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1、G顯帶染色體核型分析,實(shí)驗(yàn)三,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?觀察G顯帶染色體的形態(tài)結(jié)構(gòu),掌握各號(hào)染色體G顯帶特征。 掌握G顯帶核型分析方法。,二、實(shí)驗(yàn)原理,人類(lèi)染色體標(biāo)本經(jīng)過(guò)G顯帶處理后,在每條染色體上可顯示出深淺相間的條紋,而且有較為恒定的G帶帶紋特征。觀察及分析G帶染色體,可較為準(zhǔn)確的識(shí)別每條染色體,并可發(fā)現(xiàn)染色體上較細(xì)微的結(jié)構(gòu)畸變,從而提高染色體核型分析的準(zhǔn)確性。通常染色體長(zhǎng)臂和短臂上被Giemsa染液深染者稱(chēng)為深帶,淺染或未被染色者稱(chēng)為淺帶。在描述每一條染色體上的帶時(shí),根據(jù)帶紋距離著絲粒的遠(yuǎn)近,常使用臂的近端(近側(cè)段)、中部(中段)、遠(yuǎn)端(遠(yuǎn)側(cè)段)、末端等名稱(chēng)。,三、實(shí)驗(yàn)用品,1、器械:光學(xué)顯微鏡、擦
2、鏡紙。 2、試劑:乙酸乙酯、香柏油。 3、材料:正常人染色體G顯帶標(biāo)本,三、實(shí)驗(yàn)的方法與步驟,低倍鏡下尋找分散良好染色體,油鏡下仔細(xì)觀察分析染色體,先計(jì)數(shù)染色體總數(shù),描繪染色體線條圖,標(biāo)明染色體的組別,注明染色體號(hào)及核型,1,1,2,2,第3號(hào)染色體:兩臂近似對(duì)稱(chēng),形似“蝴蝶”為該染色體的獨(dú)有特征,著絲粒及附近區(qū)段的著色相當(dāng)深。短臂的近側(cè)部可見(jiàn)二條深帶,遠(yuǎn)側(cè)部可見(jiàn)三條深帶,且中間的一條著色更深,而近端部的一條帶較窄,著色也淺,這是鑒別第3號(hào)染色體的主要特征。長(zhǎng)臂的近側(cè)部和遠(yuǎn)側(cè)部一般各有一條較寬的深帶。在優(yōu)良的標(biāo)本上,近側(cè)部的深帶可劃分為2個(gè)區(qū)。長(zhǎng)臂2區(qū)4帶2區(qū)6帶的寬度明顯大于短臂2區(qū)2帶2區(qū)
3、4帶,這是鑒別長(zhǎng)臂與短臂之又一重要特征。,第1號(hào)染色體:短臂的近側(cè)部一半有二個(gè)深帶,但中部的深帶較寬,在處理較好的標(biāo)本上,遠(yuǎn)側(cè)段可見(jiàn)34條淺染的深帶。長(zhǎng)臂的次縊痕緊貼著絲粒,著色甚深。且是多態(tài)性的。近側(cè)部為一窄的淺帶,中段和遠(yuǎn)側(cè)段各有二條深帶。 短臂遠(yuǎn)側(cè)的一半幾乎為淺染區(qū);其二是深染的次縊痕位于長(zhǎng)臂且緊靠著絲粒。,第2號(hào)染色體:短臂可見(jiàn)4條深帶,中段的兩條深帶稍靠近些,;長(zhǎng)臂可見(jiàn)47條帶,接近著絲粒的1/3區(qū)段的著色甚淺,其余的遠(yuǎn)側(cè)區(qū)段上,帶紋分布較均勻,。,A組,第4號(hào)染色體:它比第5染色體著色更均勻,且著色更深。短臂上只有一個(gè)區(qū),其上有12條深帶;長(zhǎng)臂可見(jiàn)均勻分布的4條深帶,質(zhì)量?jī)?yōu)良的標(biāo)本
4、中,近中段的二條帶又各劃分為二條深帶。,第5號(hào)染色體:短臂上大多呈現(xiàn)一條深帶,此臂也為1個(gè)區(qū);長(zhǎng)臂的近側(cè)部為一深帶,中段可見(jiàn)三條深帶,遠(yuǎn)側(cè)部可見(jiàn)12條深帶,其中末端的一條深帶著色更濃。 區(qū)別B組中的這二對(duì)染色體并不十分困難。鑒別的要點(diǎn)是:第4染色體長(zhǎng)臂上的深帶分布得比第5染色體均勻;在顯帶不太好的情況下,第4染色體的q12帶始終是明顯的,而第5染色體的q13帶一般并不顯現(xiàn);有時(shí)第5染色體的3區(qū)4帶很明顯,而第4染色體的3區(qū)2帶和4帶卻不顯現(xiàn)。,B組,第6號(hào)染色體:短臂近側(cè)部有一著色淺的寬帶,這一寬帶的遠(yuǎn)側(cè)部為一著色深的帶,而其近側(cè)部也為一深帶,它緊靠著絲粒。在較好的標(biāo)本上,遠(yuǎn)側(cè)部深帶又可分成二
