實(shí)驗(yàn)動物的給藥方法_第1頁
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文檔簡介

1、.實(shí)驗(yàn)動物的給藥方法在動物實(shí)驗(yàn)中,為了觀察藥物對機(jī)體功能、代謝及形態(tài)引起的變化,常需要將藥物注入動物體內(nèi)。給藥的途徑和方法多種多樣,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)動物種類和藥物劑型、劑量等情況確定。(一)注射給藥法1. 皮下注射注射時用左手拇指及食指輕輕捏起皮膚,右手持注射器將針頭刺入,固定后即可進(jìn)行注射。小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或側(cè)下腹部;豚鼠在后大腿內(nèi)側(cè)、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注射;蛙可在脊背部淋巴囊注射;狗多在大腿外側(cè)注射,拔針時,輕按針孔片刻,防藥液逸出。2. 皮內(nèi)注射此法用于觀察皮膚血管的通透性變化或觀察皮內(nèi)反應(yīng)。 如將一定量的放射性同位素溶液、顏料或致炎物質(zhì)、藥物等注入

2、皮內(nèi),觀察其消失速度和局部血液循環(huán)變化,作為皮膚血管通透性觀察指標(biāo)之一。方法是:將動物注射部位的毛剪去,消毒后,用皮試針頭緊貼皮膚皮層刺入皮內(nèi),然后使針頭向上挑起并再稍刺入,即可注射藥液。注射后可見皮膚表面鼓起一白色小皮丘。3. 肌肉注射當(dāng)給動物注射不溶于水而混懸于油或其他溶劑中的藥物時,常采用肌肉注射。肌肉注射一般選用肌肉發(fā)達(dá)、無大血管經(jīng)過的部位,多選臀部。注射時針頭要垂直快速刺入肌肉,如無回血現(xiàn)象即可注射。給大、小鼠作肌肉注射時,選大腿外側(cè)肌肉進(jìn)行注射。4. 腹腔注射先將動物固定,腹部用酒精棉球擦試消毒,然后在左或右側(cè)腹部將針頭刺入皮下,沿皮下向前推進(jìn)約0.5厘米,再使針頭與皮膚呈45 度

3、角方向穿過腹肌刺入腹腔,此時有落空感,回抽無腸液、尿液后,緩緩?fù)迫胨幰?。此法大小鼠用的較多。5. 靜脈注射是將藥液直接注射于靜脈管內(nèi),使其隨著血液分布全身,迅速奏效。但排泄較快,作用時間較短。小鼠、大鼠的靜脈注射:常采用尾靜脈注射。鼠尾靜脈共有3根, 左右兩側(cè)和背側(cè)各1根,兩側(cè)尾靜脈比較容易固定,故常被采用。操作時,先將動物固定在暴露尾部的固定器內(nèi)(可用燒杯、鐵絲罩或粗試管等物代替),用75酒精棉球反復(fù)擦試使血管擴(kuò)張, 并可使表皮角質(zhì)軟化,以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側(cè),使靜脈充盈,注射時針頭盡量采取與尾部平行的角度進(jìn)針。開始注射時宜少量緩注,如無阻力,表示針頭已進(jìn)入靜脈,這時用左手指將針和尾一

4、起固定起來,解除對尾根部的壓迫后,便可進(jìn)行注射。如有白色皮丘出現(xiàn),說明未穿刺入血管,應(yīng)重新向尾部方向移動針頭再次穿刺。注射完畢后把尾部向注射側(cè)彎曲以止血。如需反復(fù)注射,盡量從尾的末端開始。一次的注射量為每10g體重0.10.2ml。豚鼠的靜脈注射:一般采用前肢皮下頭靜脈。鼠的靜脈管壁較脆,注射時應(yīng)特別注意。兔的靜脈注射:一般采用外耳緣靜脈,因其表淺易固定。注射部位除毛,用75的酒精消毒,手指輕彈兔耳,使靜脈充盈,左手食指和中指夾住靜脈的近心端,拇指繃緊靜脈的遠(yuǎn)心端,無名指及小指墊在下面,右手持注射器,盡量從靜脈的遠(yuǎn)端刺入血管,移動拇指于針頭上以固定,放開食、中指,將藥液注入,然后拔出針頭,用手

