1、第36講克隆技術(shù)1下面關(guān)于植物細(xì)胞工程的敘述，正確的是()不同種植物葉肉細(xì)胞融合時(shí)，應(yīng)先去掉細(xì)胞膜葉肉細(xì)胞脫分化后，可形成無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞葉肉細(xì)胞經(jīng)過再分化過程，可形成愈傷組織葉肉細(xì)胞離體培養(yǎng)時(shí)，可以表現(xiàn)出細(xì)胞全能性A BC D22012浙江模擬下列有關(guān)高等植物原生質(zhì)體制備和培養(yǎng)的敘述，正確的是()A纖維素酶和果膠酶混合液可用于制備懸浮培養(yǎng)細(xì)胞的原生質(zhì)體 B加入0.6 mol/L甘露醇的目的是保護(hù)纖維素酶和果膠酶 C從不同植物組織分離得到的原生質(zhì)體大小、形狀相同 D愈傷組織經(jīng)原生質(zhì)體培養(yǎng)均可得到再生植株3下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)敘述中，正確的是()A細(xì)胞的癌變發(fā)生于原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過

2、渡過程中B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、生長素和動(dòng)物血清等C動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得大量的細(xì)胞分泌蛋白D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前和培養(yǎng)過程中都要用胰蛋白酶處理4動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于()A培養(yǎng)基不同B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行C動(dòng)物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能D動(dòng)物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能5在生物工程中一般都要用到酶，下列酶中屬于動(dòng)物細(xì)胞工程最常用的工具酶的是()A限制性核酸內(nèi)切酶BDNA連接酶C果膠酶D胰蛋白酶6一只羊的卵細(xì)胞核被另一只羊的體細(xì)胞核置換后，這個(gè)卵細(xì)胞經(jīng)過多次分裂，再植入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育，結(jié)果產(chǎn)下一只羊羔。這種克隆技術(shù)具有多種用

3、途，但是不能()A有選擇地繁殖某一性別的家畜B繁殖家畜中的優(yōu)秀個(gè)體 C用于保存物種D改變動(dòng)物的基因型72013杭州月考下列有關(guān)克隆技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是()A同種植物不同基因型個(gè)體的細(xì)胞全能性的表達(dá)程度大不相同 B長期的動(dòng)物組織培養(yǎng)，經(jīng)常只能使單一類型的細(xì)胞保存下來C肝組織經(jīng)胰蛋白酶處理和懸浮培養(yǎng)可獲得肝細(xì)胞克隆D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)獲得的連續(xù)細(xì)胞系大多數(shù)具有異倍體核型82012浙江模擬下列有關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)的敘述正確的是()A動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中要注意細(xì)胞分裂素和生長素的適宜比例 B植物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，首先要用胰蛋白酶處理部分組織使細(xì)胞分散獲得單個(gè)細(xì)胞 C動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，有的連續(xù)細(xì)胞系獲得了不死性，但保留接觸

4、抑制現(xiàn)象，不致癌 D用纖維素酶和果膠酶水解法獲得的植物細(xì)胞原生質(zhì)體失去了全能性9植物組織培養(yǎng)是克隆植物的一種方法，過程如圖K361所示，回答相應(yīng)的問題：圖K361(1)為了獲得脫毒植株，外植體往往取自植物的花芽、葉芽等處的分生組織，原因是_。(2)培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除添加營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加植物激素，其目的是誘導(dǎo)外植體_。(3)在生產(chǎn)實(shí)踐中為獲得大量的細(xì)胞產(chǎn)物如：紫杉醇，可將_放入液體培養(yǎng)基中，經(jīng)機(jī)械作用分散成單個(gè)細(xì)胞，制備成細(xì)胞懸浮液，再經(jīng)過_即可獲得大量細(xì)胞。(4)組織培養(yǎng)過程需要植物生長和繁殖的最適條件，否則在光學(xué)顯微鏡下可能觀察到發(fā)生_異常，進(jìn)而使植物出現(xiàn)遺傳不穩(wěn)定甚至不育。(5)植物

