1、凝血檢測質(zhì)量保證,炮制雖繁 必不敢省人工 品味雖貴 必不敢減物力,臨床實驗室的質(zhì)量控制,室內(nèi)質(zhì)控,室內(nèi)比對,室間比對,室間質(zhì)評,分析前 質(zhì)量控制,分析后 質(zhì)量控制,1、抗凝劑：109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝。 與鈣離子形成可溶性螯合物而起到抗凝作用 有效阻止凝血因子FV、FVIII的降解 不受肝素影響，以用于肝素治療的監(jiān)測 EDTA ：抑制或干擾纖維蛋白凝塊形成纖維蛋白單體聚合， 對FV保護性差。 肝素：可與AT-作用抑制凝血因子的反應(yīng)。 草酸鹽：與鈣離子形成不溶性沉淀物，影響血凝儀的光電終點。,分析前,2、采血管順序（CLSI H3-A6）： 血培養(yǎng)管， 凝血項目管（如：藍帽） 含有或不含促

2、凝劑、含有或不含分離 膠的血清管（如：紅帽） 含有或不含分離膠的肝素血漿管（如：綠帽） 含有或不含分離膠的EDTA 管（如：紫帽或珍珠色帽） 含酵解抑制劑管（如：灰帽） 對于凝血項目該文件改變了第一管必須棄置的要求，當(dāng)凝血管為第一管時，無論是正常人或口服華法令患者其PT或INR均不受影響，正常人的APTT不受影響。但是尚不知其它凝血項目是否受到影響，因此對其它凝血項目，還是建議第二管采集。,分析前,3、采血管：內(nèi)壁應(yīng)硅化，而且死腔量越小越好。 4、采血量：通常按1：9的抗凝比例采血。 但對于HCT55%的患者，血漿相對于抗凝劑量會減少，使凝血試驗的結(jié)果延長，應(yīng)調(diào)整采血量。 需取出抗凝劑量(ml

3、)=0.3-血量（ml）0.00185 (100-HCT%) 5、標本送檢條件：室溫下2小時內(nèi)送檢，低溫會損傷血小板活化因子，使PT結(jié)果降低。 6、標本保存時間：2-8 4小時，-20 1周，-80 6個月。 7、凝血、溶血標本為不合格標本。,分析前,造成標本溶血的原因,室內(nèi)質(zhì)控,室內(nèi)質(zhì)控的功能：查找分析測定中的誤差，即用室內(nèi)質(zhì)控物的檢測結(jié)果去確認常規(guī)標本檢測結(jié)果的有效性，如果確認通過，此時的常規(guī)標本檢驗結(jié)果才可用于疾病的診斷、治療及預(yù)后觀察等,室內(nèi)質(zhì)控,質(zhì)控品的選擇 1.1 檢測系統(tǒng)配套的質(zhì)控品 1.2 第三方質(zhì)控品 1.3 質(zhì)控品要求,自動質(zhì)控！,室內(nèi)質(zhì)控,室內(nèi)質(zhì)控項目、質(zhì)控頻度 2.1

4、室內(nèi)質(zhì)控項目 PT、INR、APTT、Fbg、TT、DD、FDP 2.2 質(zhì)控頻度,允許CV建立與評估 2012年凝血允許CV評估,失控率 儀器失控率 項目失控率,室內(nèi)質(zhì)控,質(zhì)控目標的確立,室內(nèi)質(zhì)控,質(zhì)控靶值及SD的累積 4.1 靶值設(shè)定？ 質(zhì)控廠商提供的數(shù)據(jù)僅供參考！ 不同儀器對同一批號質(zhì)控的反應(yīng)程度不一樣！ 4.2 SD設(shè)定？,室內(nèi)質(zhì)控,質(zhì)控規(guī)則（Westgard多規(guī)則） 5.1 警告：12s、10 x、41s 5.2 失控：22s、13s、R4s,室內(nèi)質(zhì)控,6. 室內(nèi)質(zhì)控月報表、失控處理記錄,室內(nèi)比對,1、頻率：每年2次。 2、參與儀器：所有儀器，以參加EQA的儀器為參考儀器。 3、執(zhí)行

5、人員：當(dāng)班人員、質(zhì)控員；組長、主任簽字確認。 4、比對血漿：收集高、中、低水平新鮮血漿共20份。 5、比對項目：PT、INR、APTT、FBG、TT、DD。 6、數(shù)據(jù)處理：錄入專用的EXCEL表格，統(tǒng)計r、bias%。 7、判斷標準：PT、INR、APTT、FBG、DD各項 r0.975，并且80%的樣本bias%在下列標準 范圍內(nèi)為合格。 8、比對試驗不合格的儀器需啟用校準程序。,室內(nèi)比對,*,*,WFH,衛(wèi)生部、北京市,CAP,室間質(zhì)評,室間質(zhì)評,室間質(zhì)評,室間質(zhì)評失控處理,*,室間質(zhì)評,室間質(zhì)評失控處理-1,*,室間質(zhì)評,室間質(zhì)評失控處理-2,*,*,*,*,室間質(zhì)評,室間質(zhì)評失控處理-

