1、宮 頸 標(biāo) 本 處 理 的病理學(xué)技能,1,學(xué)習(xí)交流PPT,病理技術(shù)操作流程,脫 水,包 埋,切 片,HE 染 色,封 片,閱 片,取 材,2,學(xué)習(xí)交流PPT,取材,核對(duì)病人的姓名，科室，住院號(hào)等。 核對(duì)標(biāo)本性質(zhì)，取出的部位，標(biāo)本數(shù)目， 臨床診斷 是否做標(biāo)記：如帶線、切緣、錐頂?shù)?3,學(xué)習(xí)交流PPT,活檢標(biāo)本的取材,活檢組織及時(shí)固定 固定液總量標(biāo)本5倍以上 取材時(shí)應(yīng)描述活檢組織大小、顏色、質(zhì)地 固定好的組織應(yīng)放濾紙包好放入包埋盒,4,學(xué)習(xí)交流PPT,注意：,較小較碎的組織應(yīng)用紗布或?yàn)V紙包裹，滴入伊紅放入包埋盒內(nèi) 直徑小于0.1cm的標(biāo)本，可描述“針尖大小”，直徑大于0.1cm的標(biāo)本應(yīng)記錄實(shí)際大小

2、，切忌用“米粒大小”或“綠豆大小”等字樣描述。 厚度大于0.5cm 的標(biāo)本，切開(kāi)描述切面，切開(kāi)包埋。 大體可辨認(rèn)的息肉樣組織，則描述之：如-色息肉狀-質(zhì)地組織-塊，大小-,5,學(xué)習(xí)交流PPT,組織學(xué)檢查的組織厚度不得超過(guò)3mm 并且長(zhǎng)短不能超過(guò)使用的包埋盒的大小。 大多數(shù)實(shí)體標(biāo)本應(yīng)該切成 邊長(zhǎng)10-15mm 厚2-3mm,大小：,6,學(xué)習(xí)交流PPT,大體描述,1._色_（質(zhì)地）組織1 塊，大小為*cm 2._色_（質(zhì)地）組織2 塊，大小分別為*cm 及*cm 3._色_（質(zhì)地）組織3 塊（或3 塊以上），最大者大小為*cm,最小者大小為*cm,7,學(xué)習(xí)交流PPT,陰道鏡活檢標(biāo)本的取材方法,用品

3、：裝標(biāo)本用的凍存管/標(biāo)本瓶，內(nèi)置固定液。0.5cm的微 孔濾膜小塊。牙簽、鑷子、記號(hào)筆和登記本。,8,學(xué)習(xí)交流PPT,方法：用戴有一次性乳膠手套的左手食指緊貼活檢鉗，右手 持牙簽，將活檢鉗內(nèi)鉗取的標(biāo)本，撥到食指上攤平，用已備好的濾膜貼附上面,拇指輕壓,迅速置于已裝好固定液的標(biāo)本瓶中，固定液的總量必須大于標(biāo)本塊的5倍以上。 目的：便于包埋過(guò)程中的定位, 防止埋面不當(dāng)造成組織的平 切。,陰道鏡活檢標(biāo)本的取材方法,9,學(xué)習(xí)交流PPT,10,學(xué)習(xí)交流PPT,宮頸錐切標(biāo)本取材,描述 錐形體的大?。ㄖ睆胶蜕疃龋┖托螤?，應(yīng)該測(cè)量基底寬度及高度，描述顏色、外觀、體積（應(yīng)測(cè)量忌用比擬）、質(zhì)地（軟，中等、硬等）

4、上皮：顏色，光滑，糜爛，修復(fù)，撕裂，腫塊（大小，形狀，部位），囊腫（內(nèi)容物，大小） 以前活檢的部位,11,學(xué)習(xí)交流PPT,12,學(xué)習(xí)交流PPT,宮頸錐切標(biāo)本,取材 1. 新鮮狀態(tài)下用縫線標(biāo)記12 點(diǎn)位置 2. 將一把鋒利的刀尖插入宮頸管在12 點(diǎn)位置縱向剪開(kāi) 標(biāo)本（如沒(méi)有定位，可在任一部位剪開(kāi)） 3. 粘膜面朝上釘于軟木板上固定過(guò)夜,13,學(xué)習(xí)交流PPT,取材: 4. 用墨汁小心涂抹手術(shù)切緣 5. 間隔23mm 做順時(shí)針?lè)较蚩v性切面，切取的每一面均應(yīng)包含鱗柱交界處上皮，必要時(shí)可修剪掉部分間質(zhì)。 每一個(gè)蠟塊在3個(gè)不同的平面上切片，以觀察切緣情況。,宮頸錐切標(biāo)本,14,學(xué)習(xí)交流PPT,宮頸錐切標(biāo)本

