1、第6章RNA的生物合成(轉(zhuǎn)錄)、(RNA Biosynthesis，Transcription )，轉(zhuǎn)錄是指以DNA為模板合成RNA的過程。 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的區(qū)別，第一節(jié)轉(zhuǎn)錄的基本規(guī)律和體系，一、非對稱轉(zhuǎn)錄，1. DNA分子上轉(zhuǎn)錄RNA的區(qū)段稱為結(jié)構(gòu)基因(structural gene )。 在結(jié)構(gòu)基因中能夠轉(zhuǎn)錄生成RNA的單鏈，也被稱為模板鏈(template strand )，有意義的鏈或Watson鏈。 另一條鏈是編碼鏈，也稱為反義鏈或Crick鏈。 (1)轉(zhuǎn)錄模板，(basicrulesandsystemoftranscription )，2 .在含有多個基因的DNA分子中，各基因的模板鏈

2、不一定在同一鏈上1 .轉(zhuǎn)錄的非對稱性2 .轉(zhuǎn)錄方向的單向性3 .轉(zhuǎn)錄不需要引物形成連續(xù)性4 .轉(zhuǎn)錄過程包括特定的開始和結(jié)束點、二、RNA轉(zhuǎn)錄體系、(一)模板、結(jié)構(gòu)基因雙鏈中的單鏈。 (二)原料、4種核糖酸： ATP、UTP、GTP、CTP。 (3)RNA聚合酶、1 .原核生物的RNA聚合酶、RNA聚合酶全酶在轉(zhuǎn)錄起始區(qū)的結(jié)合、DNA、原核生物的RNA聚合酶、2 .真核生物的RNA聚合酶、RNA轉(zhuǎn)錄除此之外還需要參與一些蛋白因子。 例如原核生物是結(jié)束轉(zhuǎn)錄過程的因子。 真核生物聚合酶開始轉(zhuǎn)錄時的轉(zhuǎn)錄因子。 (4)蛋白因子、第二節(jié)RNA轉(zhuǎn)錄過程、(1)轉(zhuǎn)錄開始、轉(zhuǎn)錄開始必須解決兩個問題；(1)RNA

3、聚合酶必須正確結(jié)合轉(zhuǎn)錄模板的起始區(qū)域。 (2)解開DNA雙鏈，其中一條鏈作為轉(zhuǎn)錄的模板。 一、原核生物的轉(zhuǎn)錄過程、(The Process of Transcription )、(2) DNA雙鏈解。 (1) RNA聚合酶全酶(2)與模板保存序列結(jié)合。 (通過RNA-pol形成轉(zhuǎn)印開始復(fù)合體。 RNApol (2) - DNA - pppGpN- OH 3，(4)轉(zhuǎn)錄開始復(fù)合體： 2，2 .轉(zhuǎn)錄起始過程，原核生物啟動子的保守序列，(2)轉(zhuǎn)錄延長，1 .亞基脫落，(NMP) n NTP (NMP) n 1 PPi，轉(zhuǎn)錄空泡：rnapol (核酶) DNA RNA，2 .原核生物2 .離非依賴因子

4、轉(zhuǎn)錄終止DNA模板上終止位置近的一些特殊堿基序列可轉(zhuǎn)錄具有莖環(huán)結(jié)構(gòu)的RNA來終止轉(zhuǎn)錄。 二、真核生物的轉(zhuǎn)錄開始、(一)轉(zhuǎn)錄開始、(一)轉(zhuǎn)錄因子、(一)能夠直接間接識別、結(jié)合轉(zhuǎn)錄上游部DNA的蛋白質(zhì)，目前發(fā)現(xiàn)了數(shù)百種，統(tǒng)稱為轉(zhuǎn)活性因子(trans-acting factors )，在(2)轉(zhuǎn)錄作用因子中真核生物的轉(zhuǎn)錄起始上游區(qū)有不同DNA序列的順式作用元件，轉(zhuǎn)錄起始時RNA-pol不直接與模板結(jié)合，而是由轉(zhuǎn)錄因子識別起始部位。 參與RNA-pol轉(zhuǎn)錄的TF，* * * ctd (carboxylterminaldomain ) 3360 RNA-pol大亞單元羧基末端結(jié)構(gòu)域。 * * taf (

5、tbpassociatedfactors ) : TBP輔助因子。 每個基因轉(zhuǎn)錄都有不同的TAF輔助。* TBP (tatabindingprotein ) : Tata結(jié)合蛋白。 轉(zhuǎn)印開始點、轉(zhuǎn)印開始點、TATA外殼、CAAT外殼、GC外殼、增強子、順式作用元件3 .轉(zhuǎn)印開始前復(fù)合體、PIC、(2)轉(zhuǎn)印延長(3)轉(zhuǎn)錄終止，與轉(zhuǎn)錄后修飾密切相關(guān)。 三、轉(zhuǎn)錄后的加工修飾，主要修飾方式為切割、切割、修飾、添加。、剪切(cleavage )、剪切(splicing )、(1)真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工、1. 5端形成帽子結(jié)構(gòu)(m7GpppNm )。 2 .在3端加上聚腺苷酸尾(poly A tai

6、l )。 3.mRNA的切斷，真核生物結(jié)構(gòu)基因，有幾個編碼區(qū)和非編碼區(qū)相互分離，但是連續(xù)嵌入，稱為切斷基因。 (1)斷裂基因(splite gene )、(2)外顯子(exon )出現(xiàn)在斷裂基因及其一次轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中，表達為成熟RNA的核酸序列。 (3)內(nèi)含子阻斷基因的線性表達，切斷過程中被除去的核酸序列。 雞蛋白白基因、hnRNA、頸、尾修飾、hnRNA切斷、成熟的mRNA、雞蛋白基因及其轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后修飾、轉(zhuǎn)錄、內(nèi)切酶、tRNA核苷酸轉(zhuǎn)移酶、連接酶，ATP如U DHU、(3)核苷酸脫氨反應(yīng)，例如a 1，A Am，(1)甲基化，t環(huán)，(rRNA 2.cDNA，是指與以RNA為模板反轉(zhuǎn)錄合成的RNA堿基序列互補的DNA鏈。 二、反轉(zhuǎn)錄研究的意義，(一)反轉(zhuǎn)錄酶和反轉(zhuǎn)錄