1、細胞工程第一部分 基礎(chǔ)知識點復習一細胞的全能性與細胞分化1、概念：細胞的全能性是指 。2、細胞全能性的原因（物質(zhì)基礎(chǔ)）生物體的每個細胞都含有 ，都有發(fā)育成為完整個體所必需的全部基因。從理論上說，一個染色體組中含有發(fā)育為該物種的個體所必需的全部基因。3、細胞全能性大小比較植物細胞 動物細胞（因為動物細胞只有 才具有全能性）；受精卵 生殖細胞（配子、精子、卵細胞） 體細胞；幼嫩的細胞 衰老的細胞；分化程度低的 分化程度高的；細胞分裂能力強的 細胞分裂能力弱的。4、細胞在生物體內(nèi)沒有表現(xiàn)全能性的原因在生物體內(nèi)細胞不表現(xiàn)全能性，而是分化為不同的組織、器官，其原因在于 。5、實現(xiàn)細胞全能性的條件： （必

2、要條件）、一定的營養(yǎng)物質(zhì)（水、無機鹽、維生素、氨基酸等）、激素（細胞分裂素、生長素）、 （適宜的溫度、pH）。6、細胞全能性的應(yīng)用植物的組織培養(yǎng)、單倍體育種、植物體細胞雜交、動物的核移植（即克?。┑燃夹g(shù)是否都涉及到細胞全能性的原理？ 二植物組織培養(yǎng)技術(shù)1原理：植物細胞的 2過程：離體的器官、組織或細胞 組織 完整植物3培養(yǎng)基的營養(yǎng)組成： 、 、 ；植物激素是營養(yǎng)成分嗎？ 。4誘導分化的重要激素有： 和 ；兩者的主要作用分別是什么？ ，此外還用到 激素。5請設(shè)計出一種植物花藥組織培養(yǎng)和染色體加倍的實驗流程。 三植物體細胞雜交技術(shù)1概念：將不同種植物的 ，在一定條件下融合成 ，并把雜種細胞培養(yǎng)成新

3、的植物體的技術(shù)。運用的原理是 。2過程：不同種細胞 不同細胞原生質(zhì)體 原生質(zhì)體融合 雜種細胞 雜種植物。植物體細胞融合成功的標志是什么？ ；涉及到的細胞器主要有 。3獲得原生質(zhì)體的方法是:酶解法，即用 酶和 酶處理細胞，用鹽酸處理可以嗎？ ，為什么？ 4誘導原生質(zhì)體融合的方法是：物理法： ；化學法： 5意義：與傳統(tǒng)的雜交育種相比，主要表現(xiàn)在 6、請完成下列體細胞雜交過程示意圖植物體細胞雜交 融合的原生質(zhì)體 雜種植物 生出壁 植物A植物B去壁 去壁 酶解法（纖維素酶、果膠酶）有幾種類型？物理法化學法應(yīng)用：四植物細胞工程的實際應(yīng)用1微型繁殖（1）概念：快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)（2）特點：

4、取材 ；培育周期 ；繁殖率 2作物脫毒：在培養(yǎng)無病毒植株時，為什么采用植物分生區(qū)細胞（如莖尖）進行？ 3人工種子（1）人工種子結(jié)構(gòu)：人工薄膜（人工種皮）胚狀體或不定芽或頂芽或腋芽（2）為了促進胚狀體的生長發(fā)育，可以向人工種皮中加入哪些物質(zhì)？ （3）有人認為，人工種子比天然種子更神奇，想一想，人工種子具有哪些優(yōu)點？ 4作物新品種的培育：單倍體育種，突變體的利用5細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：如生產(chǎn)燙傷藥物紫草素和抗癌藥物紫杉醇五動物細胞培養(yǎng)1概念：從動物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成 的細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和繁殖。2過程：動物組織 單個細胞 細胞懸液 原代培養(yǎng) 傳代培養(yǎng)（50代

