1、第九章 真核細胞內膜系統、蛋白質分選與膜泡運輸,真核細胞在進化上一個顯著特點就是出現了細胞內的區(qū)隔（intracellular compartment），細胞質被分隔成不同的由膜包裹的區(qū)室，即被膜細胞器（ Membrane Bound Organelles ）。,內質網、高爾基體、溶酶體、胞內體和分泌泡等雖然具有各自獨立的結構和功能，但它們之間又緊密相關，每個細胞器都作為相互協調的功能單位的一部分而發(fā)揮作用。因而被總稱為細胞內膜系統（endomembrane system）。(see next),An overview of the biosynthetic/secretory and end

2、ocytic pathways that unite endomembranes into a dynamic,interconnected network.,Endosymbiosis,Evolution of Nuclear Membrane and ER,從系統發(fā)生來看內膜系統起源于質膜的內陷和內共生 從個體發(fā)生來看新細胞的內膜系統來源于原有內膜系統的分裂，具有核外遺傳的特性。,真核細胞的細胞質中，除去可分辨的細胞器以外的膠狀物質，稱細胞質基質（cytoplasmic matrix or cytomatrix）。,本章內容 第一節(jié) 細胞質基質的涵義與功能 第二節(jié) 細胞內膜系統及其功能 第

3、三節(jié) 細胞內蛋白質的分選與膜泡運輸,第一節(jié)細胞質基質,也被稱為：細胞液(cell sap)，透明質(hyaloplasm)，胞質溶膠(cytosol) 成分：主要含有與中間代謝有關的數千種酶類，與維持細胞形態(tài)和細胞內物質運輸有關的細胞質骨架。 水和無機離子（K、Na、Mg、Ca、Cl) 脂、糖、氨基酸、核苷酸及其衍生物 蛋白質、脂蛋白、多糖、RNA 糖原等一些處于貯存狀態(tài)的重要化合物,細胞質基質的功能 完成各種中間代謝過程 如糖酵解過程、磷酸戊糖途徑、糖醛酸途徑等 與細胞質骨架相關的功能 維持細胞形態(tài)、細胞運動、胞內物質運輸及能量傳遞等 蛋白質的修飾、蛋白質選擇性的降解 蛋白質的修飾 控制蛋白

4、質的壽命 降解變性和錯誤折疊的蛋白質 幫助變性或錯誤折疊的蛋白質重新折疊，形成正確的分子構象,第二節(jié)細胞內膜系統及其功能,內質網 高爾基體 溶酶體,一、內質網,K. R. Porter等于1945年發(fā)現于培養(yǎng)的小鼠成纖維細胞，因最初看到的是位于細胞質內部的網狀結構，故名內質網（endoplasmic reticulum，ER）。 分類 組成 功能,根據是否附有核糖體： 粗面內質網（糙面內質網，routh endoplasmic reticulum, rER) 有核糖體附著 光面內質網（滑面內質網，smooth endoplasmic reticulum, sER) 無核糖體附著 光面內質網往往

5、作為出芽的位點, 將內質網上合成的蛋白質或脂類轉運到高爾基體。,1、分類,2、結構和組成,形態(tài)結構 ER 由封閉的膜系統及其形成的腔構成的相互溝通的網狀結構。它從核膜延伸至細胞質中，靠近細胞質內側。（next） ER 是真核細胞中最大的細胞器 ER的膜占細胞膜系統的一半 所包圍的體積占細胞總體積的10%,超薄和掃描電鏡觀察的內質網,上部介透射電鏡照片,下部是掃描電鏡照片,粗面內質網呈扁平囊狀，排列整齊 光面內質網呈分支管狀或小泡狀,特征： 大大增加了細胞內膜的表面積，為多種酶體系提供了大面積的結合位點。 完整的封閉體系將其上合成的物質與細胞基質中合成的物質分隔開，利于它們的加工和運輸， 組成：

