1、.,遺傳病的診斷,遺傳病的診斷：,植入前診斷 產(chǎn)前診斷 癥狀前診斷 現(xiàn)癥病人診斷,.,第一節(jié) 病史、癥狀和體征,一、病史 1、家族史：準(zhǔn)確性，全面性 2、婚姻史：婚齡、次數(shù)、配偶、近親 3、生育史：育齡、子女?dāng)?shù)及健康狀況、 流產(chǎn)、死產(chǎn)和早產(chǎn)史（如異常，了 解產(chǎn)傷、窒息、病毒、致畸劑等）,.,二、癥狀和體征 相同性 特異性：外貌、身體發(fā)育、體重增長(zhǎng)、 智力增進(jìn)、性發(fā)育、肌張力、 哭聲 加強(qiáng)診斷：實(shí)驗(yàn)室檢查；輔助器械檢查.,.,第二節(jié) 系譜分析,一、目的：區(qū)分遺傳方式、遺傳異質(zhì)性、 及表型相似遺傳病。 二、注意事項(xiàng)： 1、系譜的系統(tǒng)性、完整性和可靠性 a、三代以上； b、有關(guān)人員，尤其關(guān)鍵人員逐個(gè)

2、查詢； c、有否近親婚配； d、有無(wú)死胎、流產(chǎn)史； e、不合作，假情況； f、必要時(shí)實(shí)驗(yàn)室，輔助器械檢查。,.,2、延遲顯性、外顯不全不能誤認(rèn)為隱性 3、新基因突變不能誤認(rèn)為隱性 4、顯、隱性相對(duì)性 例如：HbS 臨床水平：AR 細(xì)胞水平：中間型顯性 分子水平：共顯性,.,第三節(jié) 細(xì)胞遺傳學(xué)檢查,.,細(xì)胞遺傳學(xué)檢查,.,指征：1、智能發(fā)育不全、生長(zhǎng)遲緩或伴有其 他先天畸形者； 2、夫婦之一有染色體異常； 3、家族中已發(fā)現(xiàn)染色體異?；蛳忍旎?形個(gè)體； 4、34歲以上高齡孕婦；,.,5、多發(fā)性流產(chǎn)婦女及其丈夫； 6、原發(fā)閉經(jīng)和男女性不孕癥者； 7、兩性內(nèi)外生殖器畸形者,.,第四節(jié) 基因產(chǎn)物分析,酶

3、和蛋白質(zhì)的分析,.,上海：19811987年對(duì)284,396名新生兒進(jìn)行PKU篩查，查出PKU患兒15名，高苯丙氨酸血癥4名。,生物化學(xué)檢查,.,第五節(jié) 基因診斷,基因診斷的優(yōu)點(diǎn) 不受細(xì)胞類型限制，不考慮基因表達(dá)與否；而生化檢查 必須在基因表達(dá)后方可實(shí)行。 概念,即利用DNA重組技術(shù)在分子水平上檢測(cè)人類遺傳病的基因缺陷以診斷遺傳病,.,一 基因診斷的原理,核酸分子雜交：互補(bǔ)核酸序列可在一定 條件下特異結(jié)合成雙鏈。 必要條件：特異探針 一、基因探針： 目的基因互補(bǔ)序列 探針來(lái)源：基因組探針 逆轉(zhuǎn)錄cDNA探針 人工合成寡核苷酸探針,.,Southern印跡雜交,二 常用基因診斷技術(shù),.,RFLP

4、連鎖分析,.,ASO斑點(diǎn)雜交,1986年，胡流清等基于點(diǎn)突變?cè)?，用寡核苷酸探針進(jìn)行基因診斷。,.,PCR 變性（92-95；1） 復(fù)性（40-60；1） 延伸（72；1.5）,.,單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析（SSCP） 堿 基微小差異DNA構(gòu)象差異 電泳遷移率差異靈敏檢出突變,1：正常人 2,4,5：純合體患者 3：雜合體(2的弟弟) 左為泳動(dòng)變位模式：a 正常人；b 純合體患者,.,遺傳病的治療,一、手術(shù)療法：切除、修補(bǔ) 替換病損組織或器官 二、藥物療法：補(bǔ)其所缺 去其所余,.,羊水中甲基丙二酸含量增高，胎兒可能患甲基丙二酸癥，會(huì)引起新生兒發(fā)育遲緩和酸中毒，應(yīng)在出生前和出生后給母體和患兒注射大量V

5、B12。,藥物治療,出生前治療,.,患兒甲狀腺功能低下，應(yīng)給予甲狀腺素終生服用，以防患兒智能和體格發(fā)育障礙。,癥狀前治療,藥物治療,.,三、飲食療法 四、基因治療,基因治療（gene therapy）是指將外源正?；?qū)氚屑?xì)胞，以糾正或補(bǔ)償因基因缺陷和異常引起的疾病，以達(dá)到治療目的。,禁其所忌,.,體細(xì)胞基因治療：使患者癥狀消失或得到緩解，但有害基因仍能傳給后代。,基因治療的基本方式,.,生殖細(xì)胞基因治療：可根治遺傳病，使有害基因不再在人群中散布。,體細(xì)胞基因治療：使患者癥狀消失或得到緩解，但有害基因仍能傳給后代。,基因治療的基本方式,.,基因置換（gene replacement）,基因修

6、正（gene correction）,基因修飾（gene augmentation）又稱基因添加,基因失活（gene inactivation）,策略,.,“自殺基因” 療法,.,“自殺基因” 療法,.,“自殺基因” 療法,.,“自殺基因” 療法,.,目的基因的轉(zhuǎn)移方法,物理方法,化學(xué)方法,膜融合法,受體載體轉(zhuǎn)移法,同源重組法(homologous recombination),病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)移法,.,反轉(zhuǎn)錄病毒載體,DNA病毒介導(dǎo)載體：DNA病毒包括腺病毒、SV40、牛乳頭瘤病毒、皰疹病毒等,最常用于人類的是莫洛尼（Mooney）鼠白血病病毒（murine leukemia virus;Mo-M

7、LV）,.,地方倫理小組,地方生物 安全小組,FDA,考慮治療程序的特點(diǎn)， 用于基因轉(zhuǎn)移的生物制品的 產(chǎn)品質(zhì)量控制和鑒定,考慮治療方案對(duì)受治患 者和大眾的安全性，對(duì)患者 預(yù)期療效和潛在危險(xiǎn)相比較,臨床基因治療方案,基因治療的臨床應(yīng)用,.,基因治療的臨床應(yīng)用,Ashanti de Silva,Ashanti was the first patient to be treated with gene therapy.,Injections repeated 7 times in first 10.5 months,.,基因治療的臨床應(yīng)用,乙型血友病,薛京倫 (復(fù)旦大學(xué)),反轉(zhuǎn)錄病毒載體 1991, 皮膚成纖維細(xì)胞,.,導(dǎo)入基因的持續(xù)表達(dá),導(dǎo)入基因的高效表達(dá) 安全性問(wèn)題,存在的問(wèn)題及解決方法,.,思考