1、第2課時動物細胞融合和單克隆抗體1掌握動物細胞融合的原理、方法、過程與意義。2掌握制備單克隆抗體的方法、過程和應(yīng)用。(重、難點)動 物 細 胞 融 合1含義：在一定的條件下將兩個或多個動物細胞融合為一個細胞的過程。2結(jié)果：形成雜種細胞，如鼠雞雜種細胞。3促融方法(1)物理法：如離心、振蕩、電場法。(2)化學(xué)法：如聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑。(3)生物法：如仙臺病毒作為誘導(dǎo)劑。4應(yīng)用：制備單克隆抗體。科學(xué)家經(jīng)過長期的探索，終于實現(xiàn)了讓不同種動物的體細胞進行雜交的設(shè)想，觀察下圖，圖中有多個A細胞和B細胞。探討：動物細胞融合的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是什么？提示：細胞膜的流動性。探討：若只考慮兩兩融合，則誘導(dǎo)細胞融合后可能

2、形成幾種融合細胞？融合后的細胞在遺傳上有何特點？提示：三種融合細胞，即同種細胞融合(兩種)和不同種細胞融合(一種)。特點：具有兩個細胞的遺傳信息。探討：經(jīng)促融處理后的細胞是否均需進一步篩選？提示：是。促融處理后，均會出現(xiàn)不同種融合細胞，所以需要對處理后的細胞進行篩選，選擇出符合要求的雜交細胞。探討：動物細胞完成融合的標志是什么？提示：動物細胞融合時，先是細胞膜發(fā)生融合，然后是細胞核的融合。當兩個細胞核融合后形成具有單核的雜交細胞，則標志著動物細胞融合的完成。探討：比較動物細胞融合與植物體細胞雜交所用的促融方法的異同。提示：二者都可以采用離心、振動、電場法等物理方法，或者使用化學(xué)試劑聚乙二醇進行

3、促融，除上述方法外，動物細胞融合還可以采用滅活的病毒進行促融。1動物細胞融合(1)操作步驟：細胞準備細胞融合：加促融因子于待融合的細胞之中，誘導(dǎo)融合雜種細胞選擇：利用選擇性培養(yǎng)基等，使親本細胞死亡，而讓雜種細胞存活雜種細胞克?。簩x出的雜種細胞進行克隆，經(jīng)過培養(yǎng)，就能獲得所需要的細胞(2)過程分析：細胞融合的過程包括細胞膜融合、細胞質(zhì)融合和細胞核融合，其中細胞膜融合是細胞融合的先導(dǎo)，在細胞膜融合中體現(xiàn)出細胞膜具有一定的流動性。2植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合原理細胞膜的流動性、細胞的全能性細胞膜的流動性、細胞的增殖融合前處理先除去細胞壁先使細胞分散開使用的

4、酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶誘導(dǎo)手段物理法：離心、電場法、振動化學(xué)法：聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)除物理法和化學(xué)法外，也可用滅活的病毒誘導(dǎo)過程 結(jié)果雜種植株雜交細胞應(yīng)用培育植物新品種主要用于制備單克隆抗體意義克服了遠緣雜交不親和的障礙，打破了生殖隔離，擴展了雜交的親本組合1近幾年神舟飛船頻頻成功發(fā)射和著陸。在飛船上，科學(xué)家進行了無人搭載的空間動物細胞融合實驗。該實驗所依據(jù)的原理和促進動物細胞融合時最常用的方法分別是()A細胞的全能性、滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)融合B細胞的全能性、電場法融合C細胞膜的流動性、滅活仙臺病毒誘導(dǎo)融合D細胞膜的流動性、電場法融合【解析】不管是動物細胞融合，還是原生質(zhì)體融合，都是利用了細胞

