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文檔簡介
1、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)一般包括動(dòng)物試驗(yàn)技術(shù),毒物室2014年09月11日,第一節(jié),動(dòng)物試驗(yàn)前準(zhǔn)備第二節(jié),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的逮捕和固定第三節(jié),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉第四節(jié),給試驗(yàn)品的方法第五節(jié),各種檢查標(biāo)本的采集方法,第六節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的眼科檢查第七節(jié)尸體檢查和器官標(biāo)本采集原則和檢查方法第八節(jié)實(shí)驗(yàn)外科的基本操作技術(shù)第一節(jié)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室必須與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處于同一水平。3.飼養(yǎng)室應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生活習(xí)性及國家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的各種標(biāo)準(zhǔn)。2 .購買實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,1 .必須購買具有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)供應(yīng)許可證的機(jī)構(gòu)生產(chǎn)的繁殖實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,并要求獲得該實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量合格證。2.從外地購買動(dòng)物,要考慮運(yùn)輸中各種因素對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響,并查閱運(yùn)輸檢疫證明。3.購買的動(dòng)
2、物要經(jīng)過3 7天的隔離檢疫,觀察。第三,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物編號和標(biāo)記方法;(1)染色方法:1,單色染色法:每組l0只以下的動(dòng)物或一個(gè)茄子實(shí)驗(yàn)不超過40只的情況下適用。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:老鼠、鼠標(biāo)。常用染發(fā)劑:3-5苦味酸溶液,可染成黃色。方法步驟:(1)染色原則:從左到右,從上到下。(2)左前腿是L號,左腹部2號,左后腿3號。(3)兩只耳朵后面4次,背中間5次,后腿等6次。(4)右前腿7號,右腹部8號,右后腿9號。(5)尾根是10號。(6)額部20次,雙色染色法:每組不超過100只。(。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:老鼠、鼠標(biāo)。常用的染發(fā)劑:(1)3-5苦味酸溶液可染成黃色。用作“個(gè)”位數(shù)。(2) 0.5%中性紅或洋紅溶液可染成紅
