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1、化妝品中金黃色葡萄球菌的檢測,一、實訓(xùn)目的,熟悉化妝品中金黃色葡萄球菌的檢驗原理 掌握化妝品中金黃色葡萄球菌的檢測方法 能夠規(guī)范書寫檢驗原始記錄及檢驗報告,二、實訓(xùn)原理,是人類的一種重要病原菌,隸屬于葡萄球菌屬(Staphylococcus),有“嗜肉菌”的別稱,是革蘭氏陽性菌的代表,可引起局部化膿感染,也可引起肺炎、偽膜性腸炎、心包炎等,甚至敗血癥、膿毒癥等全身感染。金黃色葡萄球菌廣泛分布在土壤、水、空氣及物品上,人和動物的皮膚及與外界相通的腔道也常有。,2007年版化妝品衛(wèi)生規(guī)范中規(guī)定每克或每毫升化妝品中不得檢出金黃色葡萄球菌,被金黃色葡萄球菌感染,金黃色葡萄球菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu),金黃色葡萄球
2、菌一般為球型,直徑0.8m左右,顯微鏡下排列成葡萄串狀。金黃色葡萄球菌無芽胞、鞭毛,大多數(shù)無莢膜,革蘭氏染色陽性。,金黃色葡萄球菌,營養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上生長良好,需氧或兼性厭氧,最適生長溫度37C,最適生長pH 7.4。平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起,直徑1-2mm。血平板菌落周圍形成透明的溶血環(huán)。金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性,可在10-15%NaCl肉湯中生長??煞纸馄咸烟?、麥芽糖、乳糖、蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。甲基紅反應(yīng)陽性,VP反應(yīng)弱陽性。許多菌株可分解精氨酸,水解尿素,還原硝酸鹽,液化明膠。金黃色葡萄球菌具有較強的抵抗力,對磺胺類藥物敏感性低,但對青霉素、紅霉素等高度敏感。,四、實訓(xùn)
3、程序,1、儀器的準(zhǔn)備于清洗 2、試劑、稀釋液和培養(yǎng)基的配制,確定儀器的種類、數(shù)量與規(guī)格,洗凈、包扎、滅菌,備用,確定試劑及規(guī)格, 實訓(xùn)用量,按用量配制試液、 稀釋液和培養(yǎng)基,按要求分裝,包 扎貼標(biāo)簽、 滅菌、備用,3、金黃色葡萄球菌檢查程序。,供試液 的制備,增菌 培養(yǎng),劃線 分離,血瓊 脂平板,營養(yǎng) 肉湯,革蘭染色、鏡檢 甘露醇發(fā)酵試驗,血漿凝固酶實驗,書寫檢驗 記錄單,溶血現(xiàn)象,四、實訓(xùn)試劑與培養(yǎng)基,稀釋液 SCDLP液體培養(yǎng)基 7.5%的NaCl肉湯 Baird Parker 平板 增菌劑 血瓊脂培養(yǎng)基 甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基 兔(人)血漿制備 革蘭氏染色液,五、檢驗報告,1)按常規(guī)程序檢驗,凡分離出革蘭氏陽性葡萄球菌的疑似菌落,經(jīng)證實可發(fā)酵甘露醇、血漿凝固酶陽性的菌株,可報告檢出金黃色葡萄球菌。 2)如果分離的疑似菌落不發(fā)酵甘露醇,但血漿凝固酶陽性也可斷定為檢出金黃色萄葡球菌。 3)分離出的葡萄球
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