1、.,1,乙肝五項(xiàng),.,2,目錄,1. 乙肝的定義及傳播途徑 2. 乙肝五項(xiàng)的具體內(nèi)容 3.乙肝五項(xiàng)的檢測方法及原理 4.乙肝五項(xiàng)各項(xiàng)指標(biāo)詳解 5.乙肝五項(xiàng)不同結(jié)果的意義,.,3,一、乙肝的定義： 慢性乙型肝炎（簡稱乙肝）是指乙肝病毒檢測為陽性，病程超過半年或發(fā)病日期不明確而臨床有慢性肝炎表現(xiàn)者。 臨床表現(xiàn)為乏力、畏食、惡心、腹脹、肝區(qū)疼痛等癥狀。 肝大，質(zhì)地為中等硬度，有輕壓痛。 病情重者可伴有慢性肝病面容、蜘蛛痣、肝掌、脾大，肝功能可異?；虺掷m(xù)異常。 根據(jù)臨床表現(xiàn)分為輕度、中度和重度。,.,4,乙肝的傳播途徑, 血液傳播：主要包括輸血及血制品、注射器針頭及針炙、牙科及手術(shù)器械等醫(yī)療行為， 紋

2、身、紋眉、穿耳眼、做雙眼皮、刮面等具有損傷性的美容行為。, 母嬰傳播：指攜帶乙肝病毒的母親在懷孕期、分娩期、哺乳期將乙肝病毒傳播給嬰兒 的一種方式。, 密切接觸傳播：家庭日常生活可造成傳播的情況主要有：HBsAg陽性人的創(chuàng)傷出血、 月經(jīng)血、痔瘡血污染家庭環(huán)境；與HBsAg陽性人共用牙刷、口杯、毛巾和剃刀； HBsAg陽性人同乳幼兒密切接觸，尤其是口喂小兒。, 性接觸傳播：男女性生活可通過精液、陰道分泌液傳播乙肝病毒。,.,5,乙肝五項(xiàng)的概念,乙肝五項(xiàng)也稱為乙肝兩對半，包括乙肝表面抗原（用HBSAg表示）、乙肝表面抗體（用抗-HBS表示）、e抗原（用HBeAg表示）、e抗體（用抗-HBe表示）、

3、核心抗體（用抗-HBc表示）。乙肝五項(xiàng)檢查，便是抽出患者靜脈血，檢測血液中乙肝病毒的血清學(xué)標(biāo)志。,.,6,金標(biāo)法 金標(biāo)法乙肝兩對半快速檢測板是采用層析法檢測乙肝病毒五項(xiàng)血清學(xué)標(biāo)志HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。 酶免法（ELISA法） ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑：固相的抗原或抗體，酶標(biāo)記的抗原或抗體，酶作用的底物。 HBsAg、 HBeAg檢測試紙條采用雙抗體夾心法測抗原； HBsAb檢測試紙條采用雙抗原夾心法； HBeAb、HBcAb此兩項(xiàng)在檢測試紙條上采用了競爭抑制法。由于e抗原較核心抗原僅多29個氨基酸，e抗原

4、很容易轉(zhuǎn)變成核心抗原，因此HBcAb和HBeAb的測定均采用競爭法,乙肝五項(xiàng)的檢測方法及原理,.,7,ELISA法在臨床實(shí)驗(yàn)室已得到普遍應(yīng)用，特別是用于各種肝炎 標(biāo)志物的檢測，但ELISA法需時較長,其主要原因是由于液相中的抗原（抗 體）需經(jīng)擴(kuò)散才能與固相上的抗原或抗體反應(yīng)。但作為基層醫(yī)療單位、急 診病人和手術(shù)前的應(yīng)急的單個標(biāo)本檢測，包括現(xiàn)在的血站的流動采血點(diǎn)獻(xiàn) 血員的快速篩檢是根本無法用ELISA法來實(shí)現(xiàn)的。20世紀(jì)70年代初，F(xiàn)ANKL 等建立了免疫膠體金技術(shù)，開始作為一種免疫標(biāo)記技術(shù)而被使用，隨后逐 漸廣泛應(yīng)用于免疫檢測技術(shù)。各種金標(biāo)檢測條，檢測卡已被廣泛使用。相 對而言，ELISA法檢