5、組織培養(yǎng)技術(shù)不僅應(yīng)用于花卉、果樹的快速、大量繁殖以及脫毒植株的獲取，還廣泛用于_、_、_等育種過程中。102012太原模擬 如圖K362所示為培育農(nóng)作物新品種的過程示意圖。請回答：圖K362(1)圖示育種過程涉及的生物工程技術(shù)有植物體細(xì)胞雜交技術(shù)、_、_等。(2)圖中從愈傷組織到形成完整的新品種植株的途徑有兩條，具體通過哪條途徑主要取決于培養(yǎng)基中的_的種類及其濃度配比。(3)若僅用二倍體植物甲的未成熟花粉培養(yǎng)完整植株，稱為_植株，說明未成熟花粉具有_；這些植株只有通過_才能結(jié)實(shí)。(4)若要從大量培養(yǎng)的紫草愈傷組織中提取紫草素，則_條件是不需要的。A消毒滅菌 B充足光照C適宜溫度 D適宜養(yǎng)料和激

6、素(5)用植物組織培養(yǎng)制作的人工種子，可解決有些作物品種的_等問題(至少答出兩點(diǎn))。11回答下列與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的問題：(1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面_時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的_。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是_。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是_。(2)隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)_的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成_細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性_，細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)(糖蛋白)的量_。(3)現(xiàn)用某種大分子染料，對細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí)，觀察到死細(xì)胞被染色，而活細(xì)胞不染色，原因是

7、_。(4)檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目，最好選用細(xì)胞分裂到_期的細(xì)胞用顯微鏡進(jìn)行觀察。(5)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，通常在_條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下，細(xì)胞中_的活性降低，細(xì)胞_的速率降低。(6)給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后，發(fā)生了排斥現(xiàn)象，這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作_進(jìn)行攻擊。122012沈陽二模 科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長激素基因的奶牛，如果要加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育，可以對此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克隆(圖K363所示)，請結(jié)合圖示回答下列問題：圖K363(1)在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要對取自轉(zhuǎn)基因奶牛的組織細(xì)胞進(jìn)行分散處理，形成單個(gè)細(xì)胞，這個(gè)過程中需要利用_酶處理。(2)

8、形成重組細(xì)胞時(shí)應(yīng)選用_期的卵母細(xì)胞，去掉其細(xì)胞核的原因是_。(3)如果重組細(xì)胞為貼附性細(xì)胞，則在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)，會(huì)表現(xiàn)出_和_等特點(diǎn)。(4)圖中犢牛并非是對體細(xì)胞核供體母牛100 %的復(fù)制，其主要原因是_、_。(5)上圖中所示的生物技術(shù)整體被稱為_。其包括的具體生物技術(shù)有_、_等。轉(zhuǎn)基因奶牛的克隆成功，說明了動(dòng)物_具有全能性。132012衢州模擬基因型為AaBb的水稻(含24條染色體)的花藥通過無菌操作接入試管后在一定條件下形成試管苗。(1)愈傷組織是花粉細(xì)胞不斷分裂后形成的不規(guī)則的細(xì)胞團(tuán)，愈傷組織形成過程中，必須從培養(yǎng)基中獲得_和小分子有機(jī)物等營養(yǎng)物質(zhì)。(2)花藥在培養(yǎng)基所提供的特定條件下發(fā)

9、生多次分裂，形成愈傷組織，此過程叫_，細(xì)胞分裂的方式是_。(3)誘導(dǎo)愈傷組織分化出芽和根，最后長出植株。這個(gè)過程叫_。該植物是_植物，其特點(diǎn)是_，生產(chǎn)上沒有推廣應(yīng)用價(jià)值。(4)要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂生長的培養(yǎng)基中應(yīng)有_和_兩類激素。(5)愈傷組織分化是指愈傷組織形成芽和根再由芽發(fā)育成葉和莖。這一過程必須給予光照，其原因是：_；_。(6)試管苗的細(xì)胞核中含_個(gè)DNA分子。 (7)培育成的試管苗可能出現(xiàn)的基因型有_。1B解析 應(yīng)先去掉細(xì)胞壁；脫分化形成愈傷組織，故錯(cuò)。2A解析 植物的細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，故A正確；加入0.6 mol/L甘露醇的目的是保護(hù)植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁后獲得的原生質(zhì)體；從

