1、第八章 磺胺類(lèi)和喹諾酮類(lèi)藥物的分析,第一節(jié) 磺胺類(lèi)藥物的分析,對(duì)氨基苯磺酰胺衍生物,N1取代物：母體結(jié)構(gòu)中磺酰氨基上的一個(gè)氫原子被其它基團(tuán)取代后的衍生物。 N4取代物：母體結(jié)構(gòu)中對(duì)位氨基上的一個(gè)氫原子被其他基團(tuán)取代后的衍生物。 N1、N4取代物：母體結(jié)構(gòu)中N1和N 4上各有一個(gè)氫原子被取代的衍生物。,一、常用藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì),常用藥物化學(xué)結(jié)構(gòu),兩性化合物：ArNH2顯弱堿性；磺酰胺基N1上的H較活潑，即具有一定的酸性。因此可溶于酸性或堿性溶液中。 與金屬離子生成沉淀：銅鹽沉淀的顏色隨N1取代基的不同而異，有的還有顏色變化過(guò)程，常用于磺胺類(lèi)藥物的鑒別。 可發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)：產(chǎn)生有色沉

2、淀,性 質(zhì),與芳醛在酸性溶液中縮合：生成有色的希夫堿。 N1上的芳雜環(huán)取代基具有堿性，可與有機(jī)堿沉淀劑反應(yīng)：生成沉淀。 乙?；磻?yīng)：芳伯氨基經(jīng)醋酐?；螅匆阴；?，在顯微鏡下觀察，都具有特殊的結(jié)晶形狀，可做鑒別反應(yīng)。,性 質(zhì),二、磺胺類(lèi)藥物的鑒別,1化學(xué)鑒別法 （1）銅鹽反應(yīng),可初步區(qū)別結(jié)構(gòu)類(lèi)似的磺胺藥,表8-1 磺胺類(lèi)藥物與銅鹽的反應(yīng),（2）重氮化-偶合反應(yīng),（3）芳伯氨基與芳醛的縮合反應(yīng),芳醛： 對(duì)二甲氨基苯甲醛、香草醛、水楊醛等,如：與對(duì)二甲氨基苯甲醛在酸性溶液中生成黃色希夫氏堿。,N1取代基為含氮雜環(huán)，有一定堿性，可以和有機(jī)堿沉淀劑生成沉淀。,（4）N1取代基的反應(yīng),2紅外光譜識(shí)別法

3、,紅外法具有指紋性，在一定波長(zhǎng)下，磺胺類(lèi)藥物各具有其獨(dú)特的吸收光譜圖，可鑒別本類(lèi)藥物的特征官能團(tuán)。,圖8-1 磺胺嘧啶的紅外吸收光譜,三、磺胺嘧啶的檢查,1溶液澄清度與顏色的檢查,方法：比色法 要求：澄清無(wú)色；如顯色，與黃色3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，不得更深。,有色的氧化產(chǎn)物偶氮苯化合物,2有關(guān)物質(zhì)的檢查,目的：控制藥物的純度。 方法：薄層色譜法，主成分自身對(duì)照法 雜質(zhì)的限度：0.5。,3干燥失重 105干燥至恒重，減失重量0.5。,4酸度 取本品2.0g，加水100mL，置水浴中振搖加熱10分鐘，立即放冷，濾過(guò)；分取濾液25mL，加酚酞指示液2 滴與氫氧化鈉滴定(0.1mol/L)0.20mL，應(yīng)

4、顯粉紅色。 5熾灼殘?jiān)翰坏眠^(guò)0.1。 6重金屬：不得過(guò)百萬(wàn)分之十。,四、含量測(cè)定,1亞硝酸鈉滴定法 測(cè)定原理：利用磺胺類(lèi)藥物的N1取代物分子中含有芳伯氨基，在05低溫狀態(tài)下、鹽酸介質(zhì)中可與亞硝酸鹽發(fā)生重氮化反應(yīng)，測(cè)定磺胺類(lèi)藥物的含量。,取供試品約0.5 g，精密稱(chēng)定，置燒杯中，加水40 mL與鹽酸溶液(1+2)15 mL，然后置于電磁攪拌器上，攪拌使溶解，再加溴化鉀2g，插入鉑-鉑電極后，將滴定管的尖端插入液面下約2/3處，用亞硝酸鈉液滴定液迅速滴定，隨滴隨攪拌。至近終點(diǎn)時(shí)，將滴定管的尖端提出液面，用少量的水淋洗，將洗液并人溶液中，繼續(xù)緩緩滴定，直到電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回復(fù)，即為滴定終