6、內質網是膜囊結構，所以構成內質網的主要化學成份是蛋白質和脂。 葡萄糖-6-磷酸酶，普遍存在于內質網，被認為是標志酶,2、結構和組成,微粒體(microsome) ：內質網的一種特化類型 在細胞勻漿和差速離心過程中獲得的由破碎的內質網自我融合形成的近似球形的膜囊泡狀結構。 在體外實驗中,具有蛋白質合成、蛋白質糖基化和脂類合成等內質網的基本功能。,3、內質網的功能,光面內質網的功能： 脂類合成 類固醇激素的合成 脫毒作用 糖原分解釋放葡萄糖 調節(jié)鈣功能,粗面內質網的功能： 蛋白質合成 蛋白質的修飾和加工 新生肽鏈的折疊和裝配,脂質的合成 幾乎全部的膜脂都由內質網來合成，如磷脂（磷脂酰膽堿）、膽固醇

7、 將膽固醇氧化、還原、水解, 轉變成各種類固醇激素。 合成：磷脂合成酶是ER膜整合蛋白， 活性位點朝向cytosol，因而磷脂的合成都是在內質網的胞質溶膠面進行(see next)。在光面內質網上合成的磷脂先作為內質網膜的構成部分，然后再轉運給其他的膜。,光面內質網的功能,The synthesis of phosphatidylcholine. This phospholipid is synthesized from fatty acyl-coenzyme A (fatty acyl CoA), glycerol 3-phosphate, and cytidine-bisphosphoch

8、oline (CDP-choline),脂質的合成 轉位：在內質網上合成的磷脂幾分鐘之后就由胞質溶膠面轉向膜的另一面，即內質網腔面, 磷脂的轉位是由內質網膜中磷脂轉位蛋白(phospholipid translocator)或稱翻轉酶（flippase）幫助的。 轉運: 內質網中的磷脂向其它膜的轉運有兩種方式： 出芽( budding)：ERGC、Ly、PM 磷脂轉換蛋白(phospholipid exchange proteins, PEP）：磷脂分子+PEP細胞質基質靶膜（線粒體、過氧化物酶體的膜）(see next),光面內質網的功能,糖原分解與游離葡萄糖釋放 在肝細胞中,糖原裂解釋放葡

9、萄糖-1-磷酸,然后再轉變成葡萄糖-6-磷酸,由于磷酸化的葡萄糖不能通過細胞質膜,光面內質網上的葡萄糖-6-磷酸酶將葡萄糖-6-磷酸水解為葡萄糖和磷酸后,葡萄糖就可穿過細胞質膜進入血液,光面內質網的功能,解毒作用(detoxification) 肝細胞中的光面內質網很豐富，其中含有一些酶，用以清除脂溶性廢物和代謝產生的有害物質。如 細胞色素P-450家族酶系能使聚集在光面內質網上的不溶于水的廢物或代謝產物羥基化而完全溶于水轉運出細胞進入尿液中。,光面內質網的功能,貯Ca2+功能： 肌質網(sarcoplasmic reticullum)是肌細胞內特化的光面內質網, 是貯存Ca2+的細胞器。,光

10、面內質網的功能,Translocation of soluble proteins across ER,粗面內質網的功能,蛋白質的合成 向細胞外分泌的蛋白質 膜的整合蛋白質 細胞器中可溶性駐留蛋白質（soluble proteins that reside within compartments of the endomembrane system ）,蛋白質的修飾與加工 包括糖基化、羥基化、?；⒍蜴I形成等，其中最主要的是糖基化，幾乎所有內質網上合成的蛋白質最終被糖基化。 糖基化的作用： 使蛋白質能夠抵抗消化酶的作用； 賦予蛋白質傳導信號的功能； 某些蛋白只有在糖基化之后才能正確折疊。

11、在進化上，寡糖鏈具有一定的剛性，從而限制了其它大分子接近細胞表面的膜蛋白，這就可能使真核細胞的祖先具有一個保護性的外被，同時又不象細胞壁那樣限制細胞的形狀與運動。,粗面內質網的功能,內質網上進行N-連接的糖基化。 N-連接的糖基化（N-linked glycosylation）：與天冬酰胺殘基的NH2連接，糖為N-乙酰葡糖胺。,Protein glycosylation in RER,粗面內質網的功能,新生多肽的折疊與裝配 二硫鍵異構酶（protein disulfide isomerase，PDI：ER駐留蛋白）催化新合成的蛋白形成和改組二硫鍵，形成正確的折疊狀態(tài)。 分子伴侶BiP（Bind