5、后不死細胞）請依據(jù)上述過程，思考回答下列問題:（1）第過程要用什么進行處理？ 由此說明動物細胞間聯(lián)系的物質(zhì)主要是什么？ 能用其他的酶代替嗎？（如胃蛋白酶）為什么？ （2）為什么要取用幼齡動物的胚胎組織？動物細胞培養(yǎng)涉及的原理是什么？ （3）為什么要制成細胞懸浮液？ （4）什么是細胞的接觸抑制？ （5）目前傳代培養(yǎng)的細胞一般保持在多少代？為什么？ 3條件：無菌、無毒環(huán)境： 如何保證無毒、無菌的環(huán)境？請解釋兩種做法的目的。培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素，目的： 培養(yǎng)中需要定期更換培養(yǎng)液，目的： 營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基的成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素。血清或血漿為什么要加入動物血清或血漿？ 溫

6、度和PH：溫度36。50。5； PH：7。27。4。氣體環(huán)境：空氣95（代謝所需），5CO2。5CO2的作用是什么？ 在進行細胞培養(yǎng)時為什么要采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶？ 4應(yīng)用：如生產(chǎn)生物制品：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體、檢測有毒物質(zhì)的毒性、生產(chǎn)人造皮膚、為基因工程提供受體細胞等。六動物體細胞核移植和克隆技術(shù)1概念：將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個胚胎最終發(fā)育為動物個體。該個體也稱 動物。2分類：胚胎細胞核移植（易）、體細胞核移植（難）3過程：以體細胞核移植過程為例，第一步：從供體取一體細胞，從卵巢取卵母細胞，在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二

7、次分裂中期；第二步：將供體細胞進行培養(yǎng)，用顯微操作法去除卵母細胞的核；第三步：將供體細胞核植入到去核的卵母細胞中，同時用物理或化學的方法激活，使重組細胞完成減數(shù)分裂和發(fā)育過程；第四步：將早期胚胎植入到受孕母牛體內(nèi)，產(chǎn)出牛犢。將供體細胞進行培養(yǎng)時要注意哪些特殊條件？ 為什么要將卵母細胞在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期？ 本過程產(chǎn)出的牛犢，遺傳基礎(chǔ)與哪個個體有關(guān)？此過程涉及到的生物技術(shù)有哪些？ 4應(yīng)用： 目前的體細胞核移植技術(shù)可能會帶來哪些方面的問題？ 七動物細胞融合1概念：兩個或多個細胞結(jié)合成一個細胞的過程，又叫細胞雜交。2結(jié)果：形成 涉及的原理是什么？ 3過程：類似植物原生質(zhì)體的融合，還可用 作

8、融合的誘導劑4應(yīng)用： 八單克隆抗體技術(shù)1概念：由 細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體。2特點： 。3單克隆抗體的制備：動物細胞融合 單克隆抗體 抗原 效應(yīng)B淋巴細胞 雜交瘤細胞 篩選（ ）細胞融合免疫 選特定抗體的細胞群繼續(xù)培養(yǎng)（體外、體內(nèi)） 提取單克隆抗體 骨髓瘤細胞 方法：特點：雜交瘤細胞不僅具有B淋巴細胞產(chǎn)生 的能力，同時又具有 的能力。本過程經(jīng)過了幾次篩選？每次篩選的目的是什么？你還知道生物學中在分子和個體水平篩選的實例嗎？請各舉一例。 3應(yīng)用：作為診斷試劑；用于治療疾病和運載藥物：如制備“生物導彈”“生物導彈”準確的導航系統(tǒng)是什么？具有殺傷力的是導彈的

9、什么部位？ 九、比較1、植物體細胞雜交與有性雜交比較：設(shè)兩個品種的植物細胞，A含有2X條染色體。2個染色體組，基因型為Aabb，B含有2Y條染色體，2個染色體組，其基因型是ccDd項目植物體細胞雜交有性雜交形成的子代是幾倍體子代體細胞中染色體數(shù)目子代個體的基因型是否遵循遺傳定律2、脫分化與再分化的比較：比較內(nèi)容脫分化再分化過程外植體- 愈傷組織- 形成體的特點有根、芽需要的條件需要適宜的營養(yǎng)、不需要 ；生長素與細胞分裂素比例適中需要適宜的營養(yǎng)、需要 ；生長素與細胞分裂素比例高或低有利于誘導生根或生芽3、植物組織培養(yǎng)和植物體細胞雜交的比較：名稱植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交原理1、 2、 選材關(guān)鍵環(huán)