5、點(diǎn)（永停法）。每1mL的亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于25.03 mg的C10H10N4O2S。,磺胺嘧啶含量測(cè)定,（1）加入適量KBr （2）酸的種類(lèi)及用量 芳胺鹽酸12.56mol （3）室溫條件下滴定 （4）滴定速度 （5）指示終點(diǎn)的方法 藥典采用永停法,計(jì)算公式：,主要條件：,2非水溶液滴定法,含磺酰亞氨基SO2NHR，其N(xiāo)上的H具有一定酸性（R吸電子效應(yīng)越強(qiáng)，N上的H越易失去，酸性越強(qiáng)），故可用非水酸堿滴定法測(cè)定。,取供試品約0.5g，精密稱(chēng)定，加二甲基甲酰胺40mL溶解后，加偶氮紫指示液3滴，用甲醇鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液恰顯藍(lán)色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)

6、校正。每1mL甲醇鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于26.73mg的C11H13N3O3S。,磺胺異噁唑,（1） 測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確，終點(diǎn)明顯。 （2）甲醇鈉滴定溶液應(yīng)臨用前標(biāo)定。 （3）滴定最好在隔絕空氣中二氧化碳的情況下進(jìn)行。,計(jì)算公式：,討 論：,3紫外分光光度法,僅有單一組分或雖有多種組分，但組分間互不干擾的制劑： 直接采用紫外分光光度法，在待測(cè)組分的最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以對(duì)照品比較法或吸收系數(shù)法計(jì)算 磺胺嘧啶片的溶出度測(cè)定 有多種組分且各組分吸收光譜互相重疊： 采用計(jì)算分光光度法 復(fù)方磺胺甲噁唑片的含量測(cè)定(2000版）,磺胺嘧啶片的溶出度測(cè)定,取供試品照溶出度測(cè)定漿法，以鹽酸溶液(

7、91000)1000mL為溶劑，轉(zhuǎn)速為100r/min，依法操作，經(jīng)60min，取溶液5 mL濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液1 mL，置50 mL量瓶中，加0.01 mol/L氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，在254 nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，按磺胺嘧啶（C10Hl0N4O2S）的吸收系數(shù)（ ）為866計(jì)算出每片的溶出量，限度為標(biāo)示量的70，應(yīng)符合規(guī)定。,計(jì)算公式如下：,檢查方法：,復(fù)方磺胺甲噁唑片含量測(cè)定,處方組成： 磺胺甲噁唑 400mg 甲氧芐啶測(cè)定 80mg 輔料 適量 測(cè)定方法： 雙波長(zhǎng)分光光度法,雙波長(zhǎng)分光光度法(雙波長(zhǎng)等吸收法) 當(dāng)光譜重疊時(shí)，在其光譜中選擇兩波長(zhǎng)，在選定的波長(zhǎng)處，干擾組分有相

8、同的吸收；被測(cè)組分與干擾組分的吸收有足夠大的差別。則兩波長(zhǎng)處吸光度的差值與被測(cè)組份的濃度成正比。,因?yàn)?所以,可見(jiàn)，在雙波長(zhǎng)分光光度法中吸光度的差值與干擾組份B無(wú)關(guān)。,為測(cè)定波長(zhǎng), 為參比波長(zhǎng) A為待測(cè)組分, B為干擾組分,磺胺甲噁唑測(cè)定：因?yàn)榛前芳讎f唑在257nm的波長(zhǎng)處有最大吸收,甲氧芐啶在此波長(zhǎng)處吸收較小，并在304nm波長(zhǎng)附近有一等吸收點(diǎn)，故選擇257nm為測(cè)定波長(zhǎng)（2），在304nm波長(zhǎng)附近選擇等吸收波長(zhǎng)為參比波長(zhǎng)（1）。 甲氧芐啶測(cè)定：由甲氧芐啶紫外吸收?qǐng)D譜可知，在239nm波長(zhǎng)處甲氧芐啶有較大吸收，而此波長(zhǎng)是磺胺甲噁唑的最小吸收，且在295nm波長(zhǎng)附近有一等吸收點(diǎn)，故選擇239n

