1、實驗一 微生物學實驗常用儀器洗滌及干熱滅菌,目的要求 實驗原理 實驗材料 實驗程序 結果與思考題,目 的 要 求,認識微生物實驗所需要的各種器皿，了解常用工具和儀器的名稱、用途。 掌握對玻璃器皿的清洗、包扎方法與干熱滅菌的操作過程。,實驗原理,微生物學實驗要求較高的無菌狀態(tài)，因此，實驗所用的器皿，大多數(shù)要進行消毒、滅菌從而用以培養(yǎng)微生物，所以對其質(zhì)量、規(guī)格、洗滌和包扎方法均有一定要求。 清潔的玻璃器皿是實驗得到正確結果的先決條件，包扎方法要能保證防止污染雜菌。 空的玻璃器皿一般用干熱滅菌.,實 驗 材 料,玻璃儀器： 每人數(shù)：培養(yǎng)皿 3套； 大試管 3只。 每組數(shù)：三角瓶 6只； 燒杯（500

2、ml）2只； 燒杯（1000ml）1只； 小試管 6只； 吸管（ 0.2ml 2支， 0.5ml 2支，1ml 2支， 5ml 2支）共8支 每櫥數(shù)：量筒（500ml）1只； 洗滌用品： 去污粉、肥皂、清洗劑、毛刷等。 包扎用品：棉花、扎繩、包扎紙等。,實驗程序（儀器的認識、清洗與包扎）,（一）學習下列常用儀器的種類、規(guī)格和應用范圍： 培養(yǎng)皿； 試管； 三角瓶； 燒杯； 吸管； 量筒。 （二）學習玻璃器皿的洗滌方法： （三）學習各種器皿的包扎：,由一底一蓋組成一套，常用的培養(yǎng)皿皿底直徑90 mm，高15mm,皿底皿蓋均為玻璃制成。 制成平板，可用于分離、純化、鑒定菌種、活菌計數(shù)以及測定抗生素、

3、噬菌體的效價等。,根據(jù)其大小和用途不同，有下列三種型號： (1)大試管(約18mm180mm) : 可裝倒平板用的培養(yǎng)基; 可作制備斜面用（需要大量菌體時用） 裝液體培養(yǎng)基用于微生物的振蕩培養(yǎng)。 (2)中試管(1315)mm(100150)mm: 裝液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌或做斜面用, 用于細菌、霉菌、病毒等的稀釋和血清學試驗。 (3)小試管(1012)mm100mm: 一般用于糖發(fā)酵或血清學試驗，和其它需要節(jié)省材料的試驗。,三角瓶: 100mL、250mL、500mL和1000 mL 用來裝無菌水、培養(yǎng)基和振蕩培養(yǎng)微生物等。 燒杯: 50mL、100mL、250mL、500mL和1000mL 用來

4、配制培養(yǎng)基與各種溶液等。 玻璃吸管: 1mL、2mL、5mL、10mL,玻璃器皿的洗滌方法:,1、新玻璃器皿的洗滌 在2%的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時，用自來水沖洗干凈。 2、舊玻璃器皿的洗滌 （1）試管、培養(yǎng)皿、三角瓶：洗衣粉和去污粉洗刷，自來水沖洗 A 裝有固體培養(yǎng)基：刮掉，洗滌 B 帶菌的器皿：2%來蘇爾或0.25%新潔爾滅消毒液中浸泡24小時或煮沸0.5小時，然后洗滌 C 帶病原菌培養(yǎng)物的器皿：先高壓蒸汽滅菌，倒去培養(yǎng)物 （2）玻璃吸管：吸管尖端與裝在水龍頭上的橡皮管連接，反復沖洗 a 吸過血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管：立即投入盛有自來水的容器中浸泡，實驗后集中沖洗。 b 塞有棉

5、花的吸管：用水將棉花沖出，然后沖洗 c 吸過含有微生物培養(yǎng)物的吸管：2%來蘇爾或0.25%新潔爾滅消毒液中浸泡24小時然后洗 d 吸管內(nèi)壁有油垢：洗滌液中浸泡數(shù)小時，再沖洗,洗滌后，若內(nèi)壁的水均勻分布成一薄層，表示完全洗凈，若還掛有水珠，則需用洗滌液浸泡數(shù)小時，然后再用自來水沖洗。,洗凈后的試管倒置于試管筐內(nèi)，三角瓶倒置于洗滌架上，培養(yǎng)皿的皿底和皿蓋分開，依次壓著皿邊排列倒扣在桌上,晾干.,培養(yǎng)皿的包扎： 牛皮紙或舊報紙包緊，一般以58套培養(yǎng)皿包成1包 吸管的包扎： 1 在上端約0.5cm處，塞入一小段1.5 cm長的棉花（勿用脫脂棉），目的是避免將外界或嘴中雜菌吹入管內(nèi)，或不慎將菌液吸出管外

6、。 2 45 cm寬的長紙條. 試管和三角瓶等的包扎：,實驗程序（干熱滅菌的原理和操作方法 ）,干熱滅菌是利用高溫使微生物細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固變性而 達到滅菌的目的。細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固性與其本身的含水量有 關，在菌體受熱時，當環(huán)境和細胞內(nèi)含水量越大，則蛋白質(zhì)凝 固就越快，反之含水量越少，凝固緩慢。 與濕熱滅菌相比，干熱滅菌所需溫度要高（160170）， 時間要長（12h），但干熱滅菌溫度不能超過180，否則， 包器皿的紙或棉塞就會燒焦，甚至引起燃燒。,原理,實驗程序（干熱滅菌的原理和操作方法 ）,1裝入待滅菌物品 將包好的待滅菌物品（培養(yǎng)皿、吸管等）放入電烘箱內(nèi)，關好箱門。物品不要擺得 太擠，以免妨礙空氣流通；不要接觸電烘箱內(nèi)壁的鐵板，以防包裝紙烤焦起火。 2升溫 接通電源，撥動開關，打開電烘箱排氣孔，讓溫度逐漸上升。當溫度升至100時，關閉排氣孔。 3恒溫 當溫度升達到160170時，恒溫調(diào)節(jié)器會自動控制調(diào)節(jié)溫度，保持此溫度2h。 干熱火菌過程，嚴防恒溫調(diào)節(jié)的自動控制失靈而造成安全事故。 4降溫 切斷電源、自然降溫。 5開