12、ing protein）識別錯誤折疊的蛋白或未裝配好的蛋白亞單位，并促進重新折疊與裝配。 不能正確折疊的畸形肽鏈或未裝配成寡聚體的蛋白質亞單位，不能進入高爾基體。這些多肽一旦被識別，便從內質網腔轉至細胞質基質（通過Sec61p復合體），被蛋白酶體（proteasomesprotein-degrading machine）所降解。（see next）,粗面內質網的功能,二、高爾基體,高爾基體（Golgi body），也稱高爾基器(Golgi apparatus)或高爾基復合體(Golgi complex) 最早發(fā)現于1855年，1889年，Golgi用銀染法，在貓頭鷹的神經細胞內觀察到了清晰的結

13、構，因此定名為高爾基體。20世紀50年代以后才正確認識它的存在和結構。1909年諾貝爾獎。,Golgi Apparatus in a plant parenchyma cell from Sauromatum guttatum (TEM x145,700).,組成： 高爾基體膜含有大約60%的蛋白和40%的脂類。 從蛋白質含量看, 高爾基復合體高于內質網和質膜（分別為20%和40%）。 從總磷脂看, 高爾基體介于內質網和質膜之間。 標志酶為糖基轉移酶。 還有磺基-糖基轉移酶、氧化還原酶、磷酸酶、蛋白激酶、甘露糖苷酶、轉移酶和磷脂酶等不同的類型。,1、形態(tài)和組成,功能區(qū)隔： CGN Medial

14、 Golgi TGN,1、形態(tài)和組成,1、形態(tài)和組成,CGN 最內側稱高爾基體順面網絡結構（cis Golgi network，CGN），呈相互連接的管網結構（interconnected network of tubules）,是高爾基體的入口區(qū)域。,Diagram of Golgi body. Vesicles arrive at the cis face and leave from trans face. The internal compartment of each membrane sac is called a “cisterna” (pl. cisternae).,Golgi

15、 Stack： 高爾基體的主體由一系列大的、扁平膜囊和管道組成，形成不同間隔，但功能上是連續(xù)的。可分為順面膜囊（cis cisternae）、中間膜囊（medial cisternae）和反面膜囊（trans cisternae）。多數糖基化修飾、糖脂的形成以及與高爾基體有關的多糖的合成都發(fā)生在此。,1、形態(tài)和組成,TGN： 反面最外測稱高爾基體反面網絡結構（trans Golgi network，TGN），呈管網狀，并有囊泡與之相連。是高爾基體的出口區(qū)域，功能是參與蛋白質的分類與包裝，最后輸出。,1、形態(tài)和組成,2、高爾基體的功能,蛋白質運輸和分選（sorting） 蛋白質修飾 水解 糖基化

16、 硫酸化：蛋白聚糖 膜循環(huán)：內質網上合成的脂質一部分轉移至高爾基體后，經過修飾和加工，形成運輸泡，向細胞膜和溶酶體膜等部位運輸。,高爾基體的主要功能是將內質網合成的多種蛋白質進行加工、分類與包裝，然后分門別類地運送到細胞特定的部位或分泌到細胞外。(見第三節(jié)),2、高爾基體的功能,O-連接的糖基化 O-連接的糖基化在高爾基體中進行，糖的供體為核苷糖（半乳糖或N-乙酰半乳糖胺）。將糖鏈轉移到多肽鏈的絲氨酸、蘇氨酸或羥賴氨酸的羥基上。 N-連接的寡聚糖進一步加工 內質網上：磷酸多萜醇上的糖基轉移到多肽的天冬酰胺（Asn）上 高爾基體：加工，切除葡萄糖和部分甘露糖分子，添加特定的單糖，形成成熟的糖蛋白

17、,蛋白質在高爾基體中酶解加工 無生物活性的蛋白原（proprotein）高爾基體切除N-端或兩端的序列成熟的多肽。如胰島素、胰高血糖素及血清白蛋白等。 蛋白質前體高爾基體水解同種有活性的多肽，如神經肽等。 含有不同信號序列的蛋白質前體高爾基體加工成不同的產物。 同一種蛋白質前體不同細胞、以不同的方式加工不同的多肽。,2、高爾基體的功能,三、 溶酶體和過氧化物酶體,溶酶體（lysosome）是單層膜圍繞、內含多種酸性水解酶類的囊泡狀細胞器，其主要功能是進行細胞內消化。 溶酶體為C. de Duve與B. Novikoff 1955年首次發(fā)現。 酸性磷酸酶是標志酶 Lysosome membran