10、不同植物組織分離得到的原生質(zhì)體大小不同，形狀都是球型。3D解析 細(xì)胞的癌變一般是在多次傳代培養(yǎng)后才會(huì)發(fā)生；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中不需要加入生長素，生長素是植物組織培養(yǎng)中使用的植物激素；在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，可以獲得細(xì)胞或者細(xì)胞代謝產(chǎn)物；在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前先要用胰蛋白酶處理，使得組織分散成細(xì)胞懸浮液進(jìn)行培養(yǎng)，在傳代過程中也要用胰蛋白酶處理，使細(xì)胞從培養(yǎng)瓶上脫離下來進(jìn)行分裝。4A解析 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，其中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。而植物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，通常含有水、礦質(zhì)元素、激素、蔗糖、氨基酸、瓊脂等。可見，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基與植物細(xì)胞培養(yǎng)

11、的培養(yǎng)基是不相同的。5D解析 基因工程用到的是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶；植物體細(xì)胞雜交技術(shù)用到的是纖維素酶和果膠酶；動(dòng)物細(xì)胞工程用到的是胰蛋白酶，它的作用是使動(dòng)物組織中的細(xì)胞相互分散成為單個(gè)的細(xì)胞，便于在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。6D解析 核移植得到的子代，細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)與供核親代完全相同，該技術(shù)不能用于改變動(dòng)物的基因型。7C解析 獲得細(xì)胞克隆的最基本要求是：必須保證分離出的細(xì)胞是一個(gè)而不是多個(gè)，即必須肯定所建立的克隆來源于單個(gè)細(xì)胞，故C錯(cuò)誤。8C解析 細(xì)胞分裂素和生長素用于植物組織培養(yǎng)過程；胰蛋白酶用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程，處理組織使細(xì)胞分散獲得單個(gè)細(xì)胞；失去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體仍保留全能性。9

12、(1)這些部位病毒極少(2)脫分化和再分化(3)愈傷組織細(xì)胞分裂(4)染色體結(jié)構(gòu)與數(shù)目(5)植物體細(xì)胞雜交育種基因工程育種單倍體育種解析 (1)植物的花芽、葉芽等處的分生組織病毒極少，常被用于獲得脫毒植株。(2)植物組織培養(yǎng)過程中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。(3)植物組織培養(yǎng)過程中，要獲得細(xì)胞產(chǎn)物，只需要把外植體培養(yǎng)到愈傷組織階段即可。(4)光學(xué)顯微鏡下可能觀察到的變異類型是染色體畸變。(5)植物組織培養(yǎng)技術(shù)廣泛應(yīng)用于花卉、果樹的快速繁殖以及脫毒植株的獲取和植物體細(xì)胞雜交育種、基因工程育種、單倍體育種等育種過程。10(1)基因工程植物組織培養(yǎng)(2)植物激素(3

13、)單倍體全能性染色體數(shù)目加倍(4)B(5)多年不結(jié)種子、果實(shí)，雜種優(yōu)勢衰退，生產(chǎn)種子受到季節(jié)、氣候和地域的影響，生產(chǎn)種子占用大量土地(答出兩點(diǎn)即可)解析 (1)根據(jù)圖示中新細(xì)胞獲得的兩個(gè)途徑可以看出，涉及的技術(shù)有植物體細(xì)胞雜交技術(shù)和基因工程。從新細(xì)胞形成愈傷組織再到形成新品種，可以看出涉及植物組織培養(yǎng)。(2)愈傷組織再分化形成新植株的途徑，受到植物激素的調(diào)控?？梢愿淖冎参锛に氐姆N類及濃度來進(jìn)行調(diào)控。(3)花粉是減數(shù)分裂形成的，是正常體細(xì)胞染色體數(shù)目的一半，經(jīng)培養(yǎng)獲得的植株為單倍體植株。這也屬于植物組織培養(yǎng)過程，遵循的原理是植物細(xì)胞的全能性。但是正常二倍體所產(chǎn)生的單倍體植株高度不育，因?yàn)轶w細(xì)胞內(nèi)

