1、清潔海綿檢測，主要內容為：引言性質介紹采用方法原理的試劑實驗儀器、操作階梯數(shù)據(jù)處理檢測條件儀器清洗注意事項，引言：清潔海綿(Melamine )為三嗪類含氮雜環(huán)有機化合物，是重要的氮雜環(huán)有機化學工業(yè)原材料。 簡稱三胺，通稱清潔海綿、蛋白質精。 由于清潔海綿在食品中的危害極大，清潔海綿含氮量高，加入食品中蛋白含量增加，過量飲食會引起嬰兒腎結石和腎功能衰竭。 因此，正確測定乳和乳制品中清潔海綿的含量，對保證產品品質非常重要。 性質介紹物理性質，清潔海綿性狀為純白色單斜棱結晶，無味，密度1.573g/cm3 (16 )。 常壓熔點354 (分解)急速加熱熱升華、熱升華溫度300。 在水中的溶解度隨溫

2、度上升而增大，20時約為3.3 g/L，即微溶于冷水，極微溶于熱水，極微溶于熱乙醇，不溶于醚、苯和四氯化碳，而溶于甲醇、甲醛、冰乙酸、熱乙醇、甘油、吡啶等。 性質介紹化學性質，呈弱堿性，可與鹽酸、硫酸、硝酸、冰乙酸、草酸等形成清潔海綿鹽。 中性或微鹽化學基性時，與甲醛縮合形成各種羥甲基清潔海綿，在微酸性中(5.56.5 )與羥甲基的誘導體進行縮聚反應生成樹脂生成物。 當強酸或強堿水溶液水解作用后，胺化學基逐漸被羥基化學基所置換，老師變成三聚氰酸二酰胺，進一步水解作用生成三聚氰酸一酰胺，最后生成三聚氰酸。 引用依據(jù)： GB/T22388- 2008本方法檢測限： 2.0mg/kg應用范圍：本標準

3、適用于原料乳乳制品和乳制品中清潔海綿的定量測定。 試樣通過溶解、超聲波萃取、沉淀蛋白質、過濾得到的試驗液，通過高效液相色譜法測定，根據(jù)保持時間定性，根據(jù)峰面積進行定量。 方法原理：實驗試劑：除非另有說明，所有試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一次水。 1、甲醇：色譜分析法純。 乙腈：色譜分析法純。 3、檸檬酸：分析純。 4、庚磺酸納金屬釷：色譜分析法純。 (有較強的絡離子對抗作用) 5、試劑氨水：含量2528。 6 .三氯乙酸溶液(10g/L ) :用水溶解10.0g三氯乙酸，定容至1000ml，混合。 7 .醋酸鉛溶液(22g/L):稱量22.0g醋酸鉛，用約300mL的水中溶解，固

4、定容納在1000ml中。 8 .甲醇水溶液：正確稱量20mL甲醇和80mL水，混合后準備。 9 .絡離子對試劑緩沖液：準確稱量2.10g檸檬酸和2.02g庚磺酸納金屬釷，用水少量溶解后固定在1000ml中。 (達到精密0.1 mg ) 10，流動相：絡離子對試劑緩沖液：乙腈=92:8 (可視情況變動) 11，清潔海綿標準品：純度大于99.0%。 參比溶液的制備、清潔海綿儲備液：正確地采集0.1g (正確地0.1mg )的清潔海綿標準品，用20%的甲醇水溶解，定容于100ml的容量瓶中。 濃度：1mg/ml=1000ppm清潔海綿中間液：將10ml的清潔海綿標準儲備液吸入100ml的容量瓶中，用

5、20%的甲醇水定容為刻度。濃度： 100g/ml清潔海綿標準品： (10.05.01.00.5g/ml )將標準品10.0g/ml:10ml的中間液100g/ml正確吸入100ml的瓶中，用20%的甲醇水定容的標準品5.0g/ml:5ml的中間液100g/用100ml的甲醇水將ml定容為刻度：將標準品2.0g/ml:2ml的中間液100g/ml正確地吸入到100ml的甲醇瓶中，用20%的甲醇水將標準品1.0g/ml :標準品10g/ml正確地吸入到100ml的容器中， 用20%的甲醇水按刻度定容：標準品0.5g/ml :正確吸取標準品10g/ml的高速液相色譜法：使用了紫外檢測器超音波清洗器的

6、固相萃取裝置氮吹氣裝置，操作順序樣品處理，1 .液狀樣品：(原乳、酸牛奶、乳飲料、果子醬):約15g (精確到0.0001g ) 取樣品，放入50ml瓶中靜置30分鐘，用濾紙過濾，濾液(如果不需要凈化)用過濾膜(0.45m )過濾，濾液供液相測定用。 2 .原料：采集約5.0g (精確到0.0001g )的樣品，在50ml的容量瓶中加入約10g/L的三氯乙酸溶液，搖動容量瓶混合，用醫(yī)學超聲萃取10分鐘，加入3ml的醋酸鉛溶液，用三氯冰乙酸溶液定容至刻度。 靜置30分鐘，用濾紙過濾，濾液(如果不需要凈化)用過濾膜(0.45m )過濾，濾液供液相測定用。 樣品的凈化只要樣品不清楚，通過凈化就可以達