5、壓迫針眼片刻以止血。狗的靜脈注射:狗的靜脈注射多采用前肢外側(cè)靜脈或后肢外側(cè)的小隱靜脈。注射部位除毛后,在靜脈血管的近心端用橡皮帶扎緊,使血管充盈,從靜脈的遠(yuǎn)心端將注射針頭平行血管刺入,回抽注射器針?biāo)?,如有回血,即可放開像皮帶,將藥液緩緩注入。6. 淋巴囊注射蛙類常采用此法,其皮下有數(shù)個淋巴囊,注入藥物甚易吸收。腹部淋巴囊和頭部淋巴囊常作為蛙類給藥途徑。一般多選用腹部淋巴囊給藥。注射時將針頭從蛙大腿上端刺入,經(jīng)大腿肌層入腹壁肌層,再進(jìn)入腹壁皮下,即進(jìn)入淋巴囊,然后注入藥液。(二)經(jīng)口給藥法1. 口服法:口服給藥是把藥物混入飼料或溶干飲水中讓動物自由攝取。一般適用于對動物疾病的防治或某些藥物的毒性

6、實(shí)驗(yàn),制造某些與食物有關(guān)的人類疾病動物模型。此法優(yōu)點(diǎn)是簡單方便,缺點(diǎn)是劑量不能保證準(zhǔn)確,且動物個體間服藥量差異較大。大動物在給予片劑、丸劑、膠囊劑時,可將藥物用鑷子或手指送到舌根部,迅速關(guān)閉口腔,將頭部稍稍抬高,使其自然吞咽。2. 灌胃法:在急性實(shí)驗(yàn)中,多采用灌胃法。此法劑量準(zhǔn)確。灌胃法是用灌胃器將所應(yīng)投給動物的藥灌到動物胃內(nèi)。灌胃器由注射器和特殊的灌胃針構(gòu)成。小鼠的灌胃針長約45cm,直徑為1mm,大鼠的灌胃針長約68cm,直徑約1.2mm。灌胃針的尖端焊有一小圓金屬球,金屬球?yàn)橹锌盏摹:附饘偾虻哪康氖欠乐贯橆^刺入氣管或損傷消化道。針頭金屬球端彎曲成20左右的角度,以適應(yīng)口腔、食道的生理彎曲

7、度走向。鼠類的灌胃法:用左手固定鼠,右手持灌胃器,將灌胃針從鼠的口腔插入,壓迫鼠的頭部,使口腔與食道成一直線,將灌胃針沿咽后壁慢慢插入食道,可感到輕微的阻力,此時可略改變一下灌胃針方向,以刺激引起吞咽動作,順勢將藥液注入。一般灌胃針插入小鼠深度為34cm,大鼠或豚鼠為46cm。常用灌胃量小鼠為0.21ml,大鼠14ml,豚鼠15ml。狗、兔的灌胃法:先將動物固定,再將開口器的小孔插入動物口中,再慢慢沿上鄂壁插入食道,將灌胃管的外端浸入水中,如有氣泡逸出,則說明灌胃管誤入氣管,需拔出重插。插好后,將注射器連于灌胃管將藥液推入。灌胃結(jié)束后,先拔出灌胃管,再拿出開口器。一次灌胃能耐受的最大容積兔為8

8、0100ml,狗為 200 250ml。(三)其它途徑給藥方法1. 呼吸道給藥:呈粉塵、氣體及蒸氣或霧等狀態(tài)的藥物或毒氣,均需要通過動物呼吸道給藥。如實(shí)驗(yàn)時給動物乙醚作吸入麻醉、用鋸末煙霧制作慢性氣管炎動物模型等,特別在毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用更為廣泛。2. 皮膚給藥:為了鑒定藥物或毒物經(jīng)皮膚的吸收作用、局部作用、 致敏作用和光感作用等,均需采用經(jīng)皮膚給藥方法。如兔和豚鼠常采用背部一定面積的皮膚脫毛后,將一定的藥液涂在皮膚上,藥液經(jīng)皮膚吸收。3. 脊髓腔內(nèi)給藥:此法主要用于錐管麻醉或抽取腦脊液。4. 腦內(nèi)給藥:此法常用于微生物學(xué)動物實(shí)驗(yàn),將病原體等接種于被檢動物腦內(nèi),然后觀察接種后的各種變化。5. 直