5、,15,學(xué)習(xí)交流PPT,宮頸錐切標(biāo)本,16,學(xué)習(xí)交流PPT,宮頸錐切標(biāo)本的取材,17,學(xué)習(xí)交流PPT,宮頸錐切標(biāo)本的取材,18,學(xué)習(xí)交流PPT,19,學(xué)習(xí)交流PPT,宮頸癌根治標(biāo)本,子宮切除標(biāo)本（經(jīng)腹） 1. 測(cè)量標(biāo)本大小并稱重 2. 辨認(rèn)子宮的前后壁 腹膜反折 附件,20,學(xué)習(xí)交流PPT,剖開(kāi)方式 從前壁宮頸外口處中央向上縱行剪開(kāi)宮壁至子宮底，然后呈“一”字型切向雙側(cè)宮角. 用鋒利的刀從宮頸兩側(cè)一直打向雙側(cè)宮角 將子宮分為前后兩部分.,21,學(xué)習(xí)交流PPT,22,學(xué)習(xí)交流PPT,23,學(xué)習(xí)交流PPT,子宮切除標(biāo)本（經(jīng)腹） 3. 如有體積大的腫瘤，平行切開(kāi) 4. 釘于軟木板上固定過(guò)夜,宮頸癌根

6、治標(biāo)本,24,學(xué)習(xí)交流PPT,子宮切除標(biāo)本描述,子宮切除術(shù)的類型，包含的器官 漿膜面的顏色，纖維性粘連，腫瘤 宮頸外口直徑，鱗柱狀交界處粘膜性狀 宮頸管長(zhǎng)度，粘膜性狀，切面囊腫 宮體內(nèi)膜：外觀、厚度、出血、息肉、囊腫、腫瘤 子宮肌壁：厚度、出血點(diǎn)或斑、腫瘤（部位、數(shù)量、大小、 出血、壞死、鈣化） 輸卵管：根部其形狀、粗度，作橫切面 卵巢：大小，質(zhì)地、顏色，切面,25,學(xué)習(xí)交流PPT,子宮切除標(biāo)本取材,1. 宮頸 從宮頸外口以上大約2.5cm 處離斷宮頸，以錐切標(biāo)本方式取材并分別標(biāo)記部位。 宮頸深部浸潤(rùn)性癌：至少取3 塊，其中至少有1 塊為腫瘤浸潤(rùn)最深處，1 塊包含宮頸全層 應(yīng)取陰道壁切緣和左，

7、右側(cè)宮旁組織,26,學(xué)習(xí)交流PPT,2. 宮頸管 如有腫瘤則按腫瘤取材原則取材 3. 宮體 如沒(méi)有明顯的腫瘤：接近宮底處至少取2 塊，盡可能包括宮體全層，任何大體異常處另取 如有明顯的腫瘤：腫瘤至少取3 塊,其中至少有1 塊為腫瘤浸潤(rùn)最深處1 塊包含宮體全層，非腫瘤性子宮內(nèi)膜取2 塊，宮體和宮頸交界處取1 塊,子宮切除標(biāo)本取材,27,學(xué)習(xí)交流PPT,4. 肌瘤 3 個(gè)以下每個(gè)肌瘤至少取1 塊，體積大者可多至3 塊，3 個(gè)以上仔細(xì)觀察每個(gè)肌瘤的不同切面，切面性狀相同或相似者共取34 塊即可，任何大體上的異常的區(qū)域均分布取材。 .宮體肌壁 有出血或灰紅色斑點(diǎn)狀區(qū)域多取 6.卵巢和輸卵管 7.各站淋

8、巴結(jié),子宮切除標(biāo)本取材,28,學(xué)習(xí)交流PPT,卵巢切除標(biāo)本描述,_側(cè)卵巢切除標(biāo)本一件，大小為*cm,表面_色，光滑/凹凸不平，有/無(wú)乳頭狀突起。垂直于卵巢長(zhǎng)軸做平行切面，見(jiàn)切面呈_色，可見(jiàn)黃、白體結(jié)構(gòu)。局部見(jiàn)囊腔，大小為*cm,單/多房，內(nèi)壁光滑/有突起，囊壁厚*cm,內(nèi)容物淡黃色清亮液體。,29,學(xué)習(xí)交流PPT,單純或預(yù)防性切除標(biāo)本取12 塊 囊腫剔除標(biāo)本至少取3 塊，盡量囊壁最厚處，薄壁囊腫最好打卷取材，良性畸胎瘤應(yīng)取到頭節(jié) 復(fù)雜的囊性標(biāo)本盡量多取乳頭處及囊壁較厚處 實(shí)性腫瘤部分按照實(shí)性腫瘤取材,卵巢切除標(biāo)本取材,30,學(xué)習(xí)交流PPT,輸卵管處理步驟,切開(kāi)前固定標(biāo)本，如果附著在子宮上，則應(yīng)