7、到清楚的目的。 1、柱活化：用3mL甲醇和3mL水依次活化柱。 2、凈化：正確吸取濾液5mL和水5mL混合后形成凈化液。 將凈化液轉移到固相萃取柱中，分為上柱，將柱速度控制在1mL/min以內。 3 .洗脫：進一步用水3mL和甲醇3mL洗滌，吸移至近干后，用6 mL阿摩尼亞化甲醇溶液洗脫，收集洗脫劑。 整個固相萃取過程的流速在1 mL/min以下。 4、氮氣吹氣：洗脫液在50下用氮瓦斯氣體吹氣，殘留物(相當于樣品0.4g )用1mL流動相溶解，用旋渦混合1min，超過0.22有機過濾煙嘴，用于HPLC測定。操作步驟啟動順控、操作步驟設備操作、1120電源接通后，等待系統(tǒng)的自檢完成。 2 .在桌

8、面掌門人下雙擊EZChrom圖標，進入EZChrom的主畫面。 雙喀嚦聲(即選擇用上線了打開)主畫面配置的機器，進入EZChrom的控制畫面。 如果需要打開Offline工作站(即僅處理數(shù)據(jù)而不控制設備)，可以右喀嚦聲設備圖標，選擇脫機打開。 喀嚦聲設備操作1 (打開畫面)、設備操作2 (上線了)、該上線了牛鼻子，使設備成為上線了。 此時，狀態(tài)由灰變?yōu)辄S色，最后變?yōu)榫G色。 設備操作3 (起動后排氣)，氣泡排出時的流速為5.0ml/min，起動后，將管路更換為脫氣的10%甲醇，排出氣泡后，清洗10min。 換流動相。 首先用10%的清掃液清洗作用：防止甲醇和乙腈與流動接觸結晶。 設備操作4 (順

9、控編輯)、順控編輯文件方法保存注意： 1、文件名為“當天的日期編號”。 2 .方法是“清潔海綿檢查方法”。 3 .樣品ID與樣品瓶號相同，都是放置位置的號碼。 4 .空白樣品嵌入序列的最后位置，保護自動樣品針。 文件名方法樣品ID樣品瓶編號、設備操作5 (選擇方法)、設備操作6 (預覽運行)、1、以脫氣的流動相排出氣泡后，進行基線平衡30-40min (即預覽運行) 2，觀察到基線穩(wěn)定后(0 必須從特羅爾菜單中選擇停止運行，或者喀嚦聲快捷按鈕欄的功能按鈕。選擇機器操作7 (順序運行)、“標準”，或者樣本運行結束后：點線路分離文件方法選擇測定方法點線路分離文件數(shù)據(jù)打開數(shù)據(jù)方法為： 1、標準品用點

10、閉合峰值2、開放峰值/峰值組表、名稱和保持時間3， 點頭上樣品數(shù)據(jù)的提取方法： 1、點開選擇標準品2、點開選擇文件數(shù)據(jù)樣品開3、積分分析通訊端口評審外標準法4、看ESTD濃度、數(shù)據(jù)處理、數(shù)據(jù)處理、多點補正式： c樣品V X n m X樣品的含量、mg/kg； 用c樣定標曲線查的試樣中的清潔海綿的濃度、g/ml； v樣品稀釋液的總體積、mL； m樣品質量，g； n稀釋倍數(shù)重現(xiàn)性：在同一實驗室同一操作員使用同一儀器完成的兩個平行測量的相對偏差在10%公差以下：重現(xiàn)性條件下得到的兩個獨立測量結果的絕對差超過算術平均數(shù)值的10%回收率則為要不得：回收率在80%-110%之間， 方法的檢查條件為：色譜檢

11、測條件1 .流速1.0 ml/min 2.柱溫度40度3 .波長240 nm 4.樣品注入量10 l 5.色譜柱c18 .流動相絡離子對試劑緩沖鹽：乙眸7 .檢測器紫外檢測器，環(huán)境檢測條件溫度： 15-30大氣濕度流動相使用前的1000ml醫(yī)學超聲10分鐘， 例如醫(yī)學超聲結束的流動相在4-5小時后一直沒有使用，需要使用前的醫(yī)學超聲5min，但時間不要太長。 否則，乙腈揮發(fā)會影響樣品的保留時間。 流動相的使用時間請控制在2天以內。 交換流動相時，新舊流動相不能混合使用。 不使用色譜柱，準備保管時，應充滿純甲醇(有機溶劑)后再保管。 溶劑注入口過濾煙嘴清洗時不能超聲清洗，用35%硝酸浸泡12小時后，用清水反復清洗。 用濾紙過濾時，必須保證容量瓶的內含物完全過濾，以使檢查結果不具有代表性。 如果柱臟的話，1、老化柱：用100%甲醇清洗一晚，可以0.5mi/min的流速