18、e:Glycosylated proteins，may protect the lysosome from selfdigestion.,初級溶酶體（primary lysosome） 直徑約0.20.5um，有多種酸性水解酶，但沒有活性，包括蛋白酶，核酸酶、脂酶、磷酸酶等60余種，反應的最適PH值為5左右。,1、溶酶體的結構特征,Secondary lysosome,次級溶酶體（secondary lysosome） 是正在進行或完成消化作用的溶酶體，內含水解酶和相應的底物，可分為自噬溶酶體（autophagolysosome）和異噬溶酶體(phagolysosome) 。,1、溶酶體的結構

19、特征,肝細胞脂褐質,殘體（residual body） 又稱后溶酶體（post-lysosome）已失去酶活性，僅留未消化的殘渣，故名。殘體可通過外排作用排出細胞，也可能留在細胞內逐年增多，如表皮細胞的老年斑，肝細胞的脂褐質。,1、溶酶體的結構特征,2、溶酶體的功能,細胞內消化：如高等動物內吞低密脂蛋白獲得膽固醇，單細胞真核生物利用溶酶體消化食物。 自體吞噬：清除無用的生物大分子，衰老細胞、細胞器、個體發(fā)育中多余的細胞。許多生物大分子的半衰期只有幾小時至幾天，肝細胞中線粒體的平均壽命約10天左右。 防御作用：如巨噬細胞殺死病原體。 參與分泌過程的調節(jié)：如將甲狀腺球蛋白降解成有活性的甲狀腺素。

20、形成精子的頂體。,第三節(jié) 細胞內蛋白質的分選與膜泡運輸,蛋白質分選（Protein sorting）: Protein molecules move from the cytosol to their target organelles or cell surface directed by the sorting signals in the proteins,一、蛋白質分選的基本途徑與類型,蛋白質分選的兩條途徑,蛋白質分選的三種機制： Gated Transport: Transport through nuclear pores Transmembrane transport: ER,

21、Mit, Chl, Per Vesicular transport: ER-Golgi-Lys， Endosome， PM,二、蛋白質分選的原理,細胞內合成的蛋白質之所以能夠定向的轉運到特定的細胞器取決于兩個方面： 其一是蛋白質中包含特殊的信號 其二是細胞器上具特定的信號識別裝置（分選受體，sorting receptor）。,1、蛋白質分選信號,信號序列（signal sequence）：存在于蛋白質一級結構上的線性序列，通常15-60個氨基酸殘基；信號序列對所引導的蛋白質沒有特異性要求 信號肽 導肽 信號斑（signal patch）：存在于完成折疊的蛋白質中，構成信號斑的信號序列之間可以

22、不相鄰，折疊在一起構成蛋白質分選的信號。,signal sequence and signal patch,2、分泌性蛋白質進入內質網機制,信號假說(signal hypothesis)： 在細胞質基質中起始合成的分泌性蛋白質以其N端序列作為信號肽（ signal peptide），指導其到內質網膜上合成，在其合成結束之前信號肽被切除。 G. Blobel關于信號序列控制蛋白質在細胞內的轉移和定位的研究獲1999年諾貝爾醫(yī)學和生理學獎。,過程: 信號肽信號識別顆粒信號識別顆粒的受體 合成 指導分泌性蛋白在粗面內質網上合成的決定因素是蛋白質N端的signal peptide 信號識別顆粒（sig

23、nal recognition particle，SRP）識別信號肽并與之結合 內質網膜上的信號識別顆粒受體（又稱停泊蛋白,docking protein，DP）識別信號識別顆粒，并與之結合。 核糖體與內質網膜上的易位子（translocon）結合并打開孔道，信號肽引導合成蛋白進入。 信號肽被內質網腔面上的信號肽酶切除。,Synthesis of secretory proteins on the rough ER,共轉移（cotranslocation）: 肽鏈在粗面內質網膜上邊合成邊轉移到內質網腔中 信號肽序列被信號肽酶切除 完全進入腔 若有停止轉移信號（stop transfer seq

