1、技能訓(xùn)練 常用培養(yǎng)基的制備,1,熟悉培養(yǎng)基制備的基本程序 會(huì)制備常用的培養(yǎng)基,實(shí)訓(xùn)目標(biāo),高壓蒸氣滅菌器、電熱干燥箱、電爐、天平、量筒、漏斗、試管、培養(yǎng)皿、燒杯、三角燒瓶、等,儀器材料,2,方法步驟,（一）肉湯培養(yǎng)基 （二）瓊脂培養(yǎng)基 （三）半固體培養(yǎng)基 （四）血液瓊脂培養(yǎng)基,3,制備培養(yǎng)基 方法步驟,計(jì)算 稱量 溶化 調(diào)PH 分裝 滅菌 無菌檢驗(yàn) 備用,（一）肉湯培養(yǎng)基 （二）瓊脂培養(yǎng)基 （三）半固體培養(yǎng)基 （四）血液瓊脂培養(yǎng)基,4,（一）肉湯培養(yǎng)基,1成分 牛肉膏35g，蛋白胨10g，氯化鈉5g，蒸餾水1000ml。 2制法 將牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉加蒸餾水后，加熱溶解。矯正pH至7.47.

2、6，過濾分裝。置高壓蒸氣滅菌器內(nèi)，121.3滅菌20min即成。 3用途 可供一般細(xì)菌生長(zhǎng)，同時(shí)也是制作一般培養(yǎng)基的基礎(chǔ)原料。供營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌分離培養(yǎng)，亦可供溶血性的觀察和保存菌種。,5,（二）固體瓊脂培養(yǎng)基1計(jì)算：,1000 ml蒸餾水中應(yīng)加營(yíng)養(yǎng)瓊脂粉31.3g，再根據(jù)培養(yǎng)基的需要量確定營(yíng)養(yǎng)瓊脂粉的用量。 營(yíng)養(yǎng)瓊脂粉的量=31.315n/1000 （g） 其中： 15代表一個(gè)平板需要營(yíng)養(yǎng)瓊脂約15 ml； n代表要做的培養(yǎng)基平板的數(shù)量,6,2稱量：,用普通天平準(zhǔn)確稱量出營(yíng)養(yǎng)瓊脂粉的量，用量筒量出相應(yīng)的 蒸餾水的量，要盡量準(zhǔn)確。,7,3溶化：,將營(yíng)養(yǎng)瓊脂粉和蒸餾水倒入搪瓷缸中，于電爐上加熱

3、溶化，邊加熱邊攪拌，沸騰時(shí)立即從電爐上拿下，等泡沫消失后再放在電爐上加熱，注意不能讓瓊脂溢出，煮沸23次。,8,4分裝：倒平板或倒試管,若做平板培養(yǎng)基應(yīng)倒于培養(yǎng)皿中，每板約15ml左右，以剛好覆蓋平皿底為易。 若做斜面培養(yǎng)基應(yīng)倒入試管中，量為試管的1/3,9,包扎：,加塞后，試管通常每7支一起，包上一層牛皮紙或兩層報(bào)紙，用線繩扎緊。三角瓶加塞后也用牛皮紙包扎。 以活結(jié)形式扎緊，以便使用時(shí)容易解開。 用記號(hào)筆注明培養(yǎng)基名稱、配制日期、配制人或?qū)嶒?yàn)組。,滅菌時(shí)包牛皮紙,10,5滅菌：用高壓滅菌器滅菌,包扎好，直立放入內(nèi)筒中，在121.3滅菌20-30min。 滅菌完畢后，將平板培養(yǎng)基拿出平放于桌面，凝固前勿動(dòng)；將試管培養(yǎng)基擺成斜面，凝固前勿動(dòng)。,11,6無菌檢驗(yàn)：,隨機(jī)抽取幾個(gè)平板或試管培養(yǎng)基于溫箱中培養(yǎng)24小時(shí)，若無菌 生長(zhǎng)則為合格。,7備用：,將合格的培養(yǎng)基放入冰箱，在0-4中保存?zhèn)溆谩?12,（三）半固體培養(yǎng)基,肉湯培養(yǎng)基中加入0.3%0.5%瓊脂粉制成，用于菌種的保存或觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性。,13,（四）血液瓊脂培養(yǎng)基,將滅菌的營(yíng)養(yǎng)瓊脂冷至4550，以無菌操作，加入5%10%的無菌血液（或脫纖維血）