3、色。作為“10”位。方法步驟:(1)用兩種茄子顏色同時(shí)染色顯示。(2)苦味酸(黃色)染色標(biāo)記為一位數(shù),一位數(shù)染色標(biāo)記方法與單色染色方法相同。(3)用品紅色(紅色)染色標(biāo)記為10位數(shù),(4)左前腿10號,左后腿20號,左后腿30號,雙耳后40號,等50號,后腿等60號,右前腿70號,右前腿80號,(原則是左耳代表第10位,右耳代表第1位。(阿爾伯特愛因斯坦,美國電視電視劇,耳垂,耳朵)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:兔子、狗、豬,(3)招牌法通常是動(dòng)物的脖子、耳朵、腳或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物:狗、猴子2.用左手拇指和食指快速準(zhǔn)確地抓住老鼠的兩只耳朵后面和脖子等皮膚,抬起老鼠。3,翻轉(zhuǎn)左手手掌,用左手手掌和中指鉗住鼠標(biāo)等皮膚,使整個(gè)
4、鼠標(biāo)成直線。4.用左手無名指壓鼠背部皮膚,小指壓鼠尾根。5.松開抓住鼠標(biāo)尾巴的右手拇指和食指。牙齒方法包括根、腹腔注射、胃管等,第二,松鼠的捕獲矯正:,方法步驟:4-5周內(nèi)大鼠、方法和鼠標(biāo)。如果酒量大:1,請先戴上防護(hù)手套。2.用右手拇指和食指抓住老鼠尾巴中間,抬起老鼠,放在老鼠飼養(yǎng)箱面具上。3.按左手,夾在大老鼠的軀干背上,施加一些壓力,向頭目滑行。4.用左手拇指和食指抓住老鼠兩只耳朵后面的頭頸皮膚,用其馀三個(gè)手指和手掌抓住老鼠等皮膚,進(jìn)行矯正。第三,豚鼠抓握修正,設(shè)備:老鼠飼養(yǎng)箱口罩L罩。方法步驟:1,首先用左手輕輕鎖定,按住豚鼠等。2.沿著肩胛上的皮膚、拇指和食指環(huán)扎脖子。3.用右手輕輕
5、托住臀部,就能抓住豚鼠。抓豚鼠的時(shí)候一般不要抓腰和腹部。否則肝臟會(huì)破裂,導(dǎo)致死亡。4.糾正兔子的抓握:(1)方法1: 1步驟:1,右手抓住兔子脖子的毛發(fā)和皮膚,輕輕舉起兔子。2.用左手托住兔子的屁股。(b)方法2:設(shè)備:兔子修正框架1。步驟:1,打開校準(zhǔn)臺(tái)的蓋子,抓住兔子放到架子上,迅速關(guān)閉校準(zhǔn)臺(tái)的蓋子。2.右手抓住兔子耳朵,把頭拉到保定臺(tái)的栓上,矯正兔子的脖子。3.兔子掙扎的話,用手在背后輕輕摸摸,安靜點(diǎn)。5,抓住和固定狗,用特別的長手柄狗頭鉗抓住狗的脖子,按在地上,助手用繩子固定四肢和嘴。閉嘴時(shí)注意松弛,確保動(dòng)物正常呼吸。第三節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉,動(dòng)物麻醉是消除動(dòng)物手術(shù)疼痛,便于實(shí)驗(yàn)操作,保證
6、動(dòng)物安全,為手術(shù)創(chuàng)造良好條件。動(dòng)物全身麻醉是4:1。第一期:出現(xiàn)隨機(jī)興奮期,運(yùn)動(dòng)和運(yùn)動(dòng)不平衡。2.第二期:無意識(shí)的興奮期,在儀式中,直到規(guī)則的自動(dòng)呼吸開始時(shí)完全喪失。3.第3期:外科麻醉機(jī),4 .第四期:進(jìn)入進(jìn)修麻醉機(jī)、牙齒時(shí)期,麻醉已經(jīng)嚴(yán)重過量。麻醉方法和麻醉劑,麻醉方法:全身麻醉和局部麻醉通過吸入、注射(靜脈、皮下、肌肉、腹腔)、口腔、胃管等麻醉動(dòng)物。常用麻醉劑:乙醚(吸入)、奧巴比妥鈉、黃土鈉、氯胺酮(靜脈)、普魯卡因、利多卡因麻醉劑,注射前要加熱到動(dòng)物的體溫水平,第四節(jié)是給試驗(yàn)品的方法,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常用的給藥方法為口服、注射、吸入等1,口服自動(dòng)口服藥物:2。胃藥3360是借用器械,將藥物直
7、接注入動(dòng)物胃的方法。牙齒方法可以精確控制劑量,但操作不當(dāng)會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物死亡。(1)大鼠胃管:方法步驟:1,將胃針連接到注射器,吸入一定量的藥液。2.操作前,粗略測量從嘴到胃的距離,估計(jì)胃針插入深度。3.用左手抓住動(dòng)物,向上抬起頭。3、右手針,把上面針的前端放在動(dòng)物嘴里,沿著上腭插入喉嚨,沿著后壁輕輕向下推,注入胃針,就能沿著食道滑入動(dòng)物的胃里,此時(shí)沒有抵觸感。(阿爾伯特愛因斯坦,美國電視電視劇)4。用右手食指慢慢地向下壓針螺栓,把注射器的藥液倒入動(dòng)物的胃里。劑量:鼠標(biāo)約0.1-0.5ml10g體重。最大體積為1.0毫升/老鼠約1-2毫升體重,最大體積為4.0毫升/注意:在胃管過程中不要錯(cuò)誤插入支氣