9、m作為甲氧芐啶的測(cè)定波長(zhǎng)，在295nm波長(zhǎng)附近選擇等吸收波長(zhǎng)作為參比波長(zhǎng)。,波長(zhǎng)選擇,精密稱(chēng)取在105干燥至恒重的磺胺甲噁唑?qū)φ掌?0mg與甲氧芐啶對(duì)照品10mg，分別置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別作為對(duì)照品溶液(1) 與對(duì)照品溶液(2) 取本品10片，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于磺胺甲噁唑50mg與甲氧芐啶10mg），置100ml 量瓶中，加乙醇適量，振搖15分鐘使磺胺甲噁唑與甲氧芐啶溶解，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品母液。,對(duì)照品溶液 配制,供試品母液 配制,稀釋液的配制：精密量取供試品母液與對(duì)照品溶液(1)、(2)各1ml ，分別置

10、50ml量瓶中，各加0.4氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。 參比波長(zhǎng)和測(cè)定波長(zhǎng)的確定：取對(duì)照品溶液(2)的稀釋液，以257nm 為測(cè)定波長(zhǎng)(2)，在304nm 波長(zhǎng)附近(每間隔0.5nm)選擇等吸收點(diǎn)波長(zhǎng)為參比波長(zhǎng)(1)，要求2 1 0 。 樣液的測(cè)定：再在2與1波長(zhǎng)處分別測(cè)定供試品溶液的稀釋液與對(duì)照品溶液(1) 的稀釋液的吸收度，求出各自的吸收度差值()計(jì)算，即得。,磺胺甲噁唑測(cè)定,稀釋液的配制： 精密量取上述供試品母液與對(duì)照品溶液(1)、(2)各2.5ml,分別置50ml 量瓶中，各加鹽酸氯化鉀溶液取0.1mol/L鹽酸溶液75ml與氯化鉀6.9g，加水至1000ml，搖勻稀釋至刻度，

11、搖勻，即得。 參比波長(zhǎng)和測(cè)定波長(zhǎng)的確定：照分光光度法取對(duì)照品溶液(1) 的稀釋液，以239.0nm 為測(cè)定波長(zhǎng)(2)，在295nm 波長(zhǎng)附近(每間隔0.2nm)選擇等吸收點(diǎn)波長(zhǎng)為參比波長(zhǎng)(1)，要求2-1 0 ， 樣液的測(cè)定：再在2 與1 波長(zhǎng)處分別測(cè)定供試品溶液的稀釋液與對(duì)照品溶液(2) 的稀釋液的吸收度，求出各自的吸收度差值()，計(jì)算，即得。,甲氧芐啶測(cè)定,計(jì)算公式,式中，AX為供試品溶液稀釋液的吸光度差值； AR為對(duì)照品溶液稀釋液的吸光度差值； mR為SMZ對(duì)照品的稱(chēng)量（mg） m為樣品的稱(chēng)量（g）； 為平均片重（g/片）。,第二節(jié) 氟喹諾酮類(lèi)藥物的分析,喹諾酮類(lèi)藥物是一類(lèi)化學(xué)合成抗菌藥