9、腸內(nèi)給藥:此種方法常用于動物麻醉。兔直腸內(nèi)給藥時,常采用灌腸的膠皮管或用14號導(dǎo)尿管代替。6. 關(guān)節(jié)腔內(nèi)給藥:此法常用于關(guān)節(jié)炎的動物模型復(fù)制。大鼠給藥方法一、大鼠灌胃大鼠灌胃是最常見的給藥方法之一。灌胃所用的針頭可以從市場上購買,操作方法和小鼠灌胃大同小異,只是由于大鼠體積較大,抓大鼠的手法和小鼠有所不同。大鼠灌胃是在清醒狀態(tài)下進(jìn)行的,不需要麻醉。大鼠的灌胃針長約68cm,直徑約1.2mm。大鼠灌胃時,右手持灌胃注射器,左手拇指和食中二指相對,抓住大鼠頸部皮膚,使大鼠的頭部和頸部及軀干呈一直線,不需要固定大鼠的尾巴,就可以實(shí)施灌胃操作了,其余的操作均和小鼠一樣。大鼠一般灌胃量為1ml/100g

10、體重,因此一般大鼠灌入2ml是可以的。大鼠的灌胃給藥體積一般為510ml/kg。但是藥物的濃度是需要自己按照動物實(shí)驗(yàn)方法學(xué)的方法進(jìn)行換算:200g大鼠對應(yīng)70kg人的折算系數(shù)為0.018。 二、大鼠腹腔注射腹腔注射是常見的給藥方式,尤其是在麻醉時。常見的麻醉方法均是麻醉藥物腹腔注射。大鼠腹腔注射的方法和小鼠基本相同。1.大鼠腹腔注射可以用5ml的注射器,配合5.57號針頭。2.腹腔注射時右手持注射器,左手的小指和無名指抓住大鼠的尾巴,另外三個手指抓住大鼠的頸部,使大鼠的頭部向下。這樣腹腔中的器官就會自然倒向胸部,防止注射器刺入時損傷大腸、小腸等器官。進(jìn)針的動作要輕柔,防止刺傷腹部器官。3.尤其

11、是對于體重較小的大鼠,腹腔注射時針頭可以在腹部皮下穿行一小段距離,最好是從腹部一側(cè)進(jìn)針,穿過腹中線后在腹部的另一側(cè)進(jìn)入腹腔,注射完藥物后,緩緩拔出針頭,并輕微旋轉(zhuǎn)針頭,防止漏液。4.大鼠腹腔注射的給藥容積一般為510ml/kg。三、大鼠尾靜脈注射 這也是常見的操作,稍微有點(diǎn)難度,沒有指導(dǎo)的話,一開始可能會感覺有點(diǎn)手足無措。但是可以肯定的說,只要掌握了方法,大鼠的尾靜脈注射還是很容易的??偟膩碚f,大小鼠的尾靜脈注射難度相當(dāng),熟練后,大鼠應(yīng)該比小鼠注射更容易,因?yàn)榇笫蟮奈舶洼^粗,而且血管也較粗,進(jìn)針的手感比較好找。但是大鼠年齡增大后,尾部鱗片也較厚,此時尾靜脈注射難度會加大,進(jìn)針點(diǎn)宜選擇兩個鱗片的

