1、第十章 巴比妥及苯并二氮雜卓類鎮(zhèn)靜催眠藥物的分析,第一節(jié) 巴比妥類藥物的分析,一、巴比妥類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì),基本結(jié)構(gòu)可分為兩部分： 一部分為母核巴比妥酸環(huán)狀丙二酰脲結(jié)構(gòu)。 另一部分是取代基部分，即R1和R2等。,常見巴比妥類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu),巴比妥類藥物的理化性質(zhì),（一）弱酸性 巴比妥類藥物的母核環(huán)狀結(jié)構(gòu)中含有1，3-二酰亞胺基團，能使其分子發(fā)生酮式-烯醇式互變異構(gòu)，在水溶液中發(fā)生二級電離。,（二）水解反應(yīng) 1.巴比妥類藥物的水解 本類藥物的分子結(jié)構(gòu)中含有酰亞胺基團，與堿溶液共沸即水解釋放氨氣，可使紅色石蕊試紙變藍。,（二）水解反應(yīng) 2.巴比妥類藥物鈉鹽的水解 一般情況下，在室溫和pH 10以下

2、水解較慢；pH 11以上隨著堿度的增加水解速度加快。,（三）與重金屬離子的反應(yīng) 巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有丙二酰脲（-CONHCONHCO-）或酰亞胺基團，在合適的pH值溶液中，可與某些重金屬離子，如Ag+、Cu2+、Co2+、Hg2+等反應(yīng)呈色或產(chǎn)生有色沉淀。,（三）與重金屬離子的反應(yīng) 1.與銀鹽的反應(yīng) 巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中含有酰亞胺基團，在碳酸鈉溶液中，生成鈉鹽而溶解，再與硝酸銀溶液反應(yīng)，首先生成可溶性的一銀鹽，加入過量的硝酸銀溶液，則生成難溶性的二銀鹽白色沉淀。,（三）與重金屬離子的反應(yīng) 2.與銅鹽的反應(yīng) 巴比妥類藥物在吡啶溶液中生成的烯醇式異構(gòu)體與銅離子吡啶溶液反應(yīng)，形成穩(wěn)定的配位化

3、合物，產(chǎn)生類似雙縮脲的呈色反應(yīng)。,（三）與重金屬離子的反應(yīng) 3.與鈷鹽的反應(yīng) 巴比妥類藥物在堿性溶液中可與鈷鹽反應(yīng)，生成紫堇色配位化合物，可用于本類藥物的鑒別和含量測定。,（三）與重金屬離子的反應(yīng) 4.與汞鹽的反應(yīng) 巴比妥類與硝酸汞或氯化汞試液反應(yīng)，生成白色汞鹽沉淀，此沉淀能溶于氨試液中。,（四）與香草醛（Vanillin）的反應(yīng) 巴比妥類藥物分子結(jié)構(gòu)中丙二酰脲基團中氫比較活潑，可與香草醛在濃硫酸存在下發(fā)生縮合反應(yīng)，生成棕紅色產(chǎn)物。,（五）紫外吸收光譜特征,（六）薄層色譜行為特征,（七）顯微結(jié)晶,二、鑒別試驗,分子結(jié)構(gòu)中含有的酰亞胺基，硫元素與不同取代基等均可用于本類藥物的鑒別試驗。 常用的鑒

4、別試驗方法有丙二酰脲類鑒別試驗，制備衍生物測定溶點，芳環(huán)反應(yīng)，不飽和鍵反應(yīng)，硫和鈉元素反應(yīng)等,二、鑒別試驗,（一）丙二酰脲類鑒別試驗 丙二酰脲類反應(yīng)是巴比妥類藥物母核的反應(yīng)，因而是本類藥物共有的反應(yīng) 1.銀鹽反應(yīng)的方法 2.銅鹽反應(yīng)的方法,二、鑒別試驗,（二）測定熔點 熔點是一種物質(zhì)在規(guī)定的測定方法下，由固態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)橐簯B(tài)的溫度。 純物質(zhì)的熔點是一定的，可作為一項鑒別藥物的物理常數(shù)，常用于藥物的鑒別； 熔點也能反映出藥物的純雜程度。,二、鑒別試驗,（二）測定熔點 利用測定熔點的方法可鑒別苯巴比妥及其鈉鹽、異戊巴比妥及其鈉鹽、司可巴比妥鈉及注射用硫噴妥鈉等。 1.司可巴比妥鈉的鑒別：熔點約為97 2

