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文檔簡介
1、臨床生物化學 課件模板-28,臨床生物化學:三、血清酶的生理變異,三、血清酶的生理變異:,臨床醫(yī)師常通過兩個途徑來判斷血清酶的測定結(jié)果是否異常,有無臨床價值。一是將所測值與同一被測對象在正常條件下所測值進行比較,二是將所測值與實驗室提供的參考值進行比較。但不論用什么方法都需知道,不僅是病理因素,還有不少生理因素也能引起所測值變化,這些變異并無臨床或病理意義。 (一)性別 大多數(shù)酶在男女之間無大差異,但少數(shù)酶如CK、GGT在男女之間有明顯差異,因此不能以一個參考值作為判斷標準。,臨床生物化學:三、血清酶的生理變異,三、血清酶的生理變異:,建議以130U/L為男性正常參考上限,100U/L為女性參
2、考值上限。這是因為CK在肌肉收縮中起重要作用,大量存在于肌肉組織中,從總體說男性肌肉比女性發(fā)達,所以血清CK在男女之間差異較大,在衡量個體CK變化時,恐怕肌肉發(fā)達程度是一個很重要的因素。GGT是另一個男女差別明顯的酶,常以GGT30U/L(30)為女性上界值,50U/L(30)為男性上界值,這可能與雌激素抑制GGT合成有關。,臨床生物化學:三、血清酶的生理變異,三、血清酶的生理變異:,嗜酒者可誘導GGT合成,而嗜酒者男性多于女性。 (二)年齡 不少酶在兒童時期與成人有所不同,例如新生兒的CK、LD、蘋果酸脫氫酶(MD)、ACP和谷氨酸脫氫酶(GLD)等常為成人2-3倍,尤其前兩項CK、LD是臨
3、床常用的酶。CK出生24小時內(nèi)可為成年人的3倍,到嬰兒時降為兩倍,到青春期降到成年人值。,臨床生物化學:三、血清酶的生理變異,三、血清酶的生理變異:,LD在出生時也為成人兩倍,逐漸下降到14歲和成年人值一致。同時LD1值兒童期也比成年人高,正常兒童也可出現(xiàn)LD1LD2,如不注意此點,簡單以正常成年人參考值為診斷標準,易導致兒童心肌炎的誤診。 年齡引起酶變化最明顯的酶是ALP,新生兒值略高于成年人。至周歲增至成年人的2-3倍。,臨床生物化學:三、血清酶的生理變異,三、血清酶的生理變異:,然后逐漸下降,到10歲左右,發(fā)育長高期ALP又明顯升高,可達到成人的3-5倍。這可能與該時期軟骨細胞、成骨細胞
4、代謝活躍密切相關,切勿認為有肝臟病變,必要時應測ALP同工酶以資鑒別。 也有少數(shù)酶如AMY,新生兒比成年人低。當進入老年期,有些酶也可出現(xiàn)變化,如ALP、GGT等都有輕度升高。,臨床生物化學:三、血清酶的生理變異,三、血清酶的生理變異:,(三)進食 大多數(shù)血清酶不受飲食影響,故測酶活性不一定空腹采血。但應注意酗酒者常引起GGT明顯升高,日本學者認為可根據(jù)血中GGT升高判斷酗酒程度,如未累及肝臟,戒酒后一周GGT可降至正常。此外如禁食數(shù)天可導致血清AMY下降。 (四)運動 劇烈運動可引起血清中多種酶升高,升高程度和運動量及持續(xù)時間有關,也與運動者是否經(jīng)常鍛煉相關。,臨床生物化學:三、血清酶的生理
5、變異,三、血清酶的生理變異:,訓練有素的運動員,其血清酶升高幅度小。升高的酶多為肌肉中含量豐富的CK、LD、AST、醛縮酶(ALD)和ALT等,這些酶變化機制和意義是運動醫(yī)學的一個重要研究項目,從臨床角度,抽血化驗前不宜過度運動,以免引起解釋困難。 (五)妊娠與分娩 妊娠期出現(xiàn)一系列生理變化,也可引起一些酶升高,如不注意有可能引起誤診。,臨床生物化學:三、血清酶的生理變異,三、血清酶的生理變異:,例如由于胎盤產(chǎn)生耐熱的ALP可引起血中ALP值超過正常,LAP也會明顯升高,但都無臨床診斷價值。銅氧化酶在妊娠期升高,若胎兒死亡,此酶很快降至正常,有學者在妊娠期監(jiān)測此酶以觀察胎兒情況。分娩時,由于子
6、宮收縮,肌肉劇烈活動,可導致CK、CK-BB、AST、LD等升高,這些變化與心肌損傷無關。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響:,除了生理條件可引起酶測定值的變化外,還有其它一些非病理因素也會引起實驗室測定結(jié)果的變化。 (一)酶測定方法 酶測定方法大致經(jīng)過三個歷史發(fā)展階段,50年代以前大都使用“固定時間法”,即讓酶與底物作用一段固定時間,一般為半小時左右,然后停止酶反應,用光電比色測產(chǎn)物生成量或底物消耗量,從而計算出酶催化反應的平均速度。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影
