1、第二章/第一節(jié)紅細(xì)胞檢查,1,.,2,.,3,.,4,.,正常情況下，紅細(xì)胞生成與破壞保持動態(tài)平衡，血液中紅細(xì)胞數(shù)量保持在相對恒定的范圍。,血液中紅細(xì)胞數(shù)量可 通過紅細(xì)胞計(jì)數(shù)獲得,5,.,紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（red blood cell count, RBC）,測定單位體積血液中紅細(xì)胞的數(shù)量 診斷貧血及紅細(xì)胞增多的指標(biāo)之一 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法,顯微鏡計(jì)數(shù)法 血液分析儀法,6,.,顯微鏡計(jì)數(shù)法（重點(diǎn)） 用等滲液稀釋血液后，滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)的紅細(xì)胞，經(jīng)換算得每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。,檢測原理,RBC未排除 白細(xì)胞數(shù)量影響,7,.,10ul末梢血或EDTA抗凝靜脈血 加入2ml等滲液中，混勻 混

2、懸液充入改良牛鮑計(jì)數(shù)板 高倍鏡下計(jì)數(shù)中央大方格的四角及中央五個中方格內(nèi)的紅細(xì)胞總數(shù)A。 換算？,操作,RBC/L=（A/5)2510106200 =(A/100)1012,8,.,Neubauer計(jì)數(shù)盤,9,.,血液分析儀法,采用電阻抗法或激光檢測法,10,.,方法學(xué)評價(jià),11,.,質(zhì)量保證（顯微鏡法）,技術(shù)誤差 儀器誤差 分布誤差,顯微鏡法紅細(xì)胞計(jì)數(shù)誤差來源有三個,12,.,技術(shù)誤差,13,.,參考值,成年男性：（4.095.74）1012/L 成年女性：（3.685.13）1012/L 新生兒：（5.26.4）1012/L 嬰兒： （4.04.3）1012/L 兒童： （4.04.5）10

3、12/L,RBC存在年齡 與性別的差異,14,.,臨床意義,RBC參考值上限，RBC增多 RBC參考值下限，即貧血,生理性變化,病理性變化,15,.,生理性增多,生理性缺氧引起,16,.,6個月-2歲嬰兒,17,.,相對性增多：見于嘔吐、高熱等引起暫時性血液濃縮。通過補(bǔ)液，血容量恢復(fù)正常，紅細(xì)胞增多即消失。,絕對性增多： 繼發(fā)性增多，由EPO代償性或非代償性增高引起。 原發(fā)性增多，紅細(xì)胞系統(tǒng)異常增殖性疾病。,病理性增多,18,.,19,.,20,.,病理性減少（貧血）,生成減少,破壞過多,血管丟失,貧血：紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測定或血細(xì)胞比容低于參考值下限。 病因?qū)W分類,21,.,紅細(xì)胞生成減少

4、,骨髓造血功能減退或衰竭：再生障礙性貧血。,造血物質(zhì)缺乏或利用障礙：腎性貧血、缺鐵性貧血，巨幼細(xì)胞性貧血。,22,.,細(xì)胞內(nèi)在缺陷（遺傳性缺陷） 膜缺陷、酶缺陷、血紅蛋白異常致紅細(xì)胞壽命縮短。 細(xì)胞外在異常（獲得性因素） 免疫性因素：輸血血型不合、新生兒溶血病等。 非免疫性因素：機(jī)械損傷、化學(xué)物理因素、寄生蟲及脾亢等。,紅細(xì)胞破壞過多,23,.,血液丟失：急、慢性失血性貧血,24,.,外傷引發(fā)的出血,25,.,血紅蛋白（hemoglobin，Hb ）,在有核紅及網(wǎng)織紅內(nèi)合成 是紅細(xì)胞胞漿內(nèi)的呼吸載體蛋白 Hb在成熟紅細(xì)胞內(nèi)分布特點(diǎn)（近胞膜處多，中心部少）決定了紅細(xì)胞的雙凹圓盤形狀 合成速度受促