5、.苯巴比妥鈉的鑒別：熔點為174-178 ,二、鑒別試驗,（三）利用特殊取代基或元素的鑒別試驗 1.利用不飽和取代基的鑒別試驗 司可巴比妥鈉因其分子結(jié)構(gòu)中含有丙烯基，分子中的不飽和鍵可與碘、溴或高錳酸鉀作用，發(fā)生加成或氧化反應(yīng)，而使碘、溴或高錳酸鉀褪色。 （1）與碘試液的反應(yīng) （2）與高錳酸鉀的反應(yīng),二、鑒別試驗,2.利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗 具有芳環(huán)取代基的巴比妥類藥物：苯巴比妥及其鈉鹽 （1）硝化反應(yīng) 與硝酸鉀和硫酸共熱，可發(fā)生硝化反應(yīng)，生成黃色硝基化合物。 （2）與硫酸-亞硝酸鈉的反應(yīng) 與硫酸亞硝酸鈉反應(yīng)生成橙黃色產(chǎn)物，并隨即轉(zhuǎn)變?yōu)槌燃t色。 （3）與甲醛-硫酸的反應(yīng) 苯巴比妥與甲醛硫酸反

6、應(yīng)，生成玫瑰紅色產(chǎn)物。,二、鑒別試驗,3.硫元素的鑒別試驗 巴比妥類分子結(jié)構(gòu)中含有硫的藥物，如硫噴妥鈉，可將其硫元素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機硫離子，而顯硫化物的反應(yīng)。,三、特殊雜質(zhì)檢查,（一）苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查 1.酸度 酸度的檢查主要是控制副產(chǎn)物苯基丙二酰脲。 因其酸性比苯巴比妥強，能使甲基紅指示劑呈紅色。,三、特殊雜質(zhì)檢查,（一）苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查 2.溶液的澄清度 本項檢查主要是控制苯巴比妥中乙醇不溶性雜質(zhì) 利用苯巴比妥酸這些雜質(zhì)在乙醇溶液中的溶解度比苯巴比妥小的特性進行檢查。,三、特殊雜質(zhì)檢查,（一）苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查 3.中性或堿性物質(zhì) 中性或堿性物質(zhì)是由中間體（I）形成的副產(chǎn)物2苯基

7、丁二酰胺、2苯基丁二酰脲或分解產(chǎn)物等雜質(zhì)，不溶于氫氧化鈉試液但溶于乙醚； 利用這些雜質(zhì)與苯巴比妥在氫氧化鈉試液和乙醚中的溶解度不同，采用提取重量法測定雜質(zhì)含量。,三、特殊雜質(zhì)檢查,（二）司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查,三、特殊雜質(zhì)檢查,（二）司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查 1.溶液的澄清度 司可巴比妥鈉在水中極易溶解，水溶液應(yīng)澄清，否則表明含有水不溶性雜質(zhì)。,三、特殊雜質(zhì)檢查,（二）司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查 2. 中性或堿性物質(zhì) 本項檢查的雜質(zhì)是合成過程中產(chǎn)生的中性或堿性副產(chǎn)物以及司可巴比妥鈉的分解產(chǎn)物，如酰脲（I）、酰胺（II） 類化合物。 這類雜質(zhì)不溶于氫氧化鈉試液而溶于乙醚，可于堿性條件下用乙