24、uence，與內質網膜有極強的親合力）: 形成跨膜蛋白,3、線粒體和葉綠體蛋白質的運送與組裝,后轉移（post translocation）: 蛋白質在細胞質基質中合成以后在某種信號指導下再轉移到線粒體、葉綠體、過氧化物酶體等細胞器中的轉移方式. 這類信號序列稱導肽（leader peptide）或轉運肽（transit peptides):線粒體蛋白質在細胞質基質中合成起始階段形成的N端的信號序列。 20-80個氨基酸殘基 含有豐富的帶正電荷的堿性氨基酸，特別是精氨酸，有助于前導肽進入帶負電荷的基質中。 羥基氨基酸含量也高 幾乎不含帶負電荷的酸性氨基酸 可形成既具親水性又具疏水性的a螺旋結構

25、,定位于線粒體基質的蛋白質的運送,定位于線粒體內膜或膜間隙的蛋白質運送,葉綠體蛋白質的運送及組裝,Some Signal Sequences,FunctionofSignalExample of Signal Sequence Import into ER+H3N-Met-Met-Ser-Phe-Val-Ser-Leu-Leu-Leu-Val-Gly-Ile-Leu-Phe-Trp-Ala-Thr-Glu-Ala-Glu-Gln-Leu-Thr-Lys-Cys-Glu-Val-Phe-Gln- Retention in lumen of ER-Lys-Asp-Glu-Leu-COO- Impo

26、rt into mitochondria+H3N-Met-Leu-Ser-Leu-Arg-Gln-Ser-Ile-Arg-Phe-Phe-Lys-Pro-Ala-Thr-Arg-Thr-Leu-Cys-Ser-Ser-Arg-Tyr-Leu-Leu- Import into nucleus-Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val- Import into peroxisomes-Ser-Lys-Leu- Positively charged amino acids are shown in red, and negatively charged amino acids

27、in green. An extended block of hydrophobic amino acids is shown in blue. +H3N indicates the amino terminus of a protein; COO- indicates the carboxyl terminus.,三、胞內膜泡運輸,膜泡是被包被的 大多數運輸小泡是在膜的特定區(qū)域以出芽的方式產生的。其表面具有一個籠子狀的由蛋白質構成的衣被（coat）。這種衣被在運輸小泡與靶細胞器的膜融合之前解體。 衣被類型：已知三類 COPII COPI 網格蛋白（clathrin） 主要作用： 選擇性的將特

28、定蛋白聚集在一起，形成運輸小泡 如同模具一樣決定運輸小泡的外部特征,馬達蛋白牽引衣被小泡沿微管運輸 在馬達蛋白（motor protein）的牽引下，可將膜泡運到特定的區(qū)域 胞質中微管motor protein分為兩大類： 驅動蛋白（kinesin），趨向微管正極； 動力蛋白（dynein），趨向微管負極；,三、胞內膜泡運輸,1、COP衣被小泡,運輸途徑：介導從內質網到高爾基體的物質運輸。 COP II衣被由多種蛋白質構成，Sec23/Sec24復合體在內，Sec13/Sec31復合體覆蓋在外層。 大多數被運輸的跨膜蛋白是直接結合在COP II衣被上，少數跨膜蛋白和多數可溶性蛋白通過受體與CO

29、P II衣被結合。 分選信號位于跨膜蛋白胞質面的結構域，形式多樣,2、COP I衣被小泡,功能：負責回收、轉運內質網逃逸蛋白（escaped proteins）返回內質網 回收信號，即內質網駐留信號(ER retention signal)：Lys-Asp-Glu-Leu（KDEL）。 COP I 還可以介導高爾基體不同區(qū)域間的蛋白質運輸。,ER駐留蛋白的運輸 高爾基體膜: 有識別KDEL信號的受體,形成小泡,將逃逸的蛋白送回 內質網膜蛋白(如 SRP 受體)在 C 端有一個不同的回收 信號,通常是 Lys-Lys-X-X（KKXX），能與COP I包被識別結合。,Lys-Asp-Glu-Le

30、u（KDEL）,Cop I Vesicles,COP I 由7種蛋白組成, COP ,Cop I and Cop II Vesicles,3、網格蛋白有被小泡,相關運輸途徑：質膜內體，高爾基體內體，高爾基體溶酶體、植物液泡。,網格蛋白(clathrin)結構：由3個重鏈和3個輕鏈組成，形成一個具有3個曲臂的形狀。許多網格蛋白的曲臂部分交織在一起，形成具有5邊形網孔的籠子。,Clathrin coated vesicles,Selective transport by clathrin coated vesicles,銜接蛋白(adaptin)：介于網格蛋白與配體受體復合物之間，起連接作用。目前

