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1、關(guān)于病理常用試劑和染色液的制備、南昌高新技術(shù)達(dá)安臨床檢驗(yàn)站、1、交流PPT、病理常用試劑和染色液的制備、1 .蘇木精的制備方法2 .伊紅的制備方法3 .去礦化液的制備方法4 .鹽酸醇的制備方法5 .甲醛陸戰(zhàn)隊(duì)員的制備方法2、交流PPT、蘇木精的學(xué)習(xí)蘇木精,為靈活掌握常規(guī)HE染色蘇木精也被稱為蘇木精。 如果蘇木精過(guò)長(zhǎng)或接觸空氣,顏色就會(huì)逐漸變濃,不喜歡使用那個(gè)染色液。 易溶于乙醇、六乙二醇、甘油,易溶于水本身不是染料,沒(méi)有染色性能,需要經(jīng)過(guò)氧化和媒染后,才能形成良好的細(xì)胞核染料。 學(xué)習(xí)交流PPT,人工氧化:在制備蘇木精染液時(shí)加入一定量的氟化劑如氧化汞、碘元素酸納金屬釷等,能夠立即將蘇木精氧化成蘇

2、木精紅。 但是,要注意添加氟化劑的量不要太多,不要把所有的蘇木精分子氧化成蘇木精紅色。 否則,蘇木精染色液的染色力將減弱或失效。 在蘇木精染色液的制備、4、交流PPT的學(xué)習(xí)、蘇木精氟化劑中優(yōu)選碘元素酸鈉金屬釷。 具有在室溫下容易溶于水,不需要煮沸就可以放出氧氣的優(yōu)點(diǎn)。 氧化后產(chǎn)生的碘化納金屬釷無(wú)害,染液穩(wěn)定性好。 氧化汞需要在蘇木精染液煮沸的時(shí)候加上放氧,一開(kāi)始放氧就必須立即將染液放入冷水中停止放氧。 之后,蘇木精染色液每天在液面上形成金屬膜,需要過(guò)濾染色液,水銀鹽也是毒性物質(zhì)。 蘇木精染色液的制備、5、學(xué)習(xí)交流PPT和蘇木精的氧化與蘇木精染色液的PH值有關(guān)。 染液的偏堿氧化快,中性時(shí)稍慢,酸

3、性時(shí)慢,所以加酸時(shí)的蘇木精染液能夠延遲氧化。 氟化劑的量。 添加人工氟化劑后,蘇木精可以立即氧化成熟利用。 自然氧化與供氧量有關(guān)。 可以接近太陽(yáng)光,換染液,頻繁搖晃等,加速氧化。 氧化時(shí)蘇木精精液的溫度。 將碘元素酸鈉金屬釷等作為氟化劑使用的情況下,在常溫下加入即可,將水銀氧化物作為氟化劑使用的情況下,在煮沸蘇木精精液時(shí)加入,放出氧。 蘇木精染色液配制,6,學(xué)習(xí)交流PPT,蘇木精媒染:蘇木精氧化為蘇木精紅弱酸性,染色淺。 但是,如果加入鋁、鐵元素鹽等2價(jià)或3價(jià)的金屬鹽,染料分子可以與這些個(gè)的金屬鹽的絡(luò)離子結(jié)合形成色淀。 該色淀吸附帶正電荷和負(fù)電荷的DNA極性而被染色。 這些個(gè)的2價(jià)或3價(jià)金屬鹽

4、稱為媒染劑。 學(xué)習(xí)蘇木精染色液的制備、7、交流PPT并制備蘇木精染液所需要的試劑作用:氧化汞、碘元素酸納金屬釷:作為蘇木精的氟化劑,將無(wú)染色力的蘇木精氧化轉(zhuǎn)化成有染色力的蘇木精紅。 硫酸鋁鉀元素、硫酸鋁以及硫酸鋁:作為媒染劑,其三價(jià)鋁絡(luò)離子與蘇木精結(jié)合,藍(lán)紫色的色淀與形成細(xì)胞核內(nèi)核酸的磷酸化學(xué)基牢固地結(jié)合。 無(wú)水乙醇:可快速溶解蘇木精,抑制霉菌生長(zhǎng)。 學(xué)習(xí)蘇木精染色液的制備、8、交流PPT和制備蘇木精染色液所必需的試劑作用:甘油:作為穩(wěn)定劑,能延緩蘇木精染色液的蒸發(fā),防止蘇木精過(guò)氧化,延長(zhǎng)蘇木精精液的使用期限。 冰冰乙酸:可以抵消氟化劑氧化,使蘇木精和蘇木精均衡。 在云同步中增加細(xì)胞核的選擇性