12、，由于具有抗菌譜廣、抗菌作用強(qiáng)、使用安全及易于制造等優(yōu)點(diǎn)，發(fā)展迅速。 基本母核結(jié)構(gòu)：6-氟-4-喹諾酮-3-羧酸,一、幾種常用藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì),環(huán)丙沙星,氧氟沙星,常用藥物結(jié)構(gòu),諾氟沙星,培氟殺星,理 化 性 質(zhì),顯酸堿兩性 氟喹諾酮類(lèi)藥物結(jié)構(gòu)分子中都含有羧基及堿性氮原子 溶解性 易溶于堿和酸，在水和乙醇中極微溶解。 紫外區(qū)有特征吸收 具有共軛系統(tǒng),二、諾氟沙星的分析,諾氟沙星：臨床常用消炎藥 化學(xué)名：1-乙基-6-氟-4-氧代-l,4-二氫-7-(1-哌嗪基)-3-喹啉羧酸 結(jié)構(gòu)：,性質(zhì)：結(jié)構(gòu)中有羧基顯酸性，有哌嗪基顯堿性，是兩性化合物。,1鑒別試驗(yàn),（1） N1為叔氨基 （2）F6

13、顯有機(jī)氟化物的性質(zhì) （3） 紫外吸收特征：5g/mL本品的0.4NaOH溶液，max273nm （4）采用紅外光譜、薄層色譜、HPLC鑒別,2檢查試驗(yàn),（1）溶液的澄清度： 目的：控制堿不溶性雜質(zhì)的限量 檢查方法：比濁法 指標(biāo)要求：5份均應(yīng)澄清；如顯渾濁，與2號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，均不得更濃。 （2）氟： 限度：含氟量 5.4（理論5.95） 偏低原因：原料制備、副反應(yīng),（3）有關(guān)物質(zhì)：HPLC法 限度：雜質(zhì)A0.2%。其他單個(gè)雜質(zhì)0.5%。其他各雜質(zhì)的和1.0%。 （4）干燥失重：本品易吸收水分。 限度：105，減失重量不得過(guò)1.0% （5）熾灼殘?jiān)?鉑坩堝 限度：遺留殘?jiān)坏眠^(guò)0.1%。 （6

14、）重金屬 限度： 15ppm。,3含量測(cè)定,原理：利用分子中有哌嗪基團(tuán)顯堿性。 測(cè)定方法：取本品約0.25g，精密稱(chēng)定，加冰醋酸20mL溶解后，加橙黃指示劑，用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(0.1mol/L)滴定至溶液顯紫紅色，并將滴定結(jié)果用空白校正。 注意事項(xiàng)：嚴(yán)格控制醋酐用量 諾氟沙星分子中哌嗪基為仲胺，容易發(fā)生乙酰化反應(yīng)。,非水堿量法,色譜條件： 色譜柱：C18柱 流動(dòng)相：0.025mol/L磷酸溶液（用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.00.1）-乙腈（8713） 檢測(cè)波長(zhǎng)：278nm 系統(tǒng)適用性： 諾氟沙星峰與與環(huán)丙沙星峰和依諾沙星峰的分離度均應(yīng)不小于2.0 定量方法：外標(biāo)法,高效液相色譜法,三、環(huán)丙沙星

15、的分析,化學(xué)名： 1-環(huán)丙基-6-氟-l,4-二氫-4-氧-7-(1-哌嗪基)-3-喹啉羧基 結(jié)構(gòu)：,與諾氟沙星的結(jié)構(gòu)區(qū)別是N1上的取代基不同,1鑒別試驗(yàn),紅外光譜法：與對(duì)照的圖譜一致。 TLC法：供試品所顯主斑點(diǎn)的顏色位置與對(duì)照品的主斑點(diǎn)相同。 水溶液顯氟化物的鑒別反應(yīng)。 HPLC法：供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。,2檢查試驗(yàn),（1）結(jié)晶性：應(yīng)符合規(guī)定。 （2）水分：卡爾-費(fèi)休法 含水量應(yīng)在4.76.7。 （3）有關(guān)物質(zhì)：高效液相色譜法 雜質(zhì)A0.3%，雜質(zhì)B,C,D,E均0.2%，其他單個(gè)雜質(zhì)0.2%，各雜質(zhì)的和0.5%。,（4）溶液的澄清度與顏色 ：比色法 應(yīng)澄清無(wú)色；如顯色，與黃色或黃綠色4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，不得更深。 （5）干燥失重：五氧化二磷干燥法 120減壓干燥6hr，減失重量1.0% （6）)熾灼殘?jiān)恒K坩堝 遺留殘?jiān)坏眠^(guò)0.1%。 （7）重金屬： 含重金屬20pp