7、響:,再據(jù)此按各作者自己定義的“單位”向臨床報告測定結(jié)果。這些所報的單位往往在前面冠以作者的姓名命名,例如ALP根據(jù)不同測定方法就有金氏單位、鮑氏單位、國際單位等等。同一標本不同單位結(jié)果從表面數(shù)值看可以差異很大。如ALP上列三種單位參考值分別為3-13金氏單位,0-3鮑氏單位,20-80國際單位。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響:,50年代中期,國際臨床實驗室開始采用“連續(xù)監(jiān)測法”,就是習慣上所稱的“動態(tài)法”。需要使用生化分析儀,可以測酶反應的初速度,其結(jié)果遠比“固定時間法”所測平均速度準確,在高濃度標本時尤為明顯。這樣同一疾病
8、患者用兩種方法所測酶的結(jié)果并不一定平行一致。在疾病急性期,用新法測定結(jié)果增加倍數(shù)常明顯超過老法。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響:,例如在肝炎用賴氏法測ALT很少超過參考值上限的十倍。改用新法,在肝炎急性期可得到超過參考值上限數(shù)十倍乃至百倍以上的結(jié)果,由于后者結(jié)果和臨床病理變化相一致,結(jié)果準確。目前在發(fā)達國家中,新法已幾乎取代了老法,我國也已開始廣泛應用新法。本書各論在討論各種疾病酶變化時,將主要根據(jù)新法加以敘述。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響:,用新法也就是“
9、連續(xù)監(jiān)測法”所得結(jié)果,目前已基本統(tǒng)一使用1964年國際生化協(xié)會所規(guī)定的國際單位(IU):即以每分鐘能催化1微摩爾底物的酶量為1個國際單位。如表示血清中酶濃度多以U/L表示之,即IL標本(血清)中含的酶量,我國醫(yī)學界對此表示方法已經(jīng)熟悉習慣。我國現(xiàn)在規(guī)定SI制為計量的法定單位,SI制的酶單位為Katal,即每秒能催化1總分子底物的酶量為1個Katal,此單位不僅我國醫(yī)學家不熟悉,國際上應用不多,如有可能可同時用兩種單位報告結(jié)果,或者注明轉(zhuǎn)換系數(shù),即1U16.67Katal。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響:,但即使同使用連續(xù)監(jiān)測法
10、,同用IU/L報告結(jié)果,不同實驗室測定結(jié)果仍可出現(xiàn)較大差異。這是因為上述二法是通過測酶催化速度來間接表示酶量高低,而酶催化的速度還受很多其它因素影響。首先是溫度,在國際單位定義中并未規(guī)定測定溫度,而反應速度隨溫度升高而加速,一般說每增加10,反應速度將增加一倍。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響:,因此同一標本、同一方法,在37所得結(jié)果將顯著高于30。雖然國際臨床化學協(xié)會(IFCC)推薦30為酶測定溫度,但臨床實驗室由于實驗工作方便等因素,愈來愈多使用37。因此本書各酶測定參考值將以37所測結(jié)果為準,某些數(shù)據(jù)如在30測定將在結(jié)果后
11、面用(30)表示。 除溫度外,測定時條件的不同也可能引起結(jié)果明顯差異。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響:,最突出例子是ALP測定,用二乙醇胺為緩沖液測出ALP結(jié)果比用氨基甲基丙烷為緩沖液的高2-3倍。又如在ALT測定時,如在底物中加入磷酸吡哆醛比不加者結(jié)果可增高20-100。正因為如此,為防止臨床醫(yī)生產(chǎn)生錯覺,認為IU/L結(jié)果在國際上應一致。目前實驗室常以U/L,而不以IU/L向臨床報告。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響:,總之,臨床醫(yī)師在分析酶測定結(jié)果(U/L)
12、時應以給報告實驗室的參考值為準,盲目套用文獻結(jié)果或與其它實驗室結(jié)果相比較,有可能得到不恰當?shù)慕Y(jié)論。 前面已提到從70年代以來,隨免疫技術發(fā)展,出現(xiàn)利用酶的抗原性,通過抗原抗體反應直接測定酶的質(zhì)量。測定結(jié)果不是以U/L報告而是直接用ng/ml,g/L等報告酶蛋白含量高低。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響:,如臨床醫(yī)師看到這樣的報告,就可知道此時使用了最新的免疫學方法測酶,其臨床意義有可能與前兩種方法結(jié)果有差異。例如國外公認,同樣測CK-MB,用免疫學方法所測結(jié)果診斷價值最高,此問題將在后專門敘述。 (二)標本的采集、處理與貯存 在