8、醚提取后，稱重，控制其限量。,四、含量測定,（一）銀量法 巴比妥類藥物在合適的堿性溶液中，可與銀離子定量成鹽。因此，可采用銀量法測定本類藥物及其制劑的含量。 在滴定過程中，巴比妥類藥物首先形成可溶性的一銀鹽，當(dāng)被測定的巴比妥類藥物完全形成一銀鹽后，稍過量的銀離子就與巴比妥類藥物形成難溶性的二銀鹽沉淀，使溶液變渾濁，以此指示滴定終點。,四、含量測定,（一）銀量法 雖然操作簡便，專屬性強，巴比妥類藥物的分解產(chǎn)物或其它一些可能存在的雜質(zhì)不與硝酸銀反應(yīng)， 但受溫度影響較大，溶液出現(xiàn)渾濁指示滴定終點的到達難于觀察。 改用甲醇及3.0無水碳酸鈉溶劑系統(tǒng), 以飽和甘汞電池為參比電極, 銀電極為指示電極, 用

9、硝酸銀液電位滴定,得到明顯改進,終點指示：電位法指示（Ag電極為指示電極，飽和甘汞電極為參比電極） 自身指示,原 理 ：反應(yīng)摩爾比（11）,溶劑系統(tǒng)：甲醇+3%無水碳酸鈉,（一）銀量法,四、含量測定,苯巴比妥： 取本品約0.2 g，精密稱定，加甲醇40 ml使溶解，再加新制的3無水碳酸鈉溶液15 m1，照電位滴定法，用硝酸銀滴定液（0.1 mol/L）滴定。每1 ml硝酸銀滴定液（0.1 mo1/L）相當(dāng)于23.22 mg的C12H12N2O3。,四、含量測定,（一）銀量法,原料藥：直接滴定法,注意事項,（1）無水碳酸鈉應(yīng)新鮮配制 （2）AgNO3滴定液應(yīng)新鮮配制 （3）銀電極使用前應(yīng)進行處理

10、,四、含量測定,（一）銀量法,四、含量測定,（二）溴量法 凡在5位取代基含有不飽和鍵的巴比妥類藥物，其不飽和鍵能與溴定量地發(fā)生加成反應(yīng)，故可采用溴量法測定其含量。,原料藥：剩余滴定法,反應(yīng)摩爾比12,注意事項,（1）操作中要防止溴和碘的逸失 （2）平行條件進行空白試驗可減少溴和碘逸失帶來的誤差。,四、含量測定,（二）溴量法,計算 司可巴比妥鈉的含量測定：取供試品0.1301g，依溴量法測定，已知供試品消耗0.0999mol/L硫代硫酸鈉滴定液25.05mL，空白消耗15.05mL；1mL0.1mol/L溴滴定液相當(dāng)于13.01mg的司可巴比妥鈉，試計算司可巴比妥鈉的含量。,四、含量測定,（三）

11、酸堿滴定法 巴比妥類藥物呈弱酸性，可作為一元酸以標(biāo)準(zhǔn)堿液直接滴定，或在非水溶液中用強堿溶液直接滴定。 1.在水-乙醇混合溶劑中的滴定 常以麝香草酚酞為指示劑，滴定至淡藍色為終點,原料藥：直接滴定法（空白校正）,T滴定度，每1ml滴定液相當(dāng)于被測組分的mg數(shù),V滴定時，供試品消耗滴定液的體積（ml）,V0滴定時，空白消耗滴定液的體積（ml）,ms供試品的質(zhì)量,F濃度校正因子,四、含量測定,（三）酸堿滴定法 2.在膠束水溶液中的滴定方法 本法是在有機表面活性劑的膠束水溶液中進行滴定，用指示劑或電位法指示終點。 因表面活性劑能改變巴比妥類藥物的離解平衡，使藥物的pKa增大，即使巴比妥類藥物酸性增強，

