡(jiǎn)答題1. 為什么作為高效液相色譜儀的流動(dòng)相在使用前必須過(guò)濾、脫氣？2. 高效液相色譜有哪幾種定量方法，其中哪種是比較精確的定量方法，并簡(jiǎn)述之。參考答案一、 選擇題1.D 2.C 3.B 4.C 5.A 6.D 7.A 8.C

8、9.C 10.B 11.A 12.D 13.B 14.B 15.D 16.B 17.A 18. A 19. D 20. E二、 判斷題1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20.三、 簡(jiǎn)答題1. 高效液相色譜儀所用溶劑在放入貯液罐之前必須經(jīng)過(guò)0.45m濾膜過(guò)濾，除去溶劑中的機(jī)械雜質(zhì)，以防輸液管道或進(jìn)樣閥產(chǎn)生阻塞現(xiàn)象。所有溶劑在上機(jī)使用前必須脫氣；因?yàn)樯V住是帶壓力操作的，檢測(cè)器是在常壓下工作。若流動(dòng)相中所含有的空氣不除去，則流動(dòng)相通過(guò)柱子時(shí)其中的氣泡受到壓力而壓縮，流出柱子進(jìn)入檢測(cè)器時(shí)因常壓而將氣泡

9、釋放出來(lái)，造成檢測(cè)器噪聲增大，使基線不穩(wěn)，儀器不能正常工作，這在梯度洗脫時(shí)尤其突出。2. 高效液相色譜的定量方法與氣相色譜定量方法類似，主要有歸一化法、外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法。其中內(nèi)標(biāo)法是比較精確的定量方法。它是將已知量的內(nèi)標(biāo)物加到已知量的試樣中，在進(jìn)行色譜測(cè)定后，待測(cè)組分峰面積和內(nèi)標(biāo)物峰面積之比等于待測(cè)組分的質(zhì)量與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量之比，求出待測(cè)組分的質(zhì)量，進(jìn)而求出待測(cè)組分的含量。思考題與練習(xí)題 1.高效液相色譜是如何實(shí)現(xiàn)高效、快速、靈敏的？解：氣相色譜理論和技術(shù)上的成就為液相色譜的發(fā)展創(chuàng)造條件，從它的高效、高速和高靈敏度得到啟發(fā)，采用5-10m微粒固定相以提高柱效，采用高壓泵加快液體流動(dòng)相的流速；設(shè)計(jì)高靈

10、敏度、死體積小的紫外、熒光等檢測(cè)器，提高檢測(cè)靈敏度，克服經(jīng)典液相色譜的缺點(diǎn)，從而達(dá)到高效、快速、靈敏。2.簡(jiǎn)述液相色譜中引起色譜峰擴(kuò)展的主要因素，如何減少譜帶擴(kuò)張，提高柱效？解：液相色譜中引起色譜峰擴(kuò)展的主要因素為渦流擴(kuò)散、流動(dòng)相傳質(zhì)、停留流動(dòng)相傳質(zhì)及柱外效應(yīng)。在液相色譜中要減少譜帶擴(kuò)張，提高柱效，要減少填料顆粒直徑，減小填料孔穴深度，提高裝填的均勻性，采用低黏度溶劑作流動(dòng)相，流速盡可能低，同時(shí)要盡可能采用死體積較小的進(jìn)樣器、檢測(cè)器、接頭和傳輸管線等。3.色譜柱A柱長(zhǎng)為15cm，載體粒度為5m。另一B柱長(zhǎng)為30cm，載體粒度為10m。兩柱的柱效相等嗎？解：l=L/dplA=15/0.0005=

11、30000lB= 30/0.0010=30000A柱的折合柱長(zhǎng)為30000，B柱的折合柱長(zhǎng)也為30000，表明組分在兩根柱內(nèi)從柱入口到出口都經(jīng)過(guò)30000個(gè)載體顆粒，兩柱的柱效相等。4.流動(dòng)相為什么要脫氣？常用的脫氣方法有拿幾種？解：流動(dòng)相中溶解氣體存在以下幾個(gè)方面的害處 （1）氣泡進(jìn)入檢測(cè)器，引起光吸收或電信號(hào)的變化，基線突然跳動(dòng)，干擾檢測(cè)；（2）溶解在溶劑中的氣體進(jìn)入色譜柱時(shí)，可能與流動(dòng)相或固定相發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；（3） 溶解氣體還會(huì)引起某些樣品的氧化降解，對(duì)分離和分析結(jié)果帶來(lái)誤差。因此，使用前必須進(jìn)行脫氣處理。 常用的脫氣法有以下幾種: （1）加熱脫氣法；（2）抽吸脫氣法（3）吹氦脫氣法；（