13、實驗室測定酶之前,標本還要經(jīng)過采集、分離血清和貯存等一系列處理過程。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響:,而酶在血中是處于一個動態(tài)變化過程,血液離開體內(nèi)后,還會有一定變化。因此在其中任何一個階段處理不當,都有可能引起測定值變化。 采取血液標本時最容易引起實驗室誤差的是抽血不當,或者實驗室急于分離血清,因此體外溶血。由于大部分酶在細胞內(nèi)外濃度差異明顯,少量血細胞的破壞就有可能引起血清中酶明顯升高。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響:,最明顯例子是LD,紅細胞中LD約為血
14、清的100倍,這樣,只要有輕度溶血,如1/100紅細胞破壞,就足以使血清中LD升高一倍,常使原為正常的血清LD值超過參考值上限。其它如CK,雖然紅細胞中無CK,但含有豐富腺苷酸激酶(AK),進入血清能使某些用“連續(xù)監(jiān)測法”測定CK的值假性升高,紅細胞中酶的干擾,不僅表現(xiàn)在溶血影響上,采血后如不及時將血清和血凝塊分離,血細胞中酶同樣可以透過細胞膜進入血清,所以采血后1-2小時實驗室必須及時離心,分離血清。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響:,除非測定與凝血或纖溶有關的酶,一般都不采用血漿而采用血清作為測定標本。大多數(shù)抗凝劑都在一定程
15、度上影響酶活性,例如EDTA為金屬離子螯合劑,在去除Ca2+同時也去除其中Mg2+、Mn2+等離子,Mg2+是ALP、CK和5-核苷酸酶(5-NA)作用的激活劑,其它如草酸鹽、枸櫞酸鹽乃至肝素都對一些酶有一定程度抑制。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響:,有必要時,可考慮使用肝素為抗凝劑,在常用抗凝劑中它對酶影響最小的。 酶蛋白不穩(wěn)定,易失活,ACP是最明顯的一個例子。此酶在中性或堿性環(huán)境中極不穩(wěn)定,血液在37放置1小時,ACP活性可下降50。大部分酶在低溫中比較穩(wěn)定,分離血清如不能及時測定,應放冰箱保存,表(7-3)是常用酶在不
16、同溫度情況下的穩(wěn)定性。,臨床生物化學:四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響,四、測定方法、標本處理等對測定結(jié)果的影響:,從表7-3可看出25將血清凍結(jié)并沒有太大優(yōu)點,相反有些酶如ALD、ALT在融凍時被破壞。有文獻報道用液氧在195貯存血清,常用酶如ALT、AST、ALP、CK、LD、GGT和AMY,在10個月活性變化不大。個別酶如LD在低溫反而不如室溫穩(wěn)定,即所謂的“冷變性”。 表7-3 酶在不同溫度儲存的穩(wěn)定性(活性變化小于10) 酶室溫(25)冰箱(0-4)冰凍(25)ALD2天2天不穩(wěn)定ALT2天5天不穩(wěn)定AST3天1周1月ALP2-3天2-3天1月GGT2天1周1月CHE1周1周
17、1周LAP1周1周1周CK1周1周1周LD1周1-3天1-3天ICD1天2天1天AMY1月7月2月LPS1周3周3周ACP4小時¥3天3天亞鐵氧化酶I1天2周2周(銅氧化酶) 酶不耐融化; ¥ 標本未酸化; 標本加枸櫞酸到pH5。,臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,用免疫學方法測酶質(zhì)量和經(jīng)典的測酶活性方法相比,不僅靈敏度高,并可能測定一些以前不易測定的酶。但更為有意義的是:有可能為臨床上的應用提供新的資料和信息。從疾病論斷的角度來看,至少提供下列三個新的可能性: (一)酶活性和酶質(zhì)量變化的不平行 這二者的變化在不少情況下是互相平行的,但在一些情況下
18、可以出現(xiàn)不一致。,臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,早在1987年Robert就提出可以用免疫學方法直接測量CK的質(zhì)量,并聲稱:“由于RIA法是如此的敏感,并可測定血循環(huán)中無活性的CK-MB,毫不奇怪此法可比其它方法更早查出心肌梗死,一般在疼痛3小時就可升高?!贝撕笥行W者在急性心肌梗死時比較測CK-MB活性和RIA法CK-B亞單位的結(jié)果,發(fā)現(xiàn)二者之間存在著不平行關系。,臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,CK-MB活性升高持續(xù)較短,3天左右;而CK-B亞單位酶蛋白升高卻在7天左右。近幾年來發(fā)展了用免疫學