5、測準(zhǔn)確性要高于金標(biāo)法， 金標(biāo)法檢測限為1ng/ml,ELISA 法靈敏度為0.5ng/ml，國產(chǎn)ELISA法試劑最高靈敏度可達(dá) 0.1ng/ml。故在 實(shí)際應(yīng)用中，根據(jù)實(shí)際情況兩種方法聯(lián)合起來，特別是 在大批量檢測時可 用金標(biāo)法作為初篩，這樣可大量節(jié)約時間，更快速、準(zhǔn)確為病人服務(wù)。,.,8,（1）將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體：洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。 （2）加受檢標(biāo)本：使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時間，讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合，形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。 （3）加酶標(biāo)抗體：使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時固相載

6、體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)。 （4）加底物：夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量。 根據(jù)同樣原理，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物，即可用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中的抗體。,.,9,雙位點(diǎn)一步法即在雙抗體夾心法基礎(chǔ)上使用針對抗原分子上兩個不同表位的單克隆抗體，分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體。測定時將待檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體同時加入進(jìn)行反應(yīng)，兩種抗體互不干擾，經(jīng)一次溫育和洗滌后，即可加入底物進(jìn)行顯色測定。 鉤狀效應(yīng)：雙位點(diǎn)一步法中，如果待檢測標(biāo)本中抗原濃度過高，過量抗原則會分別與固相抗體和酶標(biāo)抗體結(jié)合，而不再形成夾心復(fù)合物，類似于沉淀反應(yīng)中

7、抗原過剩的后帶現(xiàn)象，所得結(jié)果將低于實(shí)際的含量，這種現(xiàn)象稱之為鉤狀效應(yīng)。,.,10,固相抗體,底物,競爭法可用于測定抗原，也可用于測定抗體。以測定抗原為例，酶標(biāo)抗原和待測抗原對固相特異性抗體具有相同的結(jié)合力，因此兩者競爭結(jié)合固相特異性抗體。反應(yīng)體系中，固相抗體和酶標(biāo)抗原是固定限量，且前者的結(jié)合位點(diǎn)少于酶標(biāo)和非酶標(biāo)抗原的分子數(shù)量和。免疫反應(yīng)后，結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與標(biāo)本中待檢抗原含量成反比。待檢抗原量越多，相應(yīng)的結(jié)合特異性抗體越多，而酶標(biāo)抗原和固相抗體結(jié)合越少，底物顯色反應(yīng)淺；反之則顯色越深，即底物顯色與待檢標(biāo)本中抗原含量成反比。,.,11,間接法檢測抗體最常用的方法，其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體

8、以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。即將已知抗原吸附于固相載體上。待檢標(biāo)本中相應(yīng)抗體與之結(jié)合，形成固相抗原-抗體復(fù)合物，再用酶標(biāo)二抗與固相免疫復(fù)合物中的抗體結(jié)合，形成固相抗原-抗體-酶標(biāo)二抗復(fù)合物，根據(jù)加底物后的顯色程度確定待檢抗體含量。,.,12,捕獲法的原理是將抗人IgM抗體（抗人IgM鏈抗體）吸附于固相載體上，待檢標(biāo)本中的IgM類抗體多被固相抗體捕獲。加入特異抗原與固相抗體捕獲的IgM抗體結(jié)合，再加入抗原特異的酶標(biāo)抗體，形成固相抗人IgM-IgM-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。最后根據(jù)加底物后的顯色程度確定待檢IgM抗體的含量。固相捕獲法主要用于血清中IgM類抗體的測定。,.,13,1、