14、的染色體成單存在，只有通過染色體數(shù)目加倍，恢復(fù)成正常的二倍體才能正常結(jié)實(shí)。(4)培養(yǎng)紫草的愈傷組織提取紫草素，不需要光照。(5)人工種子相比傳統(tǒng)的種子，可解決一些問題，如：多年不結(jié)種子、果實(shí)，雜種優(yōu)勢衰退，生產(chǎn)種子受到季節(jié)、氣候和地域的影響，生產(chǎn)種子占用大量土地等。11(1)相互接觸接觸抑制單層(或一層)胰蛋白酶(2)衰老甚至死亡不死性降低減少(3)由于活細(xì)胞的膜具有選擇透性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，故活細(xì)胞不能著色(或由于死細(xì)胞的膜喪失了選擇透性，大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色)(4)中(5)冷凍(或超低溫、液氮)酶新陳代謝(6)抗原解析 在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)出接觸抑制現(xiàn)象

15、，此時(shí)是單層細(xì)胞。用胰蛋白酶可以使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離開來。隨著細(xì)胞傳代培養(yǎng)代數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)衰老甚至死亡的現(xiàn)象，但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)改變而變成不死性細(xì)胞。由于活細(xì)胞的膜具選擇透性，大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，而死細(xì)胞的細(xì)胞膜喪失選擇透性，大分子染料能夠進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)而著色。由于中期染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰，因此最好選用細(xì)胞分裂到中期的細(xì)胞用顯微鏡觀察染色體數(shù)目。在冷凍(或超低溫、液氮)條件下，細(xì)胞中酶的活性降低，細(xì)胞新陳代謝的速率降低，因此通常在此條件下保存細(xì)胞。機(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作抗原攻擊，會(huì)發(fā)生排斥現(xiàn)象。12(1)胰蛋白(或膠原蛋白)(

16、2)減中使克隆出的動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細(xì)胞(或避免卵細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)對后代造成干擾，其他合理答案也可)(3)細(xì)胞貼壁接觸抑制(兩空順序可以顛倒)(4)生物的性狀受細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同控制生物的性狀還受環(huán)境因素的影響(兩空順序可以顛倒，其他合理答案可酌情給分)(5)核移植(或體細(xì)胞核移植)細(xì)胞培養(yǎng)胚胎移植體細(xì)胞的細(xì)胞核解析 (1)胰蛋白酶可以水解動(dòng)物細(xì)胞間的蛋白質(zhì)成分，使細(xì)胞相互分離。(2)利用核移植形成重組細(xì)胞時(shí)需要用發(fā)育至減中期的卵母細(xì)胞，若不對其做去核處理，重組細(xì)胞的遺傳物質(zhì)含量就不正常。(3)貼附性細(xì)胞表現(xiàn)出貼壁的特性，并且會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，故要定期用胰蛋白酶將貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來。(4)重組細(xì)胞的遺傳物質(zhì)源于體細(xì)胞的細(xì)胞核和卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，同時(shí)環(huán)境對其表現(xiàn)型也有影響。13(1)水、無機(jī)鹽(2)脫分化有絲分裂(3)再分化單倍體長勢弱小，高度不育(4)細(xì)胞分裂素生長素(5)光是葉綠體形成的必要條件光合作用需要光(6)12(7)AB、aB、Ab、ab 解析 (1)愈傷組織不能進(jìn)行光合作用，必須不斷地從培養(yǎng)基中吸取營養(yǎng)。供生物細(xì)胞生活的營養(yǎng)物質(zhì)主要有無機(jī)物(水、無機(jī)鹽)和有機(jī)物(糖類、脂類