10、節(jié)去壁、促融、 關(guān)系植物組織培養(yǎng)是植物體細胞雜交的基礎(chǔ)4、植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較：項目主要原理培養(yǎng)基結(jié)果培養(yǎng)目的植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)5、植物體細胞雜交和動物細胞融合比較：項目原理融合方法誘導手段用途植物體細胞雜交動物細胞融合6、植物體細胞雜交和多倍體育種比較：項目植物體細胞雜交多倍體育種不同點基本原理不同方法不同染色體來源和數(shù)目不同相同7、生物技術(shù)中的倫理問題反對支持克隆人倫理方面違反了人類的倫理道德觀念，中國禁止 克隆中國不反對 克隆技術(shù)方面技術(shù) ，流產(chǎn)率高，畸形率高，出生后死亡率高可通過胚胎分級、 診斷，檢查等手段解決問題設(shè)計試管嬰兒也是生命，殺死胚胎無異于“謀殺”提供骨髓中

11、造血干細胞不會對試管嬰兒造成損傷8、治療性克隆與生殖性克隆的比較治療性克隆生殖性克隆區(qū)別目的從胚胎中取出干細胞用于醫(yī)學研究和治療用于生育，獲得人的復制品水平 水平 水平聯(lián)系都屬于 生殖；產(chǎn)生的新個體或新組織，其 相同9、試管嬰兒和設(shè)計試管嬰兒的比較設(shè)計試管嬰兒與試管嬰兒技術(shù)不同之處是前者 ；試管嬰兒技術(shù)主要是解決 問題，設(shè)計試管嬰兒技術(shù)主要用于白血病、貧血病等疾病的治療。兩者相同點都要應(yīng)用到 等技術(shù)，都屬于 生殖。第二部分：高考試題賞析例1、人類在預防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，且疾苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如

12、下圖：請回答：（1）過程代表的是 。（2）過程構(gòu)建A基因表過載體時，必須使用 和 兩種工具酶。（3）過程采用的實驗技術(shù)是 ，獲得的X是 。（4）對健康人進行該傳染病免疫預防時，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的 所制備的疫苗。對該傳染病疑似患者確診時，可以疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進行 比較；或用圖中的 進行特異性結(jié)合檢測。常，則說明 。例2、紅細胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進紅細胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病由于天然EP0來源極為有限，目前臨床使用的紅細胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細胞生成素(rhEPO）期間要生產(chǎn)流程如右圖（1）圖中所指的是 技術(shù)。（2）圖中所指的

13、物質(zhì)是 ，所指的物質(zhì)是 。（3）培養(yǎng)重組CHO 細胞時，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細胞嚴物積累對細胞自身造成危害，應(yīng)定期更換 。（4）檢測 rhEPO外活性需用抗rhEPO單克隆抗體。分泌單克隆抗體的 細胞，可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合而成。例3、動物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對于研究器官的生理、病理過程及其機制意義重大。下圖是一個新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖。請回答下列問題。（1）肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細胞 。（2）氣室中充入5C02：氣體的主要作用是 。（3）培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細菌生長，但要注意選擇抗生素的 ，以保證抗生素對肝臟無害。（4）有機物X有毒

14、性，可誘發(fā)染色體斷裂。利用上圖所示裝置和提供的下列材料用具，探究肝臟小塊對有機物X是否具有解毒作用。材料用具：肝臟小塊，外周血淋巴細胞，淋巴細胞培養(yǎng)液，植物凝集素（刺激淋巴細胞分裂）；顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿，滴管；吉姆薩染液（使染色體著色），有機物X溶液等。實驗過程：在淋巴細胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細胞，取4等份，備用。利用甲、乙、丙、丁4組上圖所示裝置，按下表步驟操作（“”表示已完成的步驟）。甲乙丙丁步驟一：加人肝臟培養(yǎng)液步驟二：加入有機物X溶液步驟三：放置肝臟小塊上表中還需進行的操作是 。 培養(yǎng)一段時間后，取4組裝置中的等量培養(yǎng)液，分別添加到4份備用的淋巴細胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培