9、HBsAg(乙肝表面抗原) 它是乙肝病毒的外殼物質(zhì)，本身沒有傳染性。它的陽性往往提示有完整的病毒顆粒存在。 2、抗一HBs(乙肝表面抗體，HbsAb) 它是HBV自然感染人恢復(fù)期出現(xiàn)的抗體，此時HBsAg自然消失了。它的存在提示人對乙肝有了抵抗力，不會再得乙型肝炎了。我國有27.42%的人口有此抗體。 3 、HBeAg(乙型肝炎e抗原) 它產(chǎn)生于病毒內(nèi)部，可分泌血液中，e抗原陽性提示病毒有活動，乙肝病毒復(fù)制速度很快，而且是具有傳染性的指標(biāo)。 4 、抗HBe(乙肝e抗體，HBeAb) 是人體針對e抗原產(chǎn)生的一種蛋白物質(zhì)，陽性結(jié)果提示病毒的傳染性變?nèi)?，病情已處于恢?fù)階段。但另一種情況可能是乙肝病毒

10、發(fā)生了變異，此時血清中無HBeAg，但可產(chǎn)生抗一HBe，出現(xiàn)這種情況就需要查HBVDNA來判定是否還有病毒存在。 5 、抗一HBc(乙肝核心抗體，HbcAb) 這種抗體分IgM和lgG兩種：抗HBcIgM陽性提示病毒活動，有傳染性;抗HBcIgG陽性提示為以往感染，無傳染性，不需抗病毒治療。 6.乙肝前S1抗原是病毒復(fù)制的另一個指標(biāo)，人體感染乙型肝炎病毒后，最早的免疫應(yīng)答就是針對前S1抗原的。由于前S1抗原的出現(xiàn)在HBV感染的最早期，因而可以起到早期診斷的作用 其他，HBVDNA是病毒的遺傳基因，存在于病毒的核心部位，它的陽性和HBeAg陽性意義基本是一致的。因此，公認(rèn)的抗病毒治療是否有效，主

11、要是以HBeAg和HBVDNA的陰轉(zhuǎn)或定量的明顯減少為指標(biāo)。,乙肝五項(xiàng)指標(biāo)詳解,.,14,乙肝五項(xiàng)單項(xiàng)指標(biāo)陽性意義,.,15,乙肝五項(xiàng)結(jié)果32種模式分析表（ 9 種常見模式出現(xiàn)率 1% 40%),.,16,1、“大三陽”見于以下幾種可能：慢性乙型肝炎，常見乏力、食欲差等癥狀；乙肝病毒耐受期攜帶者，無明顯癥狀，肝功和B超檢查均正常；急性乙型肝炎早期；乙肝肝硬化，見于少數(shù)病毒仍活躍復(fù)制的肝硬化患者。2、“小三陽”見于以下幾種情況：乙肝病毒感染者經(jīng)歷無癥狀免疫清除后，進(jìn)入了病毒殘留期，形成乙肝病毒“小三陽”攜帶者；乙肝患者經(jīng)過一次或多次發(fā)作后，由“大三陽”轉(zhuǎn)化為“小三陽”，肝功恢復(fù)正常，病毒復(fù)制也漸

12、趨停止，血液中查不到病毒HBVDNA，屬于慢肝恢復(fù)或穩(wěn)定階段；乙肝病毒在人體免疫作用的壓力下發(fā)生變異，變異后的病毒e抗原不能被檢出，而血清中抗HBe陽性，這種患者雖然表現(xiàn)為“小三陽”，肝功能仍然不正常，HBVDNA(+)，病情大多繼續(xù)進(jìn)展?？赡苁荂HB，也可能有少數(shù)患者已成為肝纖維化或早期肝硬化。絕大多數(shù)乙肝患者及相當(dāng)一部分醫(yī)務(wù)工作者以乙肝兩對半檢查結(jié)果“大三陽”、“小三陽”等來判斷乙肝病情的輕重，并且視“三陽”是否轉(zhuǎn)陰為療效好壞的惟一指標(biāo)，這是極其錯誤的。 無論是“大三陽”還是“小三陽”，都不能說明或判斷乙肝病情的輕重，只能說明體內(nèi)攜帶乙肝病毒，還有病毒的復(fù)制情況，不能說明病毒的嚴(yán)重性，也不