5、膜具有流動性這一原理。動物細胞融合時最常用的誘導(dǎo)手段就是利用滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)?！敬鸢浮緾2下圖所示為細胞融合技術(shù)的一些過程： (1)從A細胞和B細胞到C細胞的過程中，采用的方法中與誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合不同的是_處理。(2)若A、B細胞為單倍體煙草植物的體細胞，那么這樣的細胞已經(jīng)用酶降解脫掉了_。這種酶可能是_、_，由此生成的細胞經(jīng)培養(yǎng)形成的細胞團稱為_。(3)若A、B分別是基因型為Hhrr、hhRr兩個煙草品種的花粉，且這兩對基因分別位于兩對同源染色體上。由于一對隱性純合基因(rr或hh)的作用，在光照強度大于800 lx時都不能生長。要想從融合細胞的培養(yǎng)液中分離出基因型為HhRr的雜種細胞

6、，較為簡便的篩選方法是_。(4)若將基因型為AaBB的番茄細胞與基因型為AAbb的番茄細胞融合，由融合細胞培養(yǎng)成的愈傷組織細胞的基因型是_。(5)若A、B分別為骨髓瘤細胞和B淋巴細胞，則D細胞的特點是_。由D細胞產(chǎn)生的抗體與普通血清抗體相比較，具有_的特點。(6)若將染色體組成為2AXX的人細胞與染色體組成為2BXX的鼠細胞融合，培育成的人鼠細胞的染色體組成是_?！窘馕觥?1)動物細胞融合特有的方法是用滅活的病毒誘導(dǎo)融合。(2)植物細胞有細胞壁，若A、B細胞為單倍體煙草植物的體細胞，那么這樣的細胞已經(jīng)用纖維素酶和果膠酶脫掉了細胞壁；植物體細胞雜交獲得的雜種細胞，經(jīng)脫分化形成愈傷組織。(3)A是

7、基因型為Hhrr的煙草的花粉，故其基因型為Hr、hr，B是基因型為hhRr的煙草的花粉，故其基因型為hR、hr，因此經(jīng)細胞融合可能形成的融合細胞有：HHrr、hhrr、hhRR、Hhrr、hhRr、HhRr，共6種。分析這6種細胞的基因型可知，除HhRr之外均有一對隱性純合基因(rr或hh)，即在光照強度大于800 lx時都不能生長，因此獲取基因型為HhRr的雜種細胞，較為簡便的篩選方法是給予大于800 lx的光照。(4)、(6)細胞融合后的染色體或基因分別是兩種細胞的染色體或基因累加。(5)A、B分別為骨髓瘤細胞和B淋巴細胞，則D細胞為雜交瘤細胞，其特點是既能無限繁殖，又能產(chǎn)生特定的抗體。產(chǎn)

8、生的抗體為單克隆抗體，同血清抗體相比，它具有特異性強、靈敏度高、可大量制備等特點?！敬鸢浮?1)滅活的病毒(2)細胞壁纖維素酶果膠酶愈傷組織(3)給予大于800 lx的光照(4)AAAaBBbb(5)既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定的抗體特異性強、靈敏度高、可大量制備(6)2A2BXXXX單 克 隆 抗 體1制備過程 單克隆抗體。2雜交瘤細胞的特點：能迅速大量增殖、并能產(chǎn)生專一抗體。3單克隆抗體的成分：蛋白質(zhì)。4單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強、純度高、靈敏度高、產(chǎn)量大等。5單克隆抗體的應(yīng)用(1)用于治療惡性腫瘤。(2)治療免疫系統(tǒng)紊亂引起的疾病。(3)用于器官移植。長期以來，人們生產(chǎn)抗體的常規(guī)方法是向動

9、物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動物產(chǎn)生抗體，然后，從動物血清中分離所需抗體。結(jié)合以上材料，探究如下問題：探討：為什么要對小鼠注射抗原？提示：以獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細胞(漿細胞)。誘導(dǎo)融合的B淋巴細胞是經(jīng)免疫產(chǎn)生的B淋巴細胞，未經(jīng)免疫的B淋巴細胞不能產(chǎn)生抗體。探討：制備單克隆抗體時，為什么要選用B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞？提示：每一個B淋巴細胞能分泌一種特異性抗體，但不能無限增殖；骨髓瘤細胞可大量快速增殖，卻不能產(chǎn)生抗體。將兩種細胞融合形成的雜交瘤細胞，既能產(chǎn)生特異性抗體又能快速增殖。探討：細胞融合后會得到哪些雜交細胞？我們需要的是哪種雜交細胞？提示：融合后形成的雜交細胞有多種，