12、間隙,以利于針尖順利刺入。操作步驟:1. 首先要固定大鼠,最簡單的固定方法就是把大鼠麻醉,然后大鼠躺在那里不動,就可以順利操作了。但是我們往往需要多次給藥,就是單次給藥的話,每只都麻醉的話,也很麻煩,而且還要考慮麻醉對實(shí)驗(yàn)結(jié)果和動物的影響,因此,有必要找另外的方法固定了。再有的固定方法就和小鼠類似,做一個圓筒,最好是金屬做的,(可以在當(dāng)?shù)氐蔫F匠鋪,或者買白鐵鋪里面定做)首先是金屬比較結(jié)實(shí),而且可以用來固定在鐵架臺上,方便操作。圓筒的一段有個蓋子可以拿下來,蓋子中間有個小孔,可以讓大鼠的尾巴伸出來(中間的小孔可以用膠布纏一下,防止銳利的邊緣割傷大鼠尾巴)。另外一段可以用金屬網(wǎng)的結(jié)構(gòu),網(wǎng)的形狀可以

13、做成子彈頭的頭端形狀。網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)可以讓光線透近來,方便大鼠鉆進(jìn)圓筒里面。圓筒的長度約1520cm,直徑約58cm,可以做個系列長度和直徑的圓筒,適合不同大小的大鼠。操作的時候,可以把圓筒固定在鐵架臺上面,有鐵絲網(wǎng)的一面稍微向上,拔下另外一頭的蓋子,抓住大鼠的尾巴,懸空大鼠,讓大鼠的頭部靠近圓筒,稍微引導(dǎo)一下,大鼠就會鉆進(jìn)圓筒,將大鼠的尾巴穿過蓋子中間的小孔,蓋上蓋子,向外拉直大鼠尾巴,就可以進(jìn)行下一步操作了。也有直接利用大鼠籠蓋的鐵絲網(wǎng)固定大鼠,向上面小鼠固定的方法固定大鼠,那是高手所為,總共只需要一次到兩次的靜脈注射時可以試用,不推薦使用。2.固定好大鼠后就是注射了,一般用一次性的5ml的注射

14、器,去除針頭,接上5.5號的頭皮針,用頭皮針穿刺,個人感覺比較方便,而且便于固定針頭。3.注射前首先要讓大鼠的血管充盈??梢圆捎?5%的酒精棉球擦拭的方法或者采用溫水浸泡的方法,(一般水浴溫度45度左右),大概2分鐘就可以讓尾部左右二側(cè)靜脈充分?jǐn)U張,用電吹風(fēng)的熱風(fēng)吹大鼠尾部,這種使靜脈擴(kuò)張的方法不但快而且操作方便,但要控制好吹的方式,不要弄傷動物。若大鼠的血管很不清楚,推薦采用溫水浸泡的方法,水溫以不燙手為宜。溫水浸泡23分鐘后,取出大鼠尾巴,用干棉球擦拭。等一會兒,待血管充盈后,酒精棉球擦拭后就可以進(jìn)針了。若血管還不充盈,可以反復(fù)用溫水浸泡,切不可冒險注射,除非你手法很熟練,另當(dāng)別論。4.大

15、鼠尾部共有四條血管,一般認(rèn)為左右的兩條靜脈比較容易注射,多采用這兩條靜脈進(jìn)針。一般要求進(jìn)針部位靠近大鼠的尾端,這樣若注射失敗的話,還可以再向上選擇進(jìn)針點(diǎn)。但是進(jìn)針部位也不可以太靠下,因?yàn)樵酵?,靜脈越細(xì),操作越難,一般以大鼠尾巴下三分之一的位置比較好。5.最關(guān)鍵的就是進(jìn)針了。進(jìn)針時操作者左手食指和拇指固定住大鼠的尾巴,讓大鼠的尾巴在經(jīng)過拇指后向下彎曲,進(jìn)針點(diǎn)靠近拇指指甲。針頭和血管呈約30角,針尖斜面朝上,輕輕挑刺入皮膚后針頭立即和血管平行,一般情況下一次就可以進(jìn)入血管,可以將針頭刺入血管一大半,輕輕回抽針?biāo)?,看見有明顯的回血,就可以推注藥液了,正常情況下,推注的過程應(yīng)該沒有明顯阻力,血管也不