5、紅細(xì)胞生成素（EPO）與雄激素調(diào)節(jié),26,.,Hb （四聚體）,珠蛋白,血紅素,2條鏈,2條非鏈,原卟啉,鐵原子,血紅蛋白組成,27,.,28,.,29,.,血液中血紅蛋白的存在形式,存在形式 所占比例 還原血紅蛋白（Fe2+ ） 正常成人99% 氧合血紅蛋白 碳氧血紅蛋白 硫化血紅蛋白 高鐵血紅蛋白（Fe3+ ） 1%,Hb測定即測定血液中各種血紅蛋白的總濃度。,30,.,血液的物理特性：比重法，折射儀法 Hb的分子組成：全血鐵法 Hb與O2可逆性結(jié)合：血?dú)夥治龇?Hb衍生物光譜特點(diǎn)：HiCN，SDS-Hb等,檢測原理,31,.,HiCN法檢測原理,紅細(xì)胞被溶血劑破壞后，高鐵氰化鉀可將各種血

6、紅蛋白（SHb除外）氧化為高鐵血紅蛋白（Hi），后者與試劑中的 CN - 結(jié)合生成棕紅色的氰化高鐵血紅蛋白（HiCN）。在540nm處測定HiCN的吸光度，直接換算Hb濃度或在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得Hb濃度。,32,.,20ul血液加入5ml轉(zhuǎn)化液中，充分溶血轉(zhuǎn)化后，以轉(zhuǎn)化液調(diào)零，測定標(biāo)本（HiCN）在540nm的吸光度A。 計(jì)算,操作,直接計(jì)算（符合WHO標(biāo)準(zhǔn)的分光光度計(jì)） Hb A6445844000251A367.7 以 HiCN參考液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，利用吸光度 A在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出Hb濃度,33,.,方法學(xué)評價(jià),缺點(diǎn)：試劑有毒、高WBC造成試劑混濁 、HbCO 轉(zhuǎn)化慢、不能測SHb。,HiCN測定

7、法（參考方法）,優(yōu)點(diǎn)：操作簡單 ，反應(yīng)速度快，產(chǎn)物穩(wěn)定，便于質(zhì)控。,34,.,方法學(xué)評價(jià),優(yōu)點(diǎn)：操作簡單 ，試劑無毒，結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好 。,缺點(diǎn)：SDS質(zhì)量差異大；消光系數(shù)未定，不能直接計(jì)算Hb濃度；不能測定SHb ；SDS破壞白細(xì)胞。,SDS-Hb測定法（ HiCN替代方法）,35,.,方法學(xué)評價(jià),優(yōu)點(diǎn)：試劑簡易無毒、呈色穩(wěn)定、準(zhǔn)確性與精密性較高。,缺點(diǎn)：575nm波長比色，血液分析儀上應(yīng)用受限，不能轉(zhuǎn)化HbF。,AHD575測定法,36,.,方法學(xué)評價(jià),優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確度、精密度較高。,缺點(diǎn)：試劑有毒、HbCO 轉(zhuǎn)化慢。,HiN3測定法,37,.,方法學(xué)評價(jià),優(yōu)點(diǎn)：溶血強(qiáng)，不破壞白細(xì)胞，適用于

8、血液分析儀。,缺點(diǎn)：精密度、準(zhǔn)確度低。,CATB測定法,38,.,質(zhì)量保證（比色法）,標(biāo)本：引起血清濁度增加的因素致Hb假性增高。 器材及試劑：定期校準(zhǔn)儀器，選用合格的微量采血管和刻度吸管，保證試劑質(zhì)量。 技術(shù)操作：控制技術(shù)誤差。 廢棄物：妥善處理廢液。,39,.,參考值,成年男性：131172 g/L 成年女性：113 151 g/L 新生兒：180190 g/L 嬰兒： 110120 g/L 兒童： 120140 g/L 老年（70歲）：男性 94122 g/L 女性 87112 g/L,Hb存在年齡 與性別的差異,40,.,臨床意義（同紅細(xì)胞計(jì)數(shù)）,判斷貧血程度優(yōu)于紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 臨床應(yīng)用注意事項(xiàng) Hb和RBC不一定正確反應(yīng)全身紅細(xì)胞總?cè)萘康淖兓?某些貧血， Hb和RBC減少程度可不一致，同時測定Hb和RBC，對診斷更有意義。,41,.,貧血程度的判定,分度 Hb含量 癥狀 輕度： 91g/L正常值下限 癥狀輕微 中度：