1、.,1,兒科醫(yī)院外科,腎母細胞瘤的病因及 實驗治療研究,.,2,概述,1814年 Rance 1899年 Max Wilms（Wilms tumor) 腎混合瘤（mixed tumor of the kidney) 腎胚胎瘤（embryoma of the kidney） 腎母細胞瘤（nephroblastoma）,.,3,病因研究,遺傳和環(huán)境,胚胎發(fā)育,基因改變,實驗治療研究,基因治療,免疫治療,.,4,遺傳和環(huán)境因素的影響,.,5,發(fā)病率 56 發(fā)病與性別、人種 發(fā)病年齡 38個月 發(fā)病的家族傾向性 2.4 伴發(fā)畸形及綜合征 1326 (Denys-Drash, WAGR, Beckwit

2、h- Wiedemann),遺傳和環(huán)境,.,6,印跡的作用,基因的活性來自于父母 印跡的缺失和腎母細胞瘤 正常情況下失活的母方等位基因的激活 IGF2 正常情況下有活性的母方等位基因的失活 H19 H19基因上游的差異性甲基化位點的異常甲基化,遺傳和環(huán)境,.,7,環(huán)境因素包括物理、化學(xué)、生物及生活習(xí)慣 父母職業(yè)，接觸殺蟲劑 母親分娩時采用甲氧氟烷吸入麻醉，母親孕前使用過染發(fā)劑 HIV，猿猴病毒（V40），髓母細胞瘤相關(guān)病毒（MAV）,遺傳和環(huán)境,.,8,胚胎發(fā)育學(xué)說,.,9,胚胎發(fā)育,腎源性剩余： 成熟腎組織中的未成熟腎源性成分 發(fā)生率 ，組織學(xué)觀察，WT1突變和LOH 腎源性剩余的演變： 靜

3、止、成熟、退化、增生和形成腫瘤,？胚胎腎的分化異常,.,10,端粒和端粒酶的活性在腫瘤發(fā)生過程中的作用 Wnt通路的激活與腎母細胞瘤的關(guān)系,胚胎發(fā)育,.,11,基因的改變,.,12,基因改變,WAGR綜合征11p13缺失WT1 1015的散發(fā)型腎母細胞瘤中有WT1改變 WT1蛋白是轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，抑制增殖因子的表達 Ohta S WT1第8、9號外顯子的突變 9 388編碼區(qū) Phe-Cys 398編碼區(qū) Pro-Leu Liu JJ WT1四種mRNA變異體產(chǎn)物失調(diào),WT1,.,13,WT2,基因改變,Beckwith-Wiedmann綜合征11p15WT2 11p15區(qū)域存在有一大型的印跡區(qū)

4、域（Domain） H19/IGF2：IGF2mRNA；H19甲基化；連動開 關(guān)現(xiàn)象 KCNQ1：Xin Z 存在于WT2的關(guān)鍵基因區(qū)內(nèi)，與IGF2起協(xié)同作用,.,14,WT3及其他,基因改變,16q23.2-24.2缺失微衛(wèi)星不穩(wěn)定性WT3 1p,4p,7p,14p,17q,18q p53突變與間變型腎母細胞瘤 家族易感性有關(guān)基因： 11p13(WT1),17q12-21(FWT1),19q13(FWT2),.,15,基因治療,免疫治療,實驗治療研究,.,16,基因治療,概念：將外源性基因轉(zhuǎn)入宿主或瘤體內(nèi)，表 達基因產(chǎn)物，從而達到治療腫瘤的目的 細胞水平，分子水平的治療方法 針對性強，殺滅腫

5、瘤細胞的同時不損傷正常 細胞 包括突變代償和分子化療,.,17,基因治療,概念：利用基因治療技術(shù)修正癌細胞內(nèi)引起癌變的分子損傷 WT1代償：把含有WT1的染色體片段導(dǎo)入WT1缺失的 腎母細胞瘤細胞株 p53代償：將含有野生型p53基因的腺病毒載體，轉(zhuǎn) 導(dǎo)入間變型腎母細胞瘤株（RM1） 甲基化缺失的糾正：扭轉(zhuǎn)IGF2/H19的作用機制，阻 斷印跡的作用,突變代償,.,18,概念：在癌細胞內(nèi)特定地表達毒性基因以消滅癌細胞，以及通過對造血干細胞轉(zhuǎn)導(dǎo)保護基因以增強對傳統(tǒng)化療的耐受 毒性基因系統(tǒng)：腺苷酸脫氨酶/5-flurocytosine， 在腎母細胞瘤的動物模型的治療實驗中獲得成功 多藥耐藥基因系統(tǒng)

6、：將基因轉(zhuǎn)導(dǎo)入骨髓造血干細胞， 增加機體對化療的耐受，加大化療劑量,基因治療,分子化療,.,19,免疫治療,免疫監(jiān)視：60年代末 Burnet和Thomas 免疫應(yīng)答: 實驗?zāi)[瘤學(xué)和腫瘤臨床免疫學(xué) 生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑（BRM）：能夠直接或間接地修飾宿主和腫瘤的相互關(guān)系從而改變宿主對腫瘤細胞的生物學(xué)應(yīng)答，使有利于宿主，不利于腫瘤而產(chǎn)生治療效應(yīng)的物質(zhì)或措施,.,20,免疫治療,提高宿主的細胞免疫功能：含有H2Db配體的WT1多肽（Db126）CTLs殺傷作用；Db-126免疫小鼠，使移植鼠獲得長期生存 各類細胞因子：白介素，GMCSF，TNF，干擾素，B7，募集炎癥和淋巴細胞，殺滅微小殘留灶,.,21,血管生成抑制因子：以血管生成各個環(huán)節(jié)為靶點的血管生成抑制劑，將成為腫瘤防治的另一途徑。 阻遏VEGF的血管抑制劑能抑制鼠模型的腎母細胞瘤的生 長和轉(zhuǎn)移； TIMPs能抑制金屬蛋白酶的活性，減少細胞外