9、在原位固定 測(cè)量輸卵管長(zhǎng)度和最大直徑 如果輸卵管大小相對(duì)正常，則每隔5mm 連續(xù)切開(kāi)并檢查，注意不要完全切斷 如果輸卵管明顯增大，則將輸卵管完全縱向剖開(kāi)，如需要再做平行切面,31,學(xué)習(xí)交流PPT,輸卵管描述,輸卵管長(zhǎng)度和最大直徑 漿膜：纖維素，出血，纖維性粘連至卵巢或其他器官 壁：厚度異常？破裂？如有,則描述位置 傘端的外觀：開(kāi)放？閉合？?jī)?nèi)翻？ 管腔：明顯？擴(kuò)張？?jī)?nèi)容物；如果異常增多測(cè)量直徑 粘膜：萎縮？增厚？,32,學(xué)習(xí)交流PPT,分別在峽、壺腹及傘部各取1 塊,輸卵管取材,33,學(xué)習(xí)交流PPT,34,學(xué)習(xí)交流PPT,35,學(xué)習(xí)交流PPT,36,學(xué)習(xí)交流PPT,37,學(xué)習(xí)交流PPT,標(biāo)本為全

10、切/陰式切除的全子宮，部分陰道壁及左/右/雙側(cè)附件。 陰道壁長(zhǎng)*cm，周徑為*cm。子宮大小為*cm,漿膜面_色，光滑/不光滑/粗糙/凸凹不平見(jiàn)多個(gè)隆起。 子宮頸外口呈_色，粘膜光滑/粗糙/糜爛/中重度糜爛/見(jiàn)一內(nèi)生性/外生性腫物（腫物大小為*cm,切面呈_色，侵及肌層/外膜層，向上累及/未累及子宮內(nèi)膜）。,38,學(xué)習(xí)交流PPT,宮頸管長(zhǎng)*cm，粘膜呈_色，可見(jiàn)一/多個(gè)息肉/小囊腫，大小為*cm,囊內(nèi)容_,子宮內(nèi)膜呈_色，光滑/粗糙/見(jiàn)一/多個(gè)息肉狀突起/見(jiàn)一隆起型腫物（腫物大小為*cm，切面呈灰白/灰紅色，侵及肌層/外膜層，向下累及/未累及宮頸）。,39,學(xué)習(xí)交流PPT,子宮內(nèi)膜厚*cm,子

11、宮體肌壁厚*cm,于內(nèi)膜下/肌壁間/漿膜下可見(jiàn)一個(gè)/多個(gè)_色結(jié)節(jié)狀腫物，大者大小為*cm,小者大小為*cm,切面_色，編織狀明顯/不明顯，質(zhì)地_，與周圍肌壁組織分界清楚/不清楚，其余肌壁組織切面可見(jiàn)/未見(jiàn)散在暗紅色區(qū)域。左側(cè)輸卵管長(zhǎng)*cm,直徑為*cm,卵巢大小為*cm,右側(cè)輸卵管長(zhǎng)*cm,直徑為*cm,卵巢大小為*cm。,40,學(xué)習(xí)交流PPT,41,學(xué)習(xí)交流PPT,總技術(shù)流程 （1）固定： （2）脫水： （3）透明： （4）浸蠟： （5）包埋： （6）切片： （7）烤片： （8）HE染色,常規(guī)制片技術(shù),42,學(xué)習(xí)交流PPT,43,學(xué)習(xí)交流PPT,固 定,常用10%中性甲醛固定液配方： 市售甲