19、方法測CK-MB酶質(zhì)量(mass)方法與測酶活性(activity)方法的結(jié)果相比較,在檢測心肌壞死上,測質(zhì)量方法明顯優(yōu)于測活性方法。 國內(nèi)有人報告了用單擴法測酶活性的方法,測定了在各種患者血中超氧歧化酶(SOD)含量,證實有些患者血中存在著無活性的SOD。,臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,在一些疾病情況下,甚至出現(xiàn)二者變化完全相反的情況。例如在狗實驗性胰腺炎,用免疫學方法測彈性蛋白酶濃度,出現(xiàn)迅速而急劇地上升,但同時酶活性卻出現(xiàn)平行地下降。作者解釋在釋放酶蛋白入血同時,有大量酶抑制劑也釋放入血,以致出現(xiàn)相互矛盾結(jié)果。前面提到的用兩種方法測前列腺
20、酸性磷酸酶(PACP)來診斷前列腺癌的陽性率不一致,有作者也認為可能是腫瘤組織合成一些無活性或活性較低的酸性磷酸酶。,臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,如果說在這方面尚有爭論,那么在遺傳學方面的意義則是比較明確的,將此兩大類方法結(jié)合起來可以研究酶缺陷遺傳疾病的發(fā)生機制,用免疫學方法可以測出滅活的酶蛋白量。由于基因缺陷引起的酶缺陷如果僅僅影響酶蛋白合成下降,酶活性與酶蛋白量的比率即所謂的“免疫比活性”無變化;如果由于基因缺陷合成了變異的酶蛋白,則不僅總酶活性下降,免疫比活性也將變化;如果合成了一種活性正常但結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定的酶,則幼稚細胞中酶活性及質(zhì)量都無
21、變化,而在衰老細胞中將出現(xiàn)酶缺陷。,臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,酶穩(wěn)定性的變異常見于紅細胞內(nèi)酶缺陷癥。這是由于紅細胞壽命較長,成熟紅細胞無細胞核不能制造新蛋白質(zhì),所以酶穩(wěn)定性的缺陷容易在衰老紅細胞中表現(xiàn)出來。 在最嚴重的情況,變異的基因甚至能合成無活性的酶蛋白,如膽堿酯酶遺傳變異中,有一類型所謂“不活動等位基因”(“silent”allele)就是典型例子。,臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,又如在Lesch-Nyhau綜合征中存在這免疫活性但無催化活性的次黃嘌呤轉(zhuǎn)磷酸核糖基酶。 (二)以免疫方法
22、取代測酶活性方法 免疫學方法和經(jīng)典測酶活性方法相比最突出的優(yōu)點是:免疫學方法能測定一些不表現(xiàn)酶活性的酶蛋白質(zhì),這在以前是不能想象的。首先是各種酶原,還有去輔基酶蛋白(apoenzyme)以及一些滅活的酶蛋白裂解產(chǎn)物等等。,臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,例如已有用RIA法測胰蛋白酶原。也有用免疫學方法測定線粒體和胞質(zhì)谷草轉(zhuǎn)氨酶,這其中包括無酶活性的去輔基谷草轉(zhuǎn)氨酶。 免疫學方法另一特點是特異性高,且不受體液中其它物質(zhì),特別是抑制劑、激活劑的干擾。不少蛋白水解酶或者對基質(zhì)特異性不高,或者易受血中一些蛋白質(zhì)如1-抗胰蛋白酶、巨球蛋白的抑制作用。,臨床
23、生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,用測酶活性方法不易準確定量甚至無法測定。在近年來用免疫學方法陸續(xù)建立了RIA測胰蛋白酶、彈性蛋白酶的方法。 一般說來和測酶活性相比,免疫學方法靈敏度更高一些。一些既往由于方法學靈敏度差,不易測定的酶可以嘗試改用免疫學方法,脂肪酶是其中例子之一。經(jīng)典測酶活性方法由于靈敏度差,酶溫育時間長達24小時,幾經(jīng)修改仍需4小時,現(xiàn)已有RIA法脂肪酶試劑盒。,臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,近年來隨著優(yōu)生學發(fā)展,羊水中各種成分包括酶的測定日益受到重視。例如在Tay-Sachs綜合征時,