8、管。(2)兔胃管,原理:將藥液直接注入兔胃。記載:兔子開口器,14號胃管,1個(gè)注射器,生理鹽水,燒杯,石蠟油。步驟:1,將兔子放入補(bǔ)償架,助手用手輕輕按兔子的背,以避免兔子的掙扎。2.填飽肚子的人用左手拇指和中指擠壓兔子的雙頰,擠壓下巴,被動(dòng)地張開兔子的嘴。3,右手在一邊的嘴角插入和固定嘴。4.用石蠟油浸泡的胃管通過開口器的孔插入,向前推約15厘米,就可以向上爬。,5,插管時(shí),將胃管的另一端浸入水中,確保沒有氣泡,將注射器連接到胃管的另一端,輕輕拔出注射器,確認(rèn)胃液是否插入,如果胃確認(rèn)了,可以用注射器通過胃管注入藥液。胃管營養(yǎng)量:80-150毫升。注意:填飽胃的時(shí)候,不要錯(cuò)誤地插入支氣管。(2
9、)約1,皮下注射:原則:向皮下結(jié)締組織注入藥液,通過毛細(xì)管、淋巴管吸收到血液循環(huán)中。記載:1個(gè)1m1注射器,生理鹽水,燒杯,酒精,碘酒,棉球。方法步驟:(1)注射部位:頸部等、腋窩、腹側(cè)、后腿皮下(2)注射量:0.1ml0.3ml10g體重。2 .皮內(nèi)注射,牙齒方法用于觀察皮膚血管通透性變化或皮膚反應(yīng)。注射部位:動(dòng)物背部脫毛,用針平放在皮膚內(nèi),注射藥液后,在皮膚表面打小泡,暫時(shí)停止,拔注射器。3 .肌肉注射藥物原理:向動(dòng)物的肌肉組織注入藥液,通過毛細(xì)血管吸收到血液循環(huán)中。記載:1個(gè)1毫升注射器,生理鹽水,燒杯,酒精,碘酒,棉球。注射部位:一般選擇肌肉豐富、大血管不通過的臀部或大腿外側(cè),再抽血就
10、可以注射。4 .腹腔注射,原理:將藥液注入老鼠腹腔。記載:一個(gè)注射器,生理鹽水,燒杯,酒精,碘,棉球。方法步驟:(1)用左手抓住老鼠,抓住保定,使老鼠腹部朝上,老鼠的頭部略低于尾巴。(2)右手拿著注射器,在下腹部靠近腹背線的地方扎了針,開了個(gè)洞。(。5 .靜脈注射藥(1)大鼠尾靜脈注射原理:將藥液注入大鼠尾靜脈。記載:1個(gè)1m1注射器,生理鹽水,燒杯,金屬籠或大老鼠,酒精,碘酒,棉球。方法步驟:(1)將大老鼠放在金屬黑木啟司或鼠標(biāo)固定器中,通過金屬黑木啟司或大鼠標(biāo)固定器中的孔拉出鼠標(biāo)尾部。(2)用左手抓住老鼠尾巴的中下部,用75酒精棉反復(fù)擦尾巴。(3)打針的時(shí)候,用左手拇指和中指抓住老鼠尾巴的
11、兩側(cè),用食指從下面抬起尾巴,用無名指抓住尾巴的末端。(4)右手拿4號注射器,使針頭與靜脈平行(小于30度)。(5)在老鼠尾巴下的14處注射,仔細(xì)觀察,發(fā)現(xiàn)如果沒有抵抗,就會(huì)出現(xiàn)白色血細(xì)胞,血管被刺,可以注射藥物。(6)拔下注射器后,用干棉球按壓注射部位藥L,2min,防止出血。注射量:鼠標(biāo)0.05m10.1 m110g體重。大鼠1.0-2.0 m1100g體重,(2)兔耳邊緣靜脈給藥原理:兔子矯正架,一個(gè)注射器,生理鹽水,燒杯,酒精,碘,棉球。方法步驟:(1)將兔子放在補(bǔ)償幀補(bǔ)償上。(2)酒精消毒,揉搓血管,使兔子的耳邊靜脈充滿。(3)用左手食指和中指抓住兔子耳邊靜脈的根部,用拇指收緊靜脈的遠(yuǎn)
12、端,將無名指和小指鋪在耳廓下。(4)右手拿注射器,針端斜面向上,針從離心端插入血管,釋放靜脈憂慮端的壓力,抽血的話注射,拔針后用棉球止血。(3)狗靜脈注射,注射部位:前腿靜脈,后腿小銀靜脈,6 .腦內(nèi)注射:7。椎管內(nèi)注射:牙齒方法主要為腦脊液8。關(guān)節(jié)內(nèi)注射:9 .淋巴囊注射可多次采血。2.眼眶靜脈采血:經(jīng)常用于大老鼠、倉鼠的日常血液檢查。微量的采血。3.眼球采血:血量比較多,大老鼠,倉鼠4。多用于腹主動(dòng)脈采血。經(jīng)常用于大老鼠、倉鼠,動(dòng)物麻醉后進(jìn)行,用針在腹主動(dòng)脈的分叉處與血管平行刺破,采血量大。5.心采血:6。兔耳淺靜脈或貴重動(dòng)脈,頸動(dòng)脈采血7。狗在前腿靜脈,后腿銀靜脈采血。8.猴子可以在手指