12、醛（40%） 100ml D.W. 900ml 磷酸二氫鈉 4g 磷酸氫二鈉 6.5g 固定時(shí)間4h以上，大標(biāo)本應(yīng)在24h以上,44,學(xué)習(xí)交流PPT,固定是組織制片的基礎(chǔ)及關(guān)鍵步驟 固定是否徹底，影響著整個(gè)制片的過(guò)程 是整個(gè)標(biāo)本處理過(guò)程的一個(gè)主要環(huán)節(jié),固 定,45,學(xué)習(xí)交流PPT,固定目的： 1.保持組織形態(tài)學(xué)特征清晰和穩(wěn)定 2.阻止組織、細(xì)胞自溶與腐敗 3.凝固或沉淀組織細(xì)胞內(nèi)物質(zhì) 4.保存組織細(xì)胞抗原性 5.使組織保持一定的硬度和彈性,固 定,46,學(xué)習(xí)交流PPT,一種好的固定液特性：,1.滲透力相對(duì)較強(qiáng)，能迅速滲入組織內(nèi)部 2.組織收縮、膨脹或變硬相對(duì)很小 3.能夠硬化、固化組織，增加組

13、織硬度 4.使得組織對(duì)染料產(chǎn)生較強(qiáng)的親和力，并產(chǎn)生較佳的折光率,47,學(xué)習(xí)交流PPT,影響固定因素：,固定液類型及酸堿度 固定液濃度 固定時(shí)間與組織體積 固定的溫度,48,學(xué)習(xí)交流PPT,固定液濃度,固定液濃度過(guò)低達(dá)不到固定效果，濃度過(guò)高穿透力降低，易引起組織中央固定不良。,福爾馬林的濃度大于10%的會(huì)增加組織變硬和收縮的程度。,49,學(xué)習(xí)交流PPT,甲醛 酒精 冰醋酸 丙酮,50,學(xué)習(xí)交流PPT,51,學(xué)習(xí)交流PPT,52,學(xué)習(xí)交流PPT,固定時(shí)間與組織體積,一般4-24小時(shí) 組織取材厚度原則在4mm以內(nèi) 對(duì)于免疫組化而言：固定不足，組織抗原彌散，結(jié)構(gòu)不佳，固定過(guò)度，抗原破壞。 組織固定后如

14、不能及時(shí)進(jìn)入脫水，可置70%酒精中進(jìn)行適度保存。,53,學(xué)習(xí)交流PPT,固定溫度,溫度降低，減慢了固定液滲透速度；溫度升高，分子彌散增加，分子活動(dòng)加快，滲透速度加快。 大多數(shù)組織適宜的固定溫度為25C，全自動(dòng)脫水機(jī)溫度一般控制在35C左右 。 一般不建議加熱固定,54,學(xué)習(xí)交流PPT,脫水原則： 1.將組織內(nèi)水分脫干凈但又不使組織過(guò)度脫水 2.酒精脫水應(yīng)由低濃度至高濃度進(jìn)行 脫水劑特性及要求： 1.能與水、透明劑在任何比例下混合 2.對(duì)組織的穿透性能良好 3.脫水速度快 4.對(duì)組織有一定硬化作用,脫水,55,學(xué)習(xí)交流PPT,酒精： 最常用脫水劑，具有親水性，能溶于水和其他有機(jī) 溶劑，脫水力強(qiáng)，

15、能硬化組織。 能很好與透明劑混溶 易使組織收縮、變脆，導(dǎo)致透明劑難進(jìn)入組織 從低濃度開(kāi)始逐級(jí)增加濃度,脫水,56,學(xué)習(xí)交流PPT,低濃度酒精在組織中穿透力很強(qiáng)，比高濃度更易滲透到組織內(nèi)部 組織在低濃度酒精中脫水充分，高濃度只是脫去從低濃度到高濃度之間的水分 高濃度酒精滲透力不強(qiáng)，延長(zhǎng)時(shí)間意義不大，反而 會(huì)使得組織收縮、變脆,脫水,57,學(xué)習(xí)交流PPT,75%酒精(1h)85%酒精(1h)95%酒精(1h30) 95% 酒精 (1h)100%酒精 (1h30)100% 酒精(1h),脫水,58,學(xué)習(xí)交流PPT,二甲苯（1h）二甲苯（1h） 脫水 蠟（1h30）58-60蠟（1h30）58-60

16、蠟（1h） 58-60 蠟溫過(guò)高可降低浸蠟時(shí)間，浸蠟用的石蠟要定期更新，保持純度,透明,59,學(xué)習(xí)交流PPT,透明劑在脫水劑和石蠟之間起著橋梁作用 它能與兩種溶液相溶 在此過(guò)程中，因組織塊中的水分被透明劑取代，其 折射指數(shù)接近于組織蛋白的折光指數(shù)，組織塊變得 透亮。,透明,60,學(xué)習(xí)交流PPT,二甲苯： 最常用的透明劑 無(wú)色透明、有毒性，不溶于水、易揮發(fā) 透明力強(qiáng) 容易使得組織收縮、變形、變脆 長(zhǎng)期接觸會(huì)呼吸道黏膜有刺激作用,透明,61,學(xué)習(xí)交流PPT,置換組織中的透明劑，石蠟滲入組織 組織浸蠟、包埋，實(shí)質(zhì)上一個(gè)目的兩個(gè)步驟 石蠟是最常用的浸潤(rùn)劑和包埋劑 一般用于浸蠟的石蠟熔點(diǎn)為56-58C