16、會鼓起。推液時動作宜輕柔,若發(fā)現(xiàn)血管鼓起,那是針頭沒有刺入血管,需立即拔出針頭,重新注射。(正常情況下,均可以看見回血,若沒有回血,9成是沒有進(jìn)入血管,不要推藥,拔出針頭,重新穿刺,以防推注藥液導(dǎo)致大鼠尾巴皮下水腫,加大穿刺的難度,若是帶有顏色的液體,如伊文斯蘭,就更要注意)6.注射結(jié)束后,輕輕拔出針頭,可以用干燥的棉球壓一下進(jìn)針點(diǎn),防止液體回漏。四、大鼠舌靜脈注射大鼠的舌靜脈給藥比較少見,因?yàn)樗枰诼樽頎顟B(tài)下方可以操作。不麻醉的情況下也不是不可以,但是若不麻醉的話,既不符合動物福利,也很容易失敗,而且操作人員也容易受傷。一般在做垂體后葉素致大鼠心肌缺血的實(shí)驗(yàn)中,垂體后葉素的靜脈注射采用舌靜

17、脈注射。1.舌靜脈注射一般采用1ml注射器,配4號針頭。2.大鼠麻醉后,仰臥位固定在鼠板上,牙齒也固定好。右手持眼科鑷,輕輕拉出大鼠舌頭,左手拇指和食指輕輕捏住舌尖,可見大鼠舌頭兩側(cè)均有一條很清楚的靜脈,一般右側(cè)的比較順手(我是右撇子),左手稍微繃緊大鼠舌頭,不要繃的太緊,這樣靜脈會看的不清楚,以能拉直大鼠舌頭,且能清楚看見血管為宜。3.右手持注射器,針尖斜面朝上,和舌頭血管呈15角,挑刺入血管。(舌靜脈非常淺,針尖挑刺舌面皮膚后就進(jìn)入血管了),輕輕推注藥液,若發(fā)現(xiàn)舌頭有鼓起,則是注射失敗。這樣注射點(diǎn)很容易出很多學(xué),形成血腫,這側(cè)靜脈想再次注射就很困難了,那么最好就選用另外一側(cè)靜脈了。4.舌靜

18、脈血流很豐富,拔針時一定要用干棉球壓迫注射點(diǎn),幫助止血。5.正常的舌靜脈注射不影響大鼠的進(jìn)食。五、大鼠經(jīng)皮膚給藥首先需要脫毛可以配制8%的硫化鈉溶液,也可以自配脫毛劑,配方:硫化鈉:肥皂粉:淀粉為3:1:7,加水混合成糊狀軟膏。用棉簽將脫毛劑涂在要脫毛的部位,觀察看見區(qū)域內(nèi)鼠毛發(fā)粘用干凈棉簽沾潔凈的水將脫毛部位清洗干凈,大鼠一般用腹部皮膚,小鼠可用背部皮膚。六、大鼠鞘內(nèi)給藥鞘內(nèi)給藥有兩種方式:一是急性給藥,二是長期慢性給藥。慢性給藥,具體的說應(yīng)該是在暴露出寰枕膜后將PE10管插入蛛網(wǎng)膜下隙,至有清亮腦脊液反流后可確定位置正確,然后將PE10管插入7.5cm達(dá)腰膨大水平,固定并縫合即可。注射反意寡核苷酸,所以直接在L45椎間隙進(jìn)針就可以對于長期給藥宜選慢性套管給藥,選做好插入深度標(biāo)記的PE-10導(dǎo)管,根據(jù)動物大小和所需埋置的脊髓節(jié)段,決定好插入深度,一般270320g的大白鼠腰骶部約7.5cm,胸段約55.5cm。給藥:將4號注射針頭鋸斷,并磨尖,插在PE-10導(dǎo)管上,導(dǎo)管另一端接在另一接又注射器的4號針頭上,給藥時只需將鋼管另一端與動物身上埋植好的PE-10導(dǎo)管相接即可。 七、大鼠陰道給藥大鼠陰

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