12、因此使滴定終點變化明顯。,四、含量測定,（三）酸堿滴定法 3.非水溶液滴定法 巴比妥類藥物在非水溶液中的酸性增強，用堿性標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定時，終點較為明顯，可獲得比較滿意的結(jié)果。 溶 劑：二甲基甲酰胺 滴定劑：甲醇鈉（鉀） 指示劑：麝香草酚藍,四、含量測定,（四）紫外分光光度法 巴比妥類藥物在酸性介質(zhì)中幾乎不電離，無明顯的紫外吸收。但在堿性介質(zhì)中電離為具有紫外吸收特征的結(jié)構(gòu)，因而可采用紫外分光光度法測定其含量。,巴比妥類藥物紫外吸收的有關(guān)數(shù)據(jù)見下表:,四、含量測定,（四）紫外分光光度法 1.直接測定的紫外分光光度法 本法是將供試品溶解后，根據(jù)溶液的pH，在最大吸收波長處，直接測定對照品溶液和供試品溶

13、液的吸收度，再計算藥物的含量。,（1）吸收系數(shù)法,（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線法,（四）紫外分光光度法,3. 對照法,（四）紫外分光光度法,四、含量測定,（四）紫外分光光度法 2.提取分離后的紫外分光光度法 根據(jù)巴比妥類藥物具有弱酸性，在氯仿等有機溶劑中易溶，而其鈉鹽在水中易溶的特點。 3.差示紫外分光光度法 本法是利用巴比妥類藥物在不同pH值溶液中的電離級數(shù)不同，因而產(chǎn)生紫外吸收光譜的情況不同，以此為依據(jù)設(shè)計測定方法。 該法常用于巴比妥類藥物的制劑分析，也可用于體內(nèi)巴比妥類藥物的監(jiān)測。,四、含量測定,（五）高效液相色譜法 高效液相色譜法多用于制劑及體液中巴比妥類藥物的含量測定,第五節(jié) 苯并二氮雜卓類藥物的

14、分析,一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì),地西泮,阿普唑侖,奧沙西泮,氯氮卓,（一）典型藥物,（二）主要理化性質(zhì),(一) 化學(xué)鑒別試驗 1.沉淀反應(yīng) 氯氮卓 橙紅色沉淀 鹽酸氟西泮 KBiI4 也生成橙紅色沉淀 放置后，沉淀顏色變深 因此可以相互區(qū)別。,二、鑒別試驗,阿普唑侖 + 遇硅鎢酸 白色沉淀，藥典中也用于鑒別。,2. 硫酸-熒光反應(yīng) 本類藥物溶于硫酸后，在紫外光（365nm）下，顯不同顏色的熒光。例如：,地西泮 黃綠色 黃色 氯氮卓 黃色 紫色 艾司唑侖 + H2SO4 亮綠色 + 稀硫酸 天藍色 硝西泮 淡藍色 藍綠色 奧沙西泮 淡黃綠色,二、鑒別試驗,(一) 化學(xué)鑒別試驗,1.氯化物的鑒別反應(yīng) 本類藥

15、物多為有機氯化合物，用氧瓶燃燒法破壞，顯氯化物反應(yīng)。Ch.P用于地西泮和三唑侖藥物的鑒別。,(二) 特征基團反應(yīng),二、鑒別試驗,2.水解后呈芳伯胺反應(yīng) 氯氮卓和奧沙西泮，其反應(yīng)如下：,二、鑒別試驗,(二) 特征基團反應(yīng),（三）紫外特征吸收和紅外吸收光譜 藥物名稱 溶 劑 濃度（g/ml） max（nm） A 地西泮 0.5%硫酸甲醇溶液 5 242 約0.51 282 約0.23 366 氯氮卓 鹽酸溶液(91000) 7 245,308 阿普唑侖 鹽酸溶液(91000) 12 264 鹽酸氟西泮 硫酸甲醇(136) 10 2392,2842 比值1.952.50 3622 氯硝西泮 0.5%硫酸甲醇溶液 10 2392,3072 奧沙西泮 乙醇 10 229, 3152(較弱) 紅外吸收光譜:已用于地西泮、阿普唑侖、艾司唑侖、鹽酸氟西 泮、氯硝西泮和奧沙西泮的鑒別。,二、鑒別試驗,（四）TLC法 1.常用的五種苯并二氮雜卓類藥物的TLC