17、浸蠟溫度應(yīng)高于石蠟熔點(diǎn)2-4C,浸蠟,62,學(xué)習(xí)交流PPT,采用石蠟包埋法 鑷子夾取組織薄片，立埋（切記不能平埋）于包埋模中（埋鱗狀上皮的那面）。 把包埋修好的蠟塊按號(hào)順序排列。 放入4冰箱中保存待切片,包埋,63,學(xué)習(xí)交流PPT,64,學(xué)習(xí)交流PPT,65,學(xué)習(xí)交流PPT,注意調(diào)節(jié)組織平面，使之保持垂直，并與刀刃平行。 切片機(jī)的切片厚度標(biāo)尺，一般34nm 活檢組織需連續(xù)切片，每張切片上4-8張組織片。,切片,66,學(xué)習(xí)交流PPT,67,學(xué)習(xí)交流PPT,68,學(xué)習(xí)交流PPT,69,學(xué)習(xí)交流PPT,石蠟切片烤后從溫箱中拿出應(yīng)迅速浸入二甲苯洗去切片中的石蠟。 時(shí)間寧長(zhǎng)勿短，否則脫蠟不盡無(wú)法著色。,

18、HE染色,70,學(xué)習(xí)交流PPT,71,學(xué)習(xí)交流PPT,各級(jí)酒精洗去切片中的二甲苯，使切片逐級(jí)酒精入水。,HE染色,72,學(xué)習(xí)交流PPT,蘇木精染色時(shí)間：依染液的新舊與著色能力強(qiáng)弱有關(guān)，染色時(shí)間應(yīng)隨時(shí)觀察切片著色程度 伊紅染色時(shí)間：染色程度應(yīng)以蘇木精對(duì)核的著色程度為參照標(biāo)準(zhǔn)，以求達(dá)到對(duì)比鮮明。,HE染色,73,學(xué)習(xí)交流PPT,74,學(xué)習(xí)交流PPT,脫水、透明,HE染色,75,學(xué)習(xí)交流PPT,中性樹(shù)膠濃度適宜。 過(guò)濃氣泡不易擴(kuò)散，不易排出。 過(guò)稀易溢出玻片，膠內(nèi)二甲苯揮發(fā)后產(chǎn)生氣泡不便觀察。,封固,76,學(xué)習(xí)交流PPT,建議每個(gè)實(shí)施單位，有2名病理醫(yī)師閱片，如果診斷一致，確定診斷，如果不一致，應(yīng)增

19、加第三位醫(yī)師閱片，對(duì)確實(shí)有爭(zhēng)議的病例，可請(qǐng)上級(jí)專家閱片診斷。,病理閱片,77,學(xué)習(xí)交流PPT,鱗狀細(xì)胞癌的組織學(xué)報(bào)告內(nèi)容 包括以下幾個(gè)方面： 1、組織學(xué)類型及分級(jí) 2、腫瘤部位 3、浸潤(rùn)深度或厚度 4、腫瘤大小 5、血管淋巴管浸潤(rùn) 6、淋巴結(jié)狀況 7、切緣狀況,診斷報(bào)告,78,學(xué)習(xí)交流PPT,宮頸癌 微浸潤(rùn)癌 病理報(bào)告模板,宮頸，LEEP，宮頸錐切，宮頸切除術(shù)，子宮切除術(shù) 浸潤(rùn)性癌 浸潤(rùn)深度：mm 浸潤(rùn)橫徑：mm 淋巴管/血管間隙受累： 切緣 宮頸內(nèi)口： 宮頸外口： 深部： 其他,79,學(xué)習(xí)交流PPT,宮頸微浸潤(rùn)癌診斷模板 范例,宮頸LEEP活檢： 1、子宮頸微小浸潤(rùn)性鱗狀細(xì)胞癌，位于前唇（0點(diǎn)至3點(diǎn)） 浸潤(rùn)深度：3mm，可見(jiàn)兩處病灶浸潤(rùn)深度：5mm 淋巴管/血管間隙受累：未查見(jiàn) 2、切緣：