10、若僅考慮細胞兩兩融合的情況，融合細胞有三種，即兩個B淋巴細胞的融合細胞、兩個骨髓瘤細胞的融合細胞、一個B淋巴細胞與一個骨髓瘤細胞的融合細胞。其中最后一種是我們需要的。1原理：要獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的漿細胞，形成細胞群；將效應(yīng)B細胞與骨髓瘤細胞融合，其原因如下：(1)每一個效應(yīng)B細胞只能分泌一種特異性抗體；不同種類的效應(yīng)B細胞分泌的抗體不同。(2)效應(yīng)B細胞在體外培養(yǎng)時不能無限增殖；骨髓瘤細胞能無限增殖。(3)效應(yīng)B細胞與骨髓瘤細胞的雜交細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。2單克隆抗體的制備過程3雜交瘤細胞的特點：無限增殖，產(chǎn)生單克隆抗體。4制備單克隆抗體的兩次篩選第一次篩選：由于

11、細胞融合是隨機的，因此細胞混合物中融合細胞將以多種形式出現(xiàn)，因此必須從中篩選出既能分泌抗體同時又能大量增殖的雜交瘤細胞。第二次篩選：從雜交瘤細胞群中選出能產(chǎn)生專一抗體的特異性雜交瘤細胞。5單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強、純度高、靈敏度高、產(chǎn)量大，容易標準化生產(chǎn)等。6單克隆抗體的應(yīng)用(1)治療惡性腫瘤，目前進入臨床試驗的單克隆抗體中有30%以上用于治療各種腫瘤。(2)單克隆抗體還可以用于治療由于免疫系統(tǒng)的紊亂導(dǎo)致的各種疾病。(3)單克隆抗體用于器官移植的治療等等。1應(yīng)用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗X抗體的具體操作步驟如下，下列相關(guān)敘述中不正確的是()將X抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗X抗體的B淋巴細

12、胞從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取骨髓瘤細胞利用促細胞融合因子使兩種細胞發(fā)生融合將雜交瘤細胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)篩選出能產(chǎn)生抗X抗體的雜交瘤細胞從腹水中提取抗體A實驗順序應(yīng)當是B過程中產(chǎn)生的多個雜交瘤細胞也為克隆C過程獲得的細胞均可無限增殖D到的過程中通常要經(jīng)過兩次篩選【解析】過程獲得的細胞有AA、BB、AB型三種類型，其中兩種可以無限增殖，兩個B淋巴細胞融合后的細胞不能無限增殖。【答案】C2(2016吉林實驗中學(xué)模擬)下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。請根據(jù)示意圖回答下列問題。(1)單克隆抗體技術(shù)是_技術(shù)中最重要的用途。將特定的抗原注入小鼠體內(nèi)，其目的是使小鼠產(chǎn)生_細胞。(2)單克隆抗體的化學(xué)本質(zhì)是_

13、；合成與分泌單克隆抗體涉及到的細胞器是_、_、_、_。(3)骨髓瘤細胞與某些淋巴細胞混合在一起，細胞融合完成后，在培養(yǎng)基中有_種兩兩融合的細胞，融合的原理是_，融合的方法除了電場法外，還可以用化學(xué)誘導(dǎo)劑_或滅活的_。(4)從圖中可以看出，單克隆抗體制備經(jīng)過了_次篩選，第一次篩選得到的細胞是_，該細胞的特點是既能在體外_，又能分泌_抗體?！窘馕觥?1)單克隆抗體的制備利用了動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)的技術(shù)，單克隆抗體技術(shù)是動物細胞融合技術(shù)中最重要的用途。特定抗原注射入小鼠體內(nèi)，目的是刺激機體在體液免疫中產(chǎn)生漿細胞，因為漿細胞能產(chǎn)生抗體。(2)單克隆抗體的化學(xué)本質(zhì)是分泌蛋白，參與分泌單克隆抗體的細