13、末端、腳后跟、后腿皮下靜脈、頸靜脈進(jìn)行采血。豬小型豬是耳大靜脈、后腿靜脈、鼠標(biāo)各種采血方法的最大采血量,尾剪1-2毫米。眼球采血:0.1-0.6ml/次心臟采血:0.5-0.6ml/次斷頭采血:0.8-1.0ml/次眼眶靜脈采血:0.2-0.3ml/次大鼠,豚鼠,2,體液采集,1。胸水采集2。復(fù)仇采集3。消化液采集:主要是唾液胃液膽汁胰液4。尿樣采集5。骨髓液采集6。動(dòng)物精液采集7。乳膠采集、尿液采集、代謝場膀胱法壓迫:牙齒方法適用于兔子、貓、狗等大型動(dòng)物。輸尿管插入法、膀胱插管法、膀胱穿刺法、剖宮產(chǎn)尿法、反射排尿法:應(yīng)用于鼠標(biāo)。三,采糞,大,鼠標(biāo):使用代謝腸兔:大量使用代謝腸犬、猴子、豬:采
14、集自然排出的糞便。第六節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的安死術(shù),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的死刑,應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的倫理要求和動(dòng)物福利法,按照人道原則處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。第一,“安樂死”的概念:安樂死是指以人道的方式處決動(dòng)物的過程。在處決動(dòng)物的過程中,盡量減少動(dòng)物的恐慌和不安,使動(dòng)物安靜而無痛苦地死去。第二,采用安射術(shù)是必須遵守的標(biāo)準(zhǔn)。采用眼射術(shù)必須遵守的標(biāo)準(zhǔn)。1 .死時(shí)沒有恐懼和痛苦。2.在最短的時(shí)間內(nèi)失去意識(shí),導(dǎo)致快速死亡。牙齒方法可靠,可重復(fù)。4.對操作員安全。使用的方法必須符合研究要求和目的。情緒對觀察者和操作員的影響最小。7.對環(huán)境的影響最小。8.所需的機(jī)械設(shè)備簡單、便宜,易于操作。9.處死動(dòng)物的地點(diǎn)必須相距很遠(yuǎn),與動(dòng)物室分開。眼
15、斜術(shù)的一般方法,頸椎脫位法是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的頸椎脫位,切斷脊髓死亡,是大老鼠最常用的死刑方法??諝馑ㄈǔS糜谔幩劳米?、貓和狗。兔子,貓是20-40毫升,狗是80-150毫升。用過量麻醉處死老鼠、豚鼠、兔子,常用于吸入乙醚或在腹腔注射巴比妥鈉。二氧化碳吸入法使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物吸入大量C02等氣體,中毒死亡。斷頭死刑法、顱骨死刑法、第7節(jié)尸體檢查及器官標(biāo)本收集原則和檢查方法、尸體的外部檢查技術(shù)、尸體內(nèi)臟器官收集技術(shù)、尸體內(nèi)臟器官檢查技術(shù)、第8節(jié)實(shí)驗(yàn)外科的基本操作技術(shù)、術(shù)前無菌技術(shù)手術(shù)準(zhǔn)備的基本操作技術(shù)術(shù)后動(dòng)物管理和觀察、1、術(shù)前準(zhǔn)備、1。手術(shù)室的要求和手術(shù)室的準(zhǔn)備位置及設(shè)計(jì)原則,手術(shù)室的設(shè)備等2。動(dòng)物準(zhǔn)備3。手術(shù)器械、物品、敷料準(zhǔn)備、2、無菌技術(shù):對微生物和感染途徑的一系列預(yù)防措施。包括滅菌、消毒法、操作規(guī)
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