24、胚胎組織細胞中氨基已糖苷同工酶A或(和)B合成障礙,免疫學方法由于靈敏度高,可以比測酶活性方法早幾周在胎兒的羊水中查出此酶的缺陷。 (三)同工酶測定 免疫學方法用于測定同工酶比經(jīng)典的理化方法簡單方便,所以愈來愈多同工酶測定改用免疫學方法,國外已逐步取代電泳或?qū)游龇ā?臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,除上文已提到的CK-MB、LD1、LD5測定外,還可用免疫學方法測半乳糖?;D(zhuǎn)移酶同工酶A和B,堿性磷酸酶的Regan同工酶。同工酶有可能作為腫瘤的標記物(tumor marker),已證實-烯醇化酶或神經(jīng)元特異烯醇化酶(NSE)可作為APUD系統(tǒng)腫瘤
25、的一個很好標記物。用RIA測血中NSE在肺小細胞性腫瘤患者中陽性率超過80,-烯醇化酶在大細胞肺癌陽性率也超過70。,臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,可以預期隨科學技術發(fā)展,免疫學方法將成為臨床上測定同工酶的主要方法。 六、檢測同工酶及其亞型的臨床意義 從50年代中期開始,臨床酶學有了迅速的發(fā)展,幾乎把當時能測的酶都在臨床上試用過,企圖通過測定某一種或某幾種酶來診斷一些特定疾病或特定組織器官的病變。通過10余年廣泛的研究,發(fā)現(xiàn)酶測定診斷疾病的特異性并不高,因為機體中各種細胞的代謝有很大的相似性,從臨床角度很難說存在著所謂器官特異酶。,臨床生物化學
26、:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,當時曾有學者想找出一些腫瘤特異酶,但很快發(fā)現(xiàn)找不到一種只存在于腫瘤組織并能進入血液而正常組織又不存在的酶。 在此同時,Market等通過對LD在電泳時可分為5個區(qū)帶的深入研究,在1959年首先提出“isozyme”的術語來描述一類酶,它們催化同一生化反應,但在結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)上有所不同,目前廣泛使用國際生化協(xié)會推薦術語“isoenzyme”。,臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,我國目前多翻譯為同工酶,臨床很快將此新概念、新發(fā)現(xiàn)用于臨床,發(fā)現(xiàn)同工酶測定可以彌補上述測酶總活性的不足之處,
27、因為不同同工酶在組織分布、細胞內(nèi)定位、發(fā)生發(fā)育方面都可能有所差異,臨床可利用這些差異來增加診斷的特異性。目前不論在診斷腫瘤,還是診斷心臟、肝等疾病上都找到一些較總酶活性測定特異性、靈敏度高的同工酶測定項目,同工酶正逐步成為酶學中一個重要分支。,臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,80年代發(fā)現(xiàn)某些同工酶從組織進入體液后,進一步變化分為數(shù)個不同類型即所謂同工酶的亞型(isoform)。CK-MB的亞型MB1、MB2,CK-MM亞型MM1、MM2和MM3在AMI的診斷和溶栓療效判斷上都優(yōu)于總酶和同工酶。 同工酶是一個復雜的生物現(xiàn)象,至今在分類、概念上尚有一
28、些問題有待研究澄清。,臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,從臨床診斷角度可將同工酶理解為一個包括有多種能催化相同生化反應的酶族,在這族中雖然不同酶都催化同一反應,但在理化性質(zhì)上有差異,如它們對底物的親和性、特異性不同,對抑制劑出現(xiàn)不同的反應,所帶電荷、對耐受性有差異等等。生化學者根據(jù)這些差異用各種物理、化學方法將同工酶分離測定,從本質(zhì)上說這些差異與酶蛋白結(jié)構(gòu)有關,或者是構(gòu)成酶蛋白的氨基酸在組成或排列次序上出現(xiàn)差異,或者由于二級、三級乃至四級結(jié)構(gòu)不同而造成上述不同的理化性質(zhì),同時這些結(jié)構(gòu)差異又可引起酶蛋白抗原性的差異。,臨床生物化學:五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用,五、免疫方法測酶質(zhì)量的臨床應用:,目前正在大力發(fā)展這種用免疫方法測同工酶的技術,并取得明顯進展。 同工酶之所以有較高的診斷價值與下面一些因素有關: 首先是某些同工酶有明顯的組織分布差異,以目前臨床應用最多的CK和LD同工酶而言,
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