14、胞器是核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體，核糖體是合成場所，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是初步加工場所，高爾基體是再加工、分類和包裝場所，線粒體為這些過程提供能量。(3)骨髓瘤細胞與B細胞融合后，培養(yǎng)基中有3種融合細胞，為B細胞和B細胞的融合細胞、骨髓瘤細胞和骨髓瘤細胞的融合細胞、B細胞和骨髓瘤細胞的融合細胞。(4)單克隆抗體的制備經(jīng)過了兩次篩選，第一次篩選是為了將融合的雜交瘤細胞篩選出來，第二次篩選是為了將能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞篩選出來。雜交瘤細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性的抗體。【答案】(1)動物細胞融合漿(2)球蛋白(或蛋白質(zhì))核糖體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高爾基體線粒體(3)三細胞膜具有一定的流動性聚乙二醇(PEG)病毒

15、(4)兩雜交瘤細胞無限增殖特異性1滅活的仙臺病毒的抗原性和感染力是()A失去抗原性，具有感染力B具有抗原性，也具有感染力C失去抗原性，也失去感染力D具有抗原性，失去感染力【解析】滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細菌失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。【答案】D2動物細胞融合的目的中最重要的用途之一是()A克服遠緣雜交不親和B制備單克隆抗體C培育新物種D生產(chǎn)雜交細胞【解析】動物細胞融合不像植物體細胞雜交那樣主要是為了克服遠緣雜交不親和的障礙，以培育新品種。另外，植物體細胞雜交還應(yīng)用了植物體細胞的全能性，動物細胞作為整體，它的全能性受到限制，目前只見到高度分化的細胞核在去核卵細胞中表現(xiàn)

16、出全能性，還未見到融合細胞核表現(xiàn)出全能性的例子，因此A、C不符合題意。生產(chǎn)雜交細胞，不是細胞融合的主要目的，雜交細胞只是細胞融合完成后所形成的結(jié)構(gòu)名稱?！敬鸢浮緽3單克隆抗體與血清抗體相比，其優(yōu)越之處在于()A單克隆抗體可作為藥物治療腫瘤等疾病B單克隆抗體可以在體外制備C單克隆抗體特異性強、靈敏度高，并可大量制備D單克隆抗體的制備過程簡單，操作方便【解析】普通的抗體其實也可作為藥物的載體，并可在體外通過細胞培養(yǎng)制備，但其純度低、特異性差。單克隆抗體的制備過程比普通抗體的制備過程要復(fù)雜得多?！敬鸢浮緾4要想獲得大量的單克隆抗體就必須用單個的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合后，進行無性繁殖，形成細胞群，

17、其原因是()A在體外培養(yǎng)條件下，B淋巴細胞可以無限增殖B在動物體內(nèi)B淋巴細胞可產(chǎn)生多達百萬種以上的抗體C每一個B淋巴細胞都參與特異性免疫反應(yīng)D每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體【解析】B淋巴細胞壽命短，它能夠參與特異性免疫，但不一定都參與；B淋巴細胞的免疫具特異性，即每一個B淋巴細胞只能產(chǎn)生一種與特定抗原結(jié)合的抗體?！敬鸢浮緿5利用動物細胞融合技術(shù)可以獲得雜交瘤細胞，下列針對單個雜交瘤細胞的敘述不正確的是()A經(jīng)篩選過程方可獲得B具有雙親細胞的遺傳物質(zhì)C可分泌多種特異性抗體D體外培養(yǎng)條件下可大量增殖【解析】雜交瘤細胞的制備是動物細胞融合技術(shù)的應(yīng)用，其過程是從已免疫的小鼠體內(nèi)取出B淋巴細胞和骨

18、髓瘤細胞，通過物理、化學(xué)或生物方法使之融合形成雜交瘤細胞，單個雜交瘤細胞只能分泌一種抗體?！敬鸢浮緾課堂小結(jié)：網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建核心回扣1.動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。2.動物細胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電場法等。3.動物細胞融合的主要用途是制備單克隆抗體。4.雜交瘤細胞是由經(jīng)免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合而成的，具有既能無限增殖又能產(chǎn)生專一抗體的能力。5.單克隆抗體最主要的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高，并可大量制備。學(xué)業(yè)分層測評(八)(建議用時：45分鐘)學(xué)業(yè)達標1關(guān)于動物細胞融合的說法，不正確的是()A動物細胞融合也稱細胞雜交，是