6、3,APTT、TT無定標項目 1、訂貨量； 2、東西兩院保持批號一致； 3、試劑更換批號后進行標本傳遞（質(zhì)控品、標本），觀察批間差。,室間質(zhì)評,標本傳遞舉例,怎么來？ 怎么用？,APTT 100s或 15s； Fbg 1.0g/L； FDP 40g/ml，同時Fbg 1.0g/L； PT 70s或9s； TT 150s；,危急值,分析后,分析后,華法林凝血酶原時間（Prothrombin Time, PT）,Local ISI,ISI值確定？ ISI是什么：反映試劑對Vitamin K依賴的凝血因子水平的敏感程度，通過國際參考品（International reference preparat

7、ion，IRP）來溯源。,Local ISI,計算MNPT和ISI值,PT-INR系統(tǒng)校準,Local ISI,Local ISI,直接INR測定 用56個濃度的認證血漿（不同系統(tǒng)的定值不一樣）產(chǎn)生本實驗室的校準線。 使用本實驗的凝血活酶/聯(lián)合試劑測定認證血漿的PT值，將所得的結(jié)果和認證血漿的INR賦值繪成對數(shù)圖。 可以用線性的或正交的回歸方法繪制校準線，從校準線上讀取患者的INR值。這種方法與ISI和正常人PT均值（MNPT）無關(guān)。所有的本地因素都被消除了。,PT-INR系統(tǒng)校準,Local ISI,用參考血漿對試劑進行定標作校準曲線，根據(jù)定標曲線直接得到INR 室間的變異可以大大降低 多點

8、定標進行的校準更加精密準確 所有的當(dāng)?shù)匾蛩囟急幌?Local ISI,采用INR定值血漿校準當(dāng)?shù)氐腜T/INR檢測系統(tǒng)，不僅使INR結(jié)果更加準確，而且加強了實驗室間的INR結(jié)果的一致性，使口服抗凝劑的監(jiān)測更加有效。,Local ISI定標: PT-INR的標準化絕不僅僅是對某一儀器或某一試劑的校準，從實驗室角度出發(fā)是對整個系統(tǒng)（System）的標準化！ “一個樣本，一個結(jié)果”，不同系統(tǒng)結(jié)果趨于一致。,Local ISI,性能驗證的目的,確保正確的選擇實驗室方法，并在方法使用前進行充分、有效的評價，以保證方法的可靠性 對實驗室正在使用的檢驗系統(tǒng)/方法進行定期的、有效的驗證，以保證所使用的檢驗

9、系統(tǒng)/方法能夠滿足臨床和患者的需求，并保證檢驗系統(tǒng)/方法的可靠性,定量方法的性能驗證,精密度 準確度評價 線性 攜帶污染 方法學(xué)比較 參考范圍驗證 分析干擾及稀釋驗證,性能驗證內(nèi)容,批內(nèi)不精密度,性能驗證內(nèi)容,日間精密度,性能驗證內(nèi)容,準確度：是測量結(jié)果中系統(tǒng)誤差與隨機誤差的綜合，表示測量結(jié)果與真值的一致程度。保證檢驗結(jié)果準確性最有效的手段是建立和保證檢驗結(jié)果的溯源性 計算定值參考物質(zhì)或校準品的測定值（測定三次取均值）與靶值的偏差 判斷標準：小于1/2CLIA88允許變異,性能驗證內(nèi)容,線性：選取一份接近預(yù)期上限的高值血漿樣本（H），分別按100%、90%、75%、50%、25%的比例進行稀釋

10、，每個稀釋度重復(fù)測定2次，計算均值。將實測值與預(yù)測值作比較（偏離應(yīng)小于10%），計算 y=ax+b，驗證線性范圍。 判斷結(jié)果：a值在10.1范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)R2 0.95,性能驗證內(nèi)容,攜帶污染：指分析物含量高的標本對分析物含量低的標本其測定結(jié)果的影響 攜帶污染率=(L1-L3)/(H3-L3)*100% 攜帶污染率3%,性能驗證內(nèi)容,稀釋驗證：選取高值樣本，分別以儀器自動稀釋和手工法兩種方式，按照 原倍、1/2、1/4、1/8、1/16、1/32的比例進行稀釋，將兩次結(jié)果比較，偏離應(yīng)小于10%。,性能驗證內(nèi)容,參考范圍驗證： 收集20例健康人血漿，年齡20-70歲，男10例，女10例 計算檢測系統(tǒng)的R值（R值=落在參考范圍內(nèi)的樣本數(shù)/總樣本數(shù)）。要求R0.9,性能驗證內(nèi)容,方法學(xué)比對：為保證檢驗結(jié)果的可比性，使用實驗室的不同分析系統(tǒng)和/或公認的參考方法同時檢測一批病人標本，從測定結(jié)果的差異了解不同分析系統(tǒng)之間的偏倚 標本范圍應(yīng)涵蓋所比對項目的高中低值，正常結(jié)果占4060%，分別用被比較的儀器方