12、4） 超聲波振蕩脫氣法。5.在液相色譜中。常用作固定相，又可用作鍵合相基體的物質(zhì)是A. 分子篩B. 硅膠 C. 氧化鋁D. 活性炭 解：B硅膠要形成化學(xué)鍵合固定相，所用的基質(zhì)材料應(yīng)有某種化學(xué)反應(yīng)活性，在四種固體固定相中只有硅膠含有硅醇基，是能進(jìn)行鍵合的活性官能團(tuán)。6.在1502mm硅膠柱流動(dòng)相為己烷/甲醇（150:2），紫外檢測(cè)器色譜條件下分離丙烯酰胺，判斷以下組分的出峰次序，為什么？ A.B.解：在給定的色譜條件下，組分B先出峰，組分A后出峰。以硅膠為固定相，己烷/甲醇（150:2）為流動(dòng)相，該體系為正相色譜，樣品的極性AB，在正相色譜體系極性小的組分先出峰，極性大的組分后出峰，所以出峰次序

13、為B先出，A后出。7.在硅膠柱上，用甲苯為流動(dòng)相，某組分的保留時(shí)間為30min，如果改用四氯化碳或乙醚為流動(dòng)相，試指出選用哪中溶劑能減少該組分的保留時(shí)間？為什么？ 解：該體系為正向色譜體系。在該體系中流動(dòng)相的極性增大保留值減少。流動(dòng)相甲苯、四氯化碳及乙醚的溶劑強(qiáng)度參數(shù)分別是0.29、0.18、0.38，因此選用溶劑強(qiáng)度參數(shù)大于甲苯的乙醚，可縮短該化合物的保留時(shí)間。8.為什么體積排阻色譜中任何組分的分配系數(shù)必須符合0K1？如果K1說(shuō)明什么問(wèn)題?解：因?yàn)榻M分的分配系數(shù)為K=Cs/Cm,Cs與Cm分別為組分在固定相和流動(dòng)相中的濃度,當(dāng)分子直徑大于孔徑時(shí),此時(shí)Cm=0,K=0.當(dāng)分子直徑小于固定相孔徑

14、時(shí),組分向空隙內(nèi)流動(dòng)相擴(kuò)散,達(dá)到平衡時(shí),一半組分在空隙內(nèi),一半組分在空隙外,此時(shí)K=1.0,若分子直徑介于以上兩種極限情況之間,K一定介于0與1之間,可見(jiàn)體積排阻色譜中,任何祖父呢的分配系數(shù)為0K1,如果K1說(shuō)明此時(shí)的分離方式已不是純粹的體積排阻色譜,其分離過(guò)程受到其他作用力(如吸附)的支配.9.為了測(cè)定鄰氨基苯酚中微量雜質(zhì)苯胺,現(xiàn)有下列固定相:硅膠,ODS鍵合相,流動(dòng)相有:水-甲醇,異丙醚-己烷,應(yīng)選用哪種固定相,流動(dòng)相?為什么?解：鄰氨基苯酚中微量雜質(zhì)苯胺測(cè)定,為了良好分離,應(yīng)讓苯胺先出峰,由于苯胺的極性小于鄰氨基苯酚,因此應(yīng)采用正相色譜法,選用硅膠為固定相,異丙醚-己烷為流動(dòng)相.10.在

15、ODS鍵合相固定相,甲醇-水為流動(dòng)相時(shí)試判斷四種苯并二氮雜苯的出現(xiàn)峰順序.為什么? 1.2. 3.4. 解：色譜條件為反相鍵合相色譜體系,在反相色譜體系中極性大的組分k小,首先出峰,按四種苯并二氮雜苯的結(jié)構(gòu),出峰順序?yàn)?-3-2-1.窗體頂端自測(cè)題 1.在GC和LC中, 影響柱選擇性的不同的因素是A.固定相的種類； B. 柱溫；C流動(dòng)相的種類；D分配比。 2.在液相色譜中, 范氏方程中的哪一項(xiàng)對(duì)柱效能的影響可以忽略不計(jì)? A渦流擴(kuò)散項(xiàng)；B分子擴(kuò)散項(xiàng)； C固定相傳質(zhì)阻力項(xiàng)；D流動(dòng)相中的傳質(zhì)阻力。3.在液相色譜中, 某組分的保留值大小實(shí)際反映了哪些部分的分子間作用力？ A組分與流動(dòng)相；B組分與固定

16、相； C組分與流動(dòng)相和固定相；D組分與組分。4.在液-固色譜法中, 以硅膠為固定相, 對(duì)以下四組分, 最后流出色譜柱的組分可能是A.苯酚； B. 苯胺；C鄰羥基苯胺；D對(duì)羥基苯胺。 5.在液-固色譜法中, 以硅膠為固定相, 對(duì)以下四組分, 最后流出色譜柱的組分可能是A.苯酚； B. 苯胺；C鄰羥基苯胺；D對(duì)羥基苯胺。 6.用液相色譜法分離長(zhǎng)鏈飽和烷烴的混合物, 應(yīng)采用下述哪一種檢測(cè)器?A紫外吸收檢測(cè)器；B示差折光檢測(cè)器； C熒光檢測(cè)器；D電化學(xué)檢測(cè)器。7.液液色譜法中的反相液相色譜法，其固定相、流動(dòng)相和分離化合物的性質(zhì)分別為：A非極性、極性和非極性； B極性、非極性和非極性；C極性、非極性和極性；D非極性、極性和離子化合物。8.若在一個(gè) 1m 長(zhǎng)的色譜柱上測(cè)得兩組分的分離度為 0.68，若要使它們完全分離，則柱長(zhǎng) (m)