1、血糖影響因素及血糖的測定，浙江中醫(yī)藥大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生化學(xué)研究室，【實驗?zāi)康摹?，學(xué)習(xí)體內(nèi)的哪些激素影響血糖濃度？ 學(xué)習(xí)掌握葡萄糖氧化酶法血糖測定的原理和操作方法。 【實驗原理】人和動物的血糖濃度受到神經(jīng)、激素的調(diào)節(jié)，相對穩(wěn)定。 胰島素和腎上腺素是調(diào)節(jié)血糖濃度的兩種重要激素，前者降低血糖濃度，后者升高血糖濃度。 葡萄糖由葡萄糖氧化酶氧化為葡萄糖酸，可以產(chǎn)生過氧化氫，后者在過氧化酶的作用下，與苯酚及氨基抗吡啶作用，可以產(chǎn)生紅色醌化合物。 醌的產(chǎn)量與葡萄糖量成正比。 與葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液相比，可以補(bǔ)正得到的血漿葡萄糖濃度。 【實驗試劑和器材】、速效胰島素、鹽酸腎上腺素、抗凝固劑(草酸鈉或草酸鉀、肝素鈉、

2、檸檬酸三鈉)禁食4小時以上的兔兩個葡萄糖試劑盒(、標(biāo)準(zhǔn)液)、酶標(biāo)板、微取樣器、注射器、注射器用酒精棉擦拭兔子的耳朵，使血管擴(kuò)張，用棉擦拭，用注射器采血，或者在采血部位涂上薄層凡士林，然后用刀片切開邊緣靜脈，將血液收集到草酸鈉抗凝固管(每毫升需要約2mg的草酸鈉)內(nèi)，使之不凝固注射激素后采血：一只家兔皮下注射胰島素(1單位/kg體重)，另一只家兔皮下注射腎上腺素(0.4mg/kg體重)。 取一張酶標(biāo)板、一張板，放入板架，修正空白管A1、標(biāo)準(zhǔn)管A2.A3、測定管A4.A5、A6.A7、A8.A9、A10.A11 (取兩管的平均值，則可減少實驗血糖值=A樣/A標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，37孵育箱) 測定波長為4

3、92nm，用空管A1調(diào)零，讀取標(biāo)準(zhǔn)管及測定管的吸光度。 【結(jié)果和訂正】、血漿葡萄糖濃度=標(biāo)準(zhǔn)管葡萄糖濃度(5.55mmol/L )、【討論】、血糖的由來： 1碳水化合物的消化和單糖的吸收：生體攝取后，食物淀粉經(jīng)由唾液淀粉酶、胰酶、小腸粘膜分泌的二糖酶作用載體積極輸送至十二指腸和空腸壁內(nèi)，并在血中擴(kuò)散。 2糖原的分解：空腹肝儲存的糖原被葡萄糖6磷酸酶分解為葡萄糖入血，是空腹血糖的直接來源，也是維持血糖濃度一定的重要機(jī)制。 3糖異生：空腹時體內(nèi)氨基酸、乳酸、甘油等非糖物質(zhì)經(jīng)肝臟糖異生作用生成葡萄糖，參與血糖的一定。 二、血糖途徑： 1氧化2合成糖原3轉(zhuǎn)化為甘油三酯、蛋白質(zhì)和氨基酸等二糖物質(zhì)。 4血糖濃度高于腎糖閾值時，從尿中排出。 三、血糖的調(diào)節(jié)： 1降低血糖的激素主要是胰島素，另外胰島素樣生長因子2血糖激素是胰高血糖素、腎上腺素、生長激素和皮質(zhì)醇。四、測定的臨床意義： 1生理性高血糖：攝取高糖食品后或情緒緊張腎上腺分泌增加時的2病理性高血糖： (1)糖尿??；(2)內(nèi)分泌腺功能障礙；(3)顱內(nèi)壓升高；(4)脫水所致的高血糖3生理性低