15、養(yǎng)。一段時間后取淋巴細胞分別染色、制片。在顯微鏡下觀察 ，并對比分析。第三部分：鞏固練習1植物體細胞融合成功的標志是（ ）產(chǎn)生新的細胞壁 細胞膜發(fā)生融合 細胞質(zhì)發(fā)生融合 細胞核發(fā)生融合2、將一?；ǚ叟嘤捎酌纾瑢⑺那o尖用秋水仙素處理，長大后該植物正常開花結(jié)果。與該植株染色體數(shù)目不相同的是（ ）A根細胞 B葉細胞 C莖細胞 D子房壁細胞3、植物的組織培養(yǎng)技術(shù)以及植物的無土栽培在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有廣闊的應(yīng)用前景，請分析：用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)液和無土栽培時所用的營養(yǎng)液相比，最大的差別是前者（ ）A無需含有必須的礦質(zhì)元素 B必須含有機物C不一定含有植物激素 D濃度必須小于細胞液濃度組織培養(yǎng)技術(shù)不能直接用于

16、（ ）A快速繁殖 B培育無病毒植株C植物產(chǎn)品的工廠化生產(chǎn) D培養(yǎng)抗病菌植株用組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖植物體時，不可能發(fā)生的是（ ）A基因重組 B基因突變 C染色體變異 D染色體分離4、用雜合種子盡快獲得純合子植株的方法是（ ）A種植F1選出不分離者純合子 B種植秋水仙素處理純合子C種植生長素處理純合子D種植花藥離體培養(yǎng)單倍體幼苗秋水仙素處理純合子5動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分的區(qū)別是（ ）無機鹽 氨基酸 血清 氧氣6、一只羊的卵細胞核被另一只羊的體細胞核置換后，這個卵細胞經(jīng)過多次分裂，再植入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育，結(jié)果產(chǎn)下一只羊羔。這種克隆技術(shù)具有多種用途，但是不能（ ）A有選擇地繁殖某一性別

17、的家畜 B繁殖家畜中的優(yōu)秀個體C用于保存物種 D改變物種的基因型7、單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞融合后要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細胞是（ ）B淋巴細胞 小鼠骨髓瘤細胞 B淋巴細胞自身融合細胞 小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞 雜交瘤細胞A B C D8、下圖是單克隆抗體制備過程示意圖，其中1過程注射的物質(zhì)和A細胞的名稱為（ ）A抗體、T淋巴細胞 B抗原、T淋巴細胞C抗體、B淋巴細胞 D抗原、效應(yīng)B淋巴細胞9、關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)相關(guān)知識的敘述，正確的是（ ）A動物細胞培養(yǎng)與動物組織培養(yǎng)均需使用胰蛋自酶制備體細胞懸液B植物組織培養(yǎng)中生長素和細胞分裂素的配

18、比會影響組織分化C轉(zhuǎn)入到油菜的抗除草劑基因，不可能通過花粉傳入環(huán)境中造成基因污染D植物有性雜交和體細胞雜交能克服遠源雜交不親和的障礙10、下圖供體DNA中岔有無限增殖調(diào)控基因，該基因能激發(fā)動物細胞的分裂，圖示利用該基因制備新型單克隆抗體的過程，相關(guān)敘述錯誤的是（ ）A經(jīng)酶A處理后(I)與質(zhì)粒具有相同的黏性末端 B(II)是已免疫的B淋巴細胞C()既能無限增殖又能分泌特異性抗體D該過程涉及轉(zhuǎn)基因技術(shù)和動物細胞融合技術(shù)11、細胞工程中，選擇合適的生物材料是成功的關(guān)鍵。下列選擇不合理的是（ ）A選擇高度分化的動物體細胞進行培養(yǎng)有利于獲得大量細胞B選擇胚胎細胞作為核供體進行核移植可提高克隆動物的成功率

19、C選擇一定大小的植物莖尖進行組織培養(yǎng)可獲得脫毒苗D選擇植物的愈傷組織進行誘變處理可獲得優(yōu)質(zhì)的突變體12、（多選）愈傷組織進行再分化并產(chǎn)生出植物的各種組織和器官，進而發(fā)育成完整的植株，通常需要適合的（ ）A光照 B溫度 C營養(yǎng)物質(zhì) D激素13、（多選）在下列選項中，用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是（ ）A利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，得到多倍體植株B單倍體育種C利用基因工程培育抗棉鈴蟲的棉花植株D利用細胞工程培育“番茄馬鈴薯”雜種植株14、某研究小組對某種動物的肝腫瘤細胞（甲）和正常肝細胞（乙）進行培養(yǎng)，下列敘述正確的是（ ）A制備肝細胞懸浮液時先用剪刀剪碎肝組織，再用胃蛋白酶B肝細胞培養(yǎng)過程中通常

