1、,病毒學(xué),病毒感染的 檢查方法與防治原則,1,學(xué)習(xí)交流PPT,教學(xué)目標(biāo),熟悉： 人工主動免疫和人工被動免疫的常用生物制品。 了解： 病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷方法。有效抗病毒藥物的抗病毒機(jī)制及應(yīng)用價(jià)值。,2,學(xué)習(xí)交流PPT,思考：,病毒如此之小和活細(xì)胞內(nèi)寄生，我們?nèi)绾畏蛛x培養(yǎng)及檢查？ 血清學(xué)診斷和分子生物學(xué)檢查的理論基礎(chǔ)是什么？ 可通過什么方式預(yù)防病毒的感染？,3,學(xué)習(xí)交流PPT,對抗病毒有招-巴斯德在1889年發(fā)明了狂犬病疫苗 病毒的面貌清晰地呈現(xiàn)在人們的眼前僅僅百余年的歷史，但明確的病毒致病的記載早在四百多年前就有了。早在1566年，瘋狗咬人致病的案例已經(jīng)被記錄下來，但直到1885年，人們還不知

2、道狂犬病到底由什么引起。,4,學(xué)習(xí)交流PPT,在細(xì)菌學(xué)說占統(tǒng)治地位的年代，巴斯德的試驗(yàn)為狂犬病的防治開辟了新的路徑。巴斯德發(fā)現(xiàn)，將狂犬病延髓提取液多次注射兔子后，再將這些毒性已遞減的液體注射狗，狗就能抵抗狂犬病毒的侵染。 1885年的一天，人們把一個(gè)被瘋狗咬過的9歲男孩邁斯特爾送來求救，巴斯德給這個(gè)孩子注射了毒性減到很低的提取液，然后再逐漸用毒性較強(qiáng)的提取液注射。巴斯德的方法拯救了男孩的生命。,5,學(xué)習(xí)交流PPT,第一節(jié) 病毒感染的檢查,檢 測 內(nèi) 容,查病毒,查特異性抗體,病毒顆粒 病毒抗原 病毒核酸 病毒酶類：如逆轉(zhuǎn)錄酶,電鏡直接觀察 光鏡檢查包含體 分離培養(yǎng),6,學(xué)習(xí)交流PPT,一、標(biāo)本

3、的采集與送檢,原則基本與細(xì)菌相似，但應(yīng)注意： 1.標(biāo)本用“雙抗”或兩性霉素B處理 2.低溫保存，盡快送檢 3.血清學(xué)診斷采雙份血清,7,學(xué)習(xí)交流PPT,二、病毒的分離與鑒定,（一）病毒分離培養(yǎng)方法類型 細(xì)胞培養(yǎng)（cell culture） 雞胚接種（egg inoculation） 動物接種（animal inoculation）,8,學(xué)習(xí)交流PPT,標(biāo)本,無菌處理,細(xì)胞培養(yǎng) 雞胚培養(yǎng) 動物接種,指標(biāo)陽性 指標(biāo)陰性,病毒鑒定,盲傳23代,指標(biāo)陰性,病毒陰性,一般程序,9,學(xué)習(xí)交流PPT,1.動物接種 最原始 應(yīng)用：尚無敏感細(xì)胞的病毒培養(yǎng) 動物：兔、鼠、黑猩猩、猴等 優(yōu)點(diǎn)：結(jié)果易觀察，可建立動物

4、模型 缺點(diǎn)：有飼養(yǎng)條件要求，費(fèi)用高，動物體內(nèi)常帶有潛伏病毒,10,學(xué)習(xí)交流PPT,2.雞胚接種 孵化914天的雞胚,11,學(xué)習(xí)交流PPT,3.細(xì)胞培養(yǎng) 在一定條件下用離體的活組織或活細(xì)胞培養(yǎng)病毒的方法,證實(shí)病毒存在的方法： CPE 紅細(xì)胞吸附及凝集 干擾現(xiàn)象 pH值改變,12,學(xué)習(xí)交流PPT,細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落 如腺病毒等多數(shù)病毒,13,學(xué)習(xí)交流PPT,腮腺炎病毒感染細(xì)胞,紅細(xì)胞吸附（hemadsorption）,HA紅細(xì)胞表面HA受體細(xì)胞吸附,病毒胞膜表面血凝素(HA) 相應(yīng)抗體紅細(xì)胞吸附抑制,紅細(xì)胞吸附抑制試驗(yàn),14,學(xué)習(xí)交流PPT,干擾現(xiàn)象（interference）,風(fēng)疹

5、病毒人胚腎細(xì)胞 病毒增殖，CPE(),?？刹《救伺吣I細(xì)胞 病毒增殖，CPE(),人胚腎細(xì)胞,風(fēng)疹病毒 埃可病毒,CPE(-)風(fēng)疹病毒(+) ?？刹《?-) CPE(+)風(fēng)疹病毒(-) ?？刹《?+),15,學(xué)習(xí)交流PPT,（二）病毒的鑒定,1.形態(tài)學(xué)鑒定 電子顯微鏡 2.病毒的血清學(xué)鑒定 鑒定病毒種、型、亞型 血凝抑制試驗(yàn)、免疫標(biāo)記 3.病毒分子生物學(xué)鑒定,16,學(xué)習(xí)交流PPT,三、病毒感染的診斷（一）病毒形態(tài)學(xué)鑒定,電子顯微鏡：設(shè)備、操作復(fù)雜，應(yīng)用受限 光學(xué)顯微鏡：可見大病毒（痘類病毒）或包涵體，對一般病毒檢測意義不大,17,學(xué)習(xí)交流PPT,（二）免疫學(xué)檢查法 檢查病毒抗原 ELISA 血凝

6、抑制試驗(yàn)、中和試驗(yàn) 檢查病毒特異性IgM 風(fēng)疹病毒、甲型肝炎病毒等 （三）檢查病毒核酸 核酸雜交技術(shù) PCR技術(shù),18,學(xué)習(xí)交流PPT,第二節(jié) 病毒感染的防治原則,一、人工主動免疫常用生物制品,滅活疫苗、活疫苗； 基因工程疫苗； 亞單位疫苗； 核酸疫苗,19,學(xué)習(xí)交流PPT,二、人工被動免疫常用生物制品,免疫血清 血清丙種球蛋白 細(xì)胞因子等,20,學(xué)習(xí)交流PPT,三、病毒感染的治療,干擾素和干擾素誘生劑 中草藥 基因治療劑 治療性疫苗,抗病毒 化學(xué)制劑,反義寡核苷酸 干擾RNA 核酶（ribozyme）,核苷類藥物 碘苷 阿昔洛韋 非核苷類反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑 蛋白酶抑制劑 其他抗病毒藥物,21,學(xué)習(xí)交流PPT,總結(jié),病毒感染的檢查方法與一般程序。 病毒感染的特異預(yù)防 病毒感染的治療,22,學(xué)習(xí)交流PPT,思考題,1.分離病毒的標(biāo)本和作血清學(xué)診斷的標(biāo)本各有何要求？ 2.預(yù)防病毒性感染有