5、染色,可以清晰細(xì)致地顯示細(xì)胞核染色質(zhì)。 學(xué)習(xí)蘇木精染色液的制備、9、交流PPT,改進(jìn)Lillie-Mayen蘇木精染色液的制備: a液: 5g蘇木精溶于50ml無(wú)水乙醇中于一盞茶。 b液:硫酸鋁鉀元素50g溶解于650ml蒸餾水; 略加熱完全溶解后,將兩者混合,依次加入碘元素酸鈉金屬釷0.5g、甘油300ml和冰冰乙酸20ml,木質(zhì)素染料有效期為3個(gè)月。學(xué)習(xí)蘇木精染色液的制備,10,交流PPT,蘇木精染色液的制備,11,交流PPT,蘇木精染色液的制備是否理想,將幾滴蘇木精染色液滴到一盤(pán)自來(lái)水中,滴下的瞬間由紅變?yōu)樽?,逐漸向紫藍(lán)擴(kuò)散,該蘇木精精液的制備在良好的擴(kuò)散過(guò)程中也保持紅色,達(dá)到一盞茶成熟

6、取下濾紙滴下2滴蘇木精染色液,蘇木精在濾紙上擴(kuò)散不久就呈紫味噌色的圓斑,圓斑周邊最后呈深紫色,這是很好的蘇木精精液。 如果周邊沒(méi)有變成深紫色,表示該染液在一盞茶中不成熟或者沒(méi)有被混合。 理想的方法是用實(shí)際操作染色淋巴結(jié)組織切片,鏡下觀察染色效果。 學(xué)習(xí)了蘇木精染色液的制備、12、交流PPT、伊紅染色液的制備,伊紅y是化學(xué)合成的酸性染料,在水中解離為帶負(fù)電荷的陰絡(luò)離子,并與蛋白質(zhì)的氨基正電荷的陽(yáng)絡(luò)離子結(jié)合,對(duì)細(xì)胞球漿進(jìn)行染色,細(xì)胞球漿、血紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織、嗜伊紅粒子等是不同程度的紅色或伊紅是細(xì)胞球漿的良好染料學(xué)習(xí)交流PPT,先將伊紅0.5-1g溶解于100ml 95 %酒精中,用玻璃棒研磨

7、溶解后,每100 ml加入一滴冰冰乙酸。 用乙醇性伊紅液染色細(xì)胞球拉力賽后,不水洗可以直接用85%酒精脫水。 伊紅染色液的有效期為3個(gè)月。 學(xué)習(xí)伊紅染色液的制備、14、交流PPT、去礦化液的制備,在病理實(shí)驗(yàn)切片時(shí),我們經(jīng)常碰到含鈣元素的組織,且鈣元素非常硬。 由于組織中鈣元素和殘奧蠟的密度不同,含有鈣元素的組織不能直接切片。 因此,去礦化是制作骨組織切片的重要環(huán)節(jié),15、學(xué)習(xí)交流PPT,用于去礦化的試劑較多,去礦化劑除有機(jī)酸、無(wú)機(jī)酸、乙亞胺四冰乙酸(EDTA )外,還有電去礦化法。 硝酸和鹽酸等強(qiáng)有機(jī)酸可用于密皮質(zhì)骨的去礦化,并能在短時(shí)間內(nèi)除去大量的鈣元素。 但是,這些個(gè)強(qiáng)酸對(duì)組織形態(tài)產(chǎn)生惡劣

8、影響,如果去礦化作用強(qiáng),則組織破壞性大。 學(xué)習(xí)去礦化液的制備、16、交流PPT,我們常用的去礦化液的制備方法是,先將10%甲醛陸戰(zhàn)隊(duì)員10ml注入80ml蒸餾水,再加入鹽酸10ml即可。 去礦化液的有效期為3個(gè)月。 學(xué)習(xí)了去礦化液的制備、17、交流PPT、鹽酸醇的制備,1鹽酸醇(即在1 ml 37濃鹽酸中加入99ml1 70醇,實(shí)際濃度應(yīng)為0.37 )的分化作用,主要是通過(guò)鹽酸在水中電離h,改變組織表面的電荷,進(jìn)行過(guò)染和學(xué)習(xí)交流PPT、鹽酸醇的調(diào)制方法時(shí),配合滴定管和耳吸球,混入鹽酸1ml到99ml的70%乙醇即可。 1%鹽酸酒精的有效期為3個(gè)月。 學(xué)習(xí)鹽酸醇的制備、19、交流PPT、荷爾陸戰(zhàn)隊(duì)員的制備,使組織和細(xì)胞球盡可能保持與生活時(shí)相近的成分和形態(tài),迅速防止組織、細(xì)胞球死后的變化,防止自溶和腐敗,使細(xì)胞球內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖、酶催化劑等各種成分轉(zhuǎn)化為不溶性物質(zhì),因而固定的組織是新鮮的學(xué)習(xí)20、交流PPT,固定液種類繁多,可分為簡(jiǎn)單固定液和混合固定液。 常用簡(jiǎn)單固定液:1.甲醛(formaldehyde ); 2 .乙醇(alcohol) 3.冰乙酸(aceticacid )又稱冰乙酸、甲醛陸戰(zhàn)隊(duì)員配制,21、學(xué)習(xí)交流PPT,甲醛為非沉淀性固定劑,為約40重量份的可溶于水的氣體,易揮發(fā),為市售的40種甲醛水溶液也稱該液體為有日子自分解,形成的白色沉淀為殘奧甲醛(殘奧甲醛

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