19、指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程B動物細胞融合后形成的具有原來兩個或多個動物細胞遺傳信息的單核細胞稱為雜交細胞C常用的誘導(dǎo)動物細胞融合的因素有：聚乙二醇、滅活的仙臺病毒、電場法、紫外線照射D細胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能【解析】紫外線照射常用做人工誘變，可誘發(fā)基因突變，而不是誘導(dǎo)細胞融合的因素?！敬鸢浮緾2生產(chǎn)單克隆抗體時，在培養(yǎng)液中加入某種試劑能篩選出雜交瘤細胞，因為該試劑()A能抑制淋巴細胞和雜交瘤細胞的DNA復(fù)制B能阻止淋巴細胞的原癌基因被激活C選擇性抑制骨髓瘤細胞的DNA復(fù)制D能阻止雜交瘤細胞核糖體上所有蛋白質(zhì)的合成【解析】由于骨髓瘤細胞與雜交瘤細胞

20、都能無限增殖，而生產(chǎn)單克隆抗體需要選擇出雜交瘤細胞，所以需要用試劑抑制骨髓瘤細胞DNA的復(fù)制。因此，該試劑的作用為選擇性抑制骨髓瘤細胞的DNA復(fù)制?！敬鸢浮緾3制備單克隆抗體所采用的細胞工程技術(shù)包括()細胞培養(yǎng)細胞融合動物體細胞克隆細胞核移植ABCD【解析】制備單克隆抗體時，首先采用細胞融合技術(shù)得到雜交瘤細胞，再采用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)獲得能產(chǎn)生所需抗體的細胞群。【答案】A4下列對植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較，描述正確的是() A動物細胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，誘導(dǎo)融合的方法也完全相同B兩者都可以跨越種屬間的生殖隔離，突破有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能C利用動物細胞融合

21、技術(shù)而發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為試管嬰兒的誕生開辟了新途徑D目前科學(xué)家終于實現(xiàn)了兩個植物物種間的體細胞雜交，得到了同時具有兩個物種遺傳物質(zhì)的“超級植物”，并使它們的性狀全部得以體現(xiàn)【解析】動物細胞融合可用滅活的病毒誘導(dǎo)，而植物原生質(zhì)體則不能；雜交瘤技術(shù)是細胞工程技術(shù)，而試管嬰兒則是胚胎工程內(nèi)容；生物性狀的體現(xiàn)是基因型與環(huán)境共同作用的結(jié)果，“超級植物”具有兩個親本的遺傳物質(zhì)，但性狀不一定能全部表達?！敬鸢浮緽5利用細胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是()A用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體B體外培養(yǎng)單個B淋巴細胞可以獲得大

22、量針對SARS病毒的單克隆抗體C將等量B淋巴細胞和骨髓瘤細胞混合，經(jīng)聚乙二醇誘導(dǎo)融合后的細胞均為雜交瘤細胞D利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者【解析】用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，小鼠血清中的抗體會有多種，不能稱為單克隆抗體。B淋巴細胞是高度分化的細胞，在體外培養(yǎng)的條件下不能無限分裂，故不能獲得大量針對SARS病毒的抗體。將等量的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞混合，經(jīng)聚乙二醇誘導(dǎo)融合后的細胞有雜交瘤細胞、B淋巴細胞自身融合細胞和骨髓瘤細胞自身融合細胞等多種類型。利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法診斷出病毒感染者，是單克隆抗體的重要應(yīng)

23、用。【答案】D6通過細胞工程生產(chǎn)單克隆抗體時，通常要經(jīng)過三次篩選：選出能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞在特定培養(yǎng)基中篩選雜交瘤細胞選出能產(chǎn)生特定抗體并能大量增殖的細胞群，這三個過程的先后順序是()ABCD【解析】根據(jù)單克隆抗體的制備過程，首先是選出能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞漿細胞，其次是篩選出雜交瘤細胞，最后是篩選出能產(chǎn)生特定抗體并能大量增殖的雜交瘤細胞?！敬鸢浮緽7關(guān)于單克隆抗體，下列敘述不正確的是()A可以制成診斷盒，用于疾病的診斷B可以在生物體內(nèi)生產(chǎn)，不能體外生產(chǎn)C具有特異性強、純度高、靈敏度高等優(yōu)點D可以與藥物結(jié)合，用于病變細胞的定向治療【解析】雜交瘤細胞的制備是動物細胞融合技術(shù)的應(yīng)用，其過程是從已