5、個(gè)帶。長(zhǎng)臂可有56條深帶,近側(cè)的一條緊貼著絲粒。遠(yuǎn)側(cè)末端的一條深帶窄而且著色較淺。該染色體兩個(gè)臂的近著絲粒區(qū)和整個(gè)長(zhǎng)臂(除端粒以外),著色均很深。,第7號(hào)染色體:著絲粒染色甚深。短臂上有23條深帶,處于中部的那條帶通常著色很淺,有時(shí)不明顯,遠(yuǎn)側(cè)端的那條帶著色很深,宛如“并蓋”,為一末端帶。這一特征對(duì)于鑒別7染色體最有價(jià)值。長(zhǎng)臂可見(jiàn)三條明顯的深帶,近側(cè)部和中部的二條帶著色深,帶型也較寬。,第8號(hào)染色體:外形使人感到它的帶紋較為模糊。短臂上一般可見(jiàn)到二條著色較深的帶而遠(yuǎn)側(cè)部的2區(qū)2帶比近側(cè)部的1區(qū)2帶著色較深些,這恰好與第10染色體短臂上出現(xiàn)二條帶的情形相反。長(zhǎng)臂上幾條深帶的界限不清楚,一般為34
6、條,近側(cè)部的深帶即便出現(xiàn),著色也是不深的;可是遠(yuǎn)側(cè)部的深帶(2區(qū)3帶)則始終是引人注目的,第9號(hào)染色體:其外形奇特,著絲粒深染。短臂可見(jiàn)二條深帶,有時(shí)它們?nèi)诤蠟橐粭l較寬的帶。長(zhǎng)臂上有二條明顯的深帶,次縊痕通常不著色且往往是多態(tài)性的;在有些標(biāo)本上呈現(xiàn)出特有的狹長(zhǎng)而扭曲的“頸部區(qū)”。,第10號(hào)染色體:著絲粒著色深。短臂上大多不現(xiàn)明顯的深帶;在較好的標(biāo)本上,在短臂上可現(xiàn)二條深帶,但遠(yuǎn)側(cè)部的那條帶(1區(qū)4帶)比近側(cè)部的帶(1區(qū)2帶)著色要淺。此臂只有一個(gè)區(qū);長(zhǎng)臂上有明顯的三條深帶;與第8染色體不同,近側(cè)部的深帶(2區(qū)1帶)著色更深些;另二條深帶較為靠近。這些是使它與第8染色體相區(qū)別的另一些特征。,第1
7、1號(hào)染色體:它與第12染色體甚相似,著絲粒均為深染。短臂的近中部可見(jiàn)二條深帶(有時(shí)融合為一條),著絲粒指數(shù)明顯大于第12染色體。長(zhǎng)臂的近中部有二條深帶,在近側(cè)部的深帶與著絲粒之間為一相當(dāng)寬大的淺帶,它比第12染色體上相應(yīng)的淺帶要寬得多。在較好的標(biāo)本上,在遠(yuǎn)側(cè)端尚可見(jiàn)到一條著色淺的帶。,第12號(hào)染色體:從外表看,這一對(duì)染色體似乎比第11染色體埸寬闊些,但著絲粒指數(shù)則是C組染色體中最低的。短臂中部一般僅見(jiàn)一條深帶,長(zhǎng)臂上大多可見(jiàn)到三條深帶,中間的一條帶最寬,系界標(biāo)(2區(qū)1帶),這三條深色區(qū)明顯大于第11染色體的相應(yīng)區(qū)段。這是區(qū)別這兩對(duì)染色體的又一重要特征。如果標(biāo)本質(zhì)量較好,在遠(yuǎn)側(cè)部尚可見(jiàn)到12條著
8、色較淡的淺帶。此臂分為二個(gè)區(qū)。,第13號(hào)染色體:短臂和隨體均為深染色。長(zhǎng)臂的大部分為陽(yáng)性染色,一般可見(jiàn)四條深帶,第1和第4條深帶較窄,色亦較淡;第2條深帶最寬,第3條次之;有時(shí)第2、3和4帶融合在一起。,第14號(hào)染色體:著絲粒染色深,但短臂為陰性染色;長(zhǎng)臂也可見(jiàn)四條深帶,而近側(cè)部的第2帶和遠(yuǎn)側(cè)部的第4帶特別明顯,這二者之間為一著色較淺的帶;在較差的標(biāo)本上,通常只顯現(xiàn)二個(gè)明顯的深帶,,第15號(hào)染色體:與第13染色體一樣,著絲粒和短臂均為深染。長(zhǎng)臂近側(cè)部1/2處有一著色甚深的寬帶。近側(cè)部可有另一較狹的深帶。在幾乎接近末端處往往有一著色不很深的帶。,正常人女性G顯帶核型分析:46,XX,人類(lèi)染色體G帶歌謠,一禿二蛇三蝶飄,四像鞭炮五黑腰;六號(hào)像個(gè)小白臉,七蓋八下九苗條;十號(hào)長(zhǎng)臂近帶好,十一低來(lái)十二高;十三、四、五一二一,十六長(zhǎng)臂縊痕大;十七
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