13、能代表肝病到了什么程度或體現(xiàn)療效的好壞。判斷和劃分乙肝病情輕重的條件和依據(jù)是系統(tǒng)的肝功能檢測結(jié)果。,.,17,3、HBVDNA在乙肝病程中的意義；臨床檢查HBvDNA定量，如檢驗(yàn)結(jié)果小于3.010的三次方即為陰性，或用(-)來表示，有的檢驗(yàn)報(bào)告用“0”來表示；如大于3.010的三次方即為陽性，或用(+)來表示。HBVDNA是乙肝病毒核心中的基因片段，血液檢查中如HBVDNA(+)，說明病毒在大量復(fù)制，傳染性強(qiáng)。在慢性無癥狀HBv攜帶者患者中雖然HBVDNA(+)，同時又是“大三陽”，但并不能說明病情重，因?yàn)樵诓《灸褪茈A段，機(jī)體沒有免疫應(yīng)答，肝細(xì)胞無壞死現(xiàn)象。在CHB患者中，如HBV-DNA(+

14、)就說明病情仍有繼續(xù)發(fā)展的可能，或存在肝細(xì)胞壞死，檢查肝功能異常；如經(jīng)治療，HBVDNA轉(zhuǎn)為(-)，則是病情好轉(zhuǎn)的標(biāo)志，可能病情長期穩(wěn)定，不發(fā)展。但是也有少部分患者可由(-)再轉(zhuǎn)為(+)，出現(xiàn)病情反復(fù)。治療CHB用抗病毒藥可以使患者的HBvDNA指數(shù)下降，它是臨床治療有效的標(biāo)志?？傊?，HBvDNA持續(xù)保持(-)是理想的療效。肝硬化的患者如HBvDNA長期保持(-)，病情可能不會再發(fā)展。,.,18,.,19,.,20,乙肝五項(xiàng)檢查有很多結(jié)果，正常的結(jié)果有以下三種： 一、乙肝五項(xiàng)全部陰性 說明沒有感染乙肝病毒，所以這種檢查結(jié)果是正常的。但是需要注意的是，此種人，體內(nèi)沒有保護(hù)性抗體的存在，需要及時注

15、射乙肝疫苗的，要按照0.1.6的原則進(jìn)行注射。 二、乙肝表面抗體陽性，其余為陰性 出現(xiàn)這種情況代表檢查是正常的。乙肝表面抗體陽性表示以往有過乙肝病毒感染的歷史，機(jī)體產(chǎn)生了一定的免疫力;或者接種乙肝疫苗或打過表面抗體免疫球蛋白;或者對HBV感染產(chǎn)生特異性免疫。 三、乙肝表面抗體陽性、乙肝核心抗體陽性，其余為陰性 這說明是接種了乙肝疫苗后，或是乙肝病毒感染后已康復(fù)的結(jié)果，已有免疫能力。這種檢查結(jié)果也是正常的。,.,21,定量檢測乙肝五項(xiàng)臨床意義,(1) 可以提高檢出靈敏度，可以縮短檢出窗口期，避免漏檢； (2) 動態(tài)觀察療效和監(jiān)測乙肝病情進(jìn)展； (3) 動態(tài)監(jiān)測分析HBSAg和HBsAb濃度的變化，可以預(yù)見急性乙肝是不是處在恢復(fù)期； (4) 提高乙肝核心抗體（HBcAb）的檢出率，HBcAb濃度的高低能夠反映病毒感染的狀況，同時單純HBcAb陽性不能排除乙肝感染； (5) 對健康檢查而言，定量檢查乙肝表面抗體可以判斷是否免疫成功或正具有中和HBV的免疫力，對乙肝的預(yù)防起到監(jiān)督作用。HBsAb的含量在10 mIU/ml以上的患者在用酶法檢測查就可呈HBsAb陽性結(jié)果，但并不提示機(jī)體都一