31、至少發(fā)現4種，分別結合不同類型的受體，形成不同性質的轉運小泡。,當網格蛋白有被小泡形成時，可溶性蛋白dynamin聚集成一圈圍繞在芽的頸部，將小泡柄部的膜盡可能地拉近（小于1.5nm），從而導致膜融合，掐斷（pinch off）衣被小泡。,4、 coat-recruitment GTPase,衣被是在coat-recruitment GTPase （為單體GTPase, monomeric GTPase）作用下形成的。 coat-recruitment GTPase存在于細胞質中，但處于結合GDP的失活狀態(tài)。衣被小泡形成時，釋放GDP，結合GTP而激活。 調節(jié)因子有： 鳥苷酸交換因子（guan

32、ine-nucleotide exchange factor, GEF） GTP酶激活蛋白（GTPase activating protein, GAP）。 當衣被小泡從膜上釋放后，衣被很快就解體。 coat-recruitment GTPase包括ARF蛋白和SAR 1蛋白。 ARF參與高爾基體上網格蛋白衣被與COP I衣被的形成。 SAR 1參與內質網上COP II衣被的形成。,COP II Coat assembly,三種衣被小泡的組成和功能,根據胞吞的物質是否具有專一性，胞吞作用分為： 非特異性胞吞作用 受體介導的胞吞作用（Receptor-mediated endocytosis）：

33、是大多數動物細胞通過網格蛋白有被小泡從胞外基質攝取特定大分子的有效途徑。,5、受體介導的胞吞作用,受體介導的胞吞過程,配體(Ligand)： 營養(yǎng)物 有害物質 免疫物質 信號物質,6、胞吐途徑,組成型的胞吐途徑（constitutive exocytosis pathway） 所有真核細胞 連續(xù)分泌過程 用于質膜更新（膜脂、膜蛋白），胞外基質組分、營養(yǎng)或信號分子分泌 default pathway：除某些有特殊標志的駐留蛋白和調節(jié)的分泌泡外，其余蛋白的轉運途徑： 粗面內質網高爾基體分泌泡細胞表面,6、胞吐途徑,調節(jié)型外排途徑（regulated exocytosis pathway） 特化的分

34、泌細胞 儲存刺激釋放 產生分泌物（如激素、粘液或消化酶） 具有共同的分選機制，分選信號存在于蛋白本身，分選主要由高爾基體TGN上的受體類蛋白來決定,7、溶酶體的發(fā)生,初級溶酶體是在高爾基體的trans面以出芽的形式形成,Transport of newly synthesized hydrolases to lysosomes,高爾基體TGN通過對M6P的識別將溶酶體的酶分選出來 溶酶體的酶上都有一個特殊的標記6-磷酸甘露糖(M6P),7、溶酶體的發(fā)生,Targeting of soluble lysosomal enzymes to endosomes and lysosomes by M-

35、6-P tag,7、溶酶體的發(fā)生,M6P標記是溶酶體酶甘露糖殘基在CGN磷酸化形成的,The recognition of a lysosomal hydrolase in Golgi and mannose phosphorylation,總結： 內質網上核糖體合成溶酶體蛋白進入內質網腔進行N-連接的糖基化修飾進入高爾基體cis面膜囊磷酸轉移酶識別溶酶體水解酶的信號斑將乙酰葡糖胺磷酸轉移在12個甘露糖殘基上在中間膜囊切去N-乙酰葡糖胺形成M6P配體與trans膜囊上的受體結合通過clathrin衣被包裝成初級溶酶體 。（see next）,7、溶酶體的發(fā)生,四、膜泡運輸的定向機制,膜泡運輸是特異性過程，涉及多種蛋白識別、組裝、去組裝的復雜調控 膜泡融合是特異性的選擇性融合 選擇性融合基礎在于供體膜蛋白與受體膜蛋白的特異性相互作用,（一）運輸小泡的膜與靶膜的特異性融合由蛋白質SNAREs 介導 位于運輸小泡上的叫作v-SNAREs，位于靶膜上的叫作t-SNAREs。 v-和t-SNAREs都具有一個螺旋結構域，能相互纏繞形成跨SNAREs復合體（trans-SNAREs complexes），將運輸小泡的膜與靶膜拉在一起，實現運輸小泡特異性停泊和融合。,四、膜泡運輸的定向