20、在培養(yǎng)液中通入5%的CO2刺激細胞呼吸C為了防止培養(yǎng)過程中雜菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的干擾素D用血球計數(shù)板計數(shù)的方法，可推斷乙細胞比甲細胞增殖周期長15、下列有關(guān)植物細胞與組織培養(yǎng)的敘述中，錯誤的是（ ）A花藥、胚不能作為組織培養(yǎng)的材料 B植物細胞具有全能性C外植體是指用于培養(yǎng)的植物組織或器官 D外植體可誘導出愈傷組織16、華南虎是國家一級保護動物，可采用試管動物技術(shù)進行人工繁殖，該技術(shù)包括的環(huán)節(jié)有（ ）轉(zhuǎn)基因 核移植 體外受精 體細胞克隆 胚胎移植A B C D17、關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯誤的是（ ）A蛋白質(zhì)工程可以合成自然界不存在的蛋白質(zhì)B體細胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單

21、克隆抗體C植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以用于植物莖尖脫毒D動物細胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動物的培養(yǎng)18、（多選）新技術(shù)的建立和應(yīng)用對生物學發(fā)展至關(guān)重要。下列技術(shù)（或儀器）與應(yīng)用匹配正確的是（ ）PCR技術(shù)擴增蛋白質(zhì) B雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體 C光學顯微鏡觀察葉綠體的基粒 D花粉離體培養(yǎng)培育單倍體植物19、下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述，正確的是（ ）A培養(yǎng)保留接觸抵制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞B克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程上多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變C二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D惡性細胞系的細胞可進行付代培養(yǎng)20、用動、植物成體的體細胞進行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是（ ）A都需用CO2培養(yǎng)箱 B都須用

22、液體培養(yǎng)基C都要在無菌條件下進行 D都可體現(xiàn)細胞的全能性21、下面所列過程是植物組織培養(yǎng)的簡略過程。請據(jù)此回答：脫分化再分化（1）表示 ，它能被培養(yǎng)成的根本原因是 。（2）表示 ，它的細胞特點是 ，它的顏色特點是 。（3）若想制造人工種子，應(yīng)選擇（寫編號） 。（4）若是花藥，則是 ，這項技術(shù)可用在 上。（5）若是胡蘿卜根尖細胞，則培養(yǎng)成的的葉片的顏色是 ，這說明根尖細胞 。22、右圖為細胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答：（1）若A、B是植物細胞，在細胞融合之前已用_處理，除去了_；由A、B到細胞C的過程中，常用的物理方法是_。融合完成的標志是_。（2）若A、B是植物細胞，則形成的D細胞還要應(yīng)用_技

23、術(shù)把D培養(yǎng)成植株。（3）若A、B是動物細胞，一般取自_，然后用_使其分散開來；由A、B到C的過程中，常用的不同于植物細胞融合的手段是_，所形成的D稱為_，A、B融合為C的過程說明了細胞膜具有_。（4）若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠效應(yīng)B細胞，那么，在獲得此細胞之前，小鼠已經(jīng)被注射了_。注射后小鼠身體發(fā)生了相應(yīng)的免疫反應(yīng)，生成了_，圖中B為_。（5）若該過程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過程中，所形成的C有 種，用來培養(yǎng)的D細胞應(yīng)該是_。從中選擇出它的方法是_培養(yǎng)，獲得D后，常用的培養(yǎng)方法是培養(yǎng)液中培養(yǎng)和_。23、“白菜甘藍”是用細胞工程的方法培育出來的蔬菜新品種，它具有生長期短和耐儲藏等優(yōu)點。下圖是“白菜甘藍”的培育過程示意圖，他們的基因型分別為AaBB、ccDd，請回答下列問題：（1）在上述過程中，實現(xiàn)過程常用的物質(zhì)為。（2）如果將已去除細胞壁的