24、免疫的小鼠體內(nèi)取出B淋巴細胞和骨髓瘤細胞，通過物理、化學(xué)或生物方法使之融合形成雜交瘤細胞，經(jīng)過篩選與培養(yǎng)，可得到能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，再經(jīng)過體內(nèi)或體外培養(yǎng)可獲得單一抗體，因而具有較強的特異性。單克隆抗體還具有純度高、靈敏度高等優(yōu)點。由于單克隆抗體具有較強的特異性，所以可制成診斷盒用于疾病診斷，也可以與藥物結(jié)合，用于病變細胞的定向治療。【答案】B8美國某研究小組在科學(xué)雜志上撰文透露，他們利用成年豬的動脈血管細胞和能夠模擬胚胎環(huán)境的新型生物效應(yīng)器，成功地在實驗室里培育出了新的動脈血管。這種血管的外形和功能都與真的血管一樣。這一研究成果是生物組織培養(yǎng)工程領(lǐng)域的重大進展。下列關(guān)于以上技術(shù)的敘述中

25、，不正確的是()A這項技術(shù)屬于動物細胞工程的范疇B這項技術(shù)的基礎(chǔ)是動物細胞培養(yǎng)技術(shù)C這項技術(shù)的關(guān)鍵是要激發(fā)血管細胞的“全能性”D這項技術(shù)的關(guān)鍵是要激發(fā)血管細胞發(fā)育成血管的潛能【解析】題干中的過程屬于“治療性克隆”，是以動物細胞培養(yǎng)為基礎(chǔ)的，它只是發(fā)育成了血管而并未形成一個完整的個體，不能體現(xiàn)血管細胞的“全能性”，只是激發(fā)了血管細胞發(fā)育成血管的潛能?！敬鸢浮緾9用動物細胞工程技術(shù)制備單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是()A將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞B用氯化鈣作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合C篩選雜交瘤細胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞群，培養(yǎng)后提取單

26、克隆抗體D該雜交瘤細胞株的增殖方式和產(chǎn)物分別是有絲分裂和單克隆抗體【解析】B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合需要滅活的病毒、聚乙二醇或物理因素來誘導(dǎo)。氯化鈣不能作為誘導(dǎo)劑，氯化鈣的作用是在基因工程中用于提高細胞壁的通透性，便于重組質(zhì)粒進入微生物細胞內(nèi)?！敬鸢浮緽101984年，德國科學(xué)家柯勒和阿根廷科學(xué)家米勒斯坦由于發(fā)展了單克隆抗體技術(shù)，完善了極微量蛋白質(zhì)的檢測技術(shù)而獲得了諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。如圖是單克隆抗體制備示意圖，請據(jù)圖回答下列問題。(1)據(jù)圖可知，_技術(shù)是動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，而_技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。(2)圖中過程1常用的促融劑是_，過程2常在_培養(yǎng)基中完

27、成。(3)A細胞為_細胞，其特點是_。(4)合成的單克隆抗體最終可以從_和_中提取。【解析】(1)動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是動物細胞培養(yǎng)技術(shù)，細胞融合是在自發(fā)或人工誘導(dǎo)下，兩個或多個細胞或原生質(zhì)體融合形成一個雜種細胞，該技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。(2)過程1中細胞融合的誘導(dǎo)物種類很多，常用的方法主要有生物法(如利用滅活的仙臺病毒誘導(dǎo))、化學(xué)法(如利用聚乙二醇誘導(dǎo))和物理法(如利用電場法誘導(dǎo))。目前應(yīng)用最廣泛的是利用聚乙二醇誘導(dǎo)，因為它易得、簡便，且融合效果穩(wěn)定。動植物細胞融合方法不完全相同，生物法(如利用滅活仙臺病毒誘導(dǎo))是動物細胞融合所特有的。過程2是單克隆抗體技術(shù)的第

