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RNA建庫(kù)流程,葛瑋珍 2014.4.11,2,From Weihua Zeng & Ali Mortazavi Nature immunology,一、RNA-seq實(shí)驗(yàn)流程,樣品制備,樣品檢測(cè),文庫(kù)構(gòu)建,文庫(kù)庫(kù)檢,上機(jī)測(cè)序,二、文庫(kù)類型,根據(jù)研究對(duì)象不同選擇相應(yīng)的建庫(kù)方法:,mRNA/lncRNA建庫(kù)流程,5,Oligo dT磁珠富集mRNA,Ribo-zero kit去除rRNA,6,Ribo-zero kit去除rRNA,7,Ribo-Zero Kit Selection Guide,8,Small RNA文庫(kù)構(gòu)建流程,P,OH,如何避免降解的mRNA/rRNA等污染: 樣品嚴(yán)格質(zhì)檢,RIN值合格。 PAGE膠電泳純化,回收符合small RNA大小的片段(140-160bp)。,Q & A ?,11,
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