28、一次篩選(在特定的選擇性培養(yǎng)基上)，目的是篩選出骨髓瘤細胞與經(jīng)過免疫的B淋巴細胞融合的雜交瘤細胞。(3)A細胞為雜交瘤細胞，雜交瘤細胞具有骨髓瘤細胞與經(jīng)過免疫的B淋巴細胞的遺傳物質(zhì)，因而具有既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一性抗體的特點。(4)雜交瘤細胞的培養(yǎng)一般有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種方式，體外培養(yǎng)是在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)后從培養(yǎng)液中提取單克隆抗體；體內(nèi)培養(yǎng)是在小鼠腹腔中培養(yǎng)，培養(yǎng)后從小鼠腹水中提取單克隆抗體。【答案】(1)動物細胞培養(yǎng)細胞融合(2)仙臺病毒(或聚乙二醇、電場法)選擇性(3)雜交瘤既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一性抗體(4)培養(yǎng)液小鼠腹水能力提升11(2016北京市重點中學(xué)模擬)

29、下圖表示植物細胞或動物細胞融合的簡略過程。有關(guān)敘述中，不正確的是() A在將A和B兩種植物細胞進行體細胞雜交前，必須先利用酶解法去除細胞的有關(guān)結(jié)構(gòu)B若該過程是制備人抗某病毒的單克隆抗體的過程，則在培養(yǎng)D細胞的培養(yǎng)液中通常要加入一定量抗生素、血清等物質(zhì)C與傳統(tǒng)的有性雜交相比，細胞融合技術(shù)優(yōu)越性在于定向地改造生物的性狀D人工誘導(dǎo)動物細胞融合可用滅活的病毒作為誘導(dǎo)劑，而植物細胞融合不能【解析】兩種植物細胞進行體細胞雜交前，必須先利用酶解法去除細胞壁，制備原生質(zhì)體，A正確；在制備人抗某病毒的單克隆抗體的過程中，需在培養(yǎng)液中加入一定量抗生素、血清等物質(zhì)，B正確；與傳統(tǒng)的有性雜交相比，細胞融合技術(shù)優(yōu)越性在

30、于可以克服遠緣雜交的不親和障礙，但不能定向地改造生物的性狀，C錯；滅活的病毒作為誘導(dǎo)劑是動物細胞融合特有的人工誘導(dǎo)方法，D正確?！敬鸢浮緾12(2013重慶高考)如圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述，正確的是()A是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細胞B中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細胞的形成C同時具有脾臟細胞和鼠骨髓瘤細胞的特性D是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細胞群【解析】明確單克隆抗體制備過程的幾個關(guān)鍵環(huán)節(jié)是準確解答本題的關(guān)鍵。是從小鼠脾臟中獲得的能產(chǎn)生抗體的漿細胞，A項錯誤；中應(yīng)該使用能促進細胞融合的促融劑，如聚乙二醇等，B項錯誤；同時具有從脾臟中分離出的漿細胞和骨髓

31、瘤細胞的特性，C項錯誤；是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群，D項正確。【答案】D13核苷酸合成有兩個途徑，物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑(如圖)。正常細胞內(nèi)含有補救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶，制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶。現(xiàn)用加入H、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”來篩選特定的雜交瘤細胞。關(guān)于篩選原理的敘述，正確的是()A免疫的B細胞及其互相融合細胞因全合成途徑被A阻斷而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖B骨髓瘤細胞及其互相融合細胞因無法進行上述兩個途徑而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖C雜交瘤細胞因為可以進行上述兩個途徑所以能在HAT培養(yǎng)基上大量增殖DHAT培養(yǎng)基上篩選出的所有雜交瘤細胞既能大量增殖又能產(chǎn)生高純度的目標抗體【解析】免疫B細胞及其互相融合細胞均屬于成熟細胞，不能增殖，A錯誤；骨髓瘤細胞及其互相融合細胞缺乏轉(zhuǎn)化酶，又因HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑，所以在HAT培養(yǎng)基上不能增殖，B正確；雜交瘤細胞因為可以進行補救途徑能夠在HAT培養(yǎng)基上大量繁殖，C錯誤；HAT培養(yǎng)基上篩選出的雜交瘤細胞能大量增殖，也能產(chǎn)生抗體