1、,第十四章中藥制劑分析,Friday, August 21, 2020,藥物分析,2,第十四章 內(nèi)容,Friday, August 21, 2020,藥物分析,3,一、定義 中藥制劑是根據(jù)藥典、制劑規(guī)范和其它規(guī)定的處方，將中藥的原料藥物加工制成具有一定規(guī)格，可以直接用于防病、治病的藥品,第一節(jié) 概述,Friday, August 21, 2020,藥物分析,4,注意：中藥制劑必須是以中醫(yī)藥基礎(chǔ)理論和用藥原則為指導(dǎo)制成的單方或復(fù)方制劑。中藥的成方制劑又稱為中成藥,Friday, August 21, 2020,藥物分析,5,同物異名 同名異物,二、,中藥制劑分析的特點(diǎn),Friday, Augus

2、t 21, 2020,藥物分析,6,同物異名現(xiàn)象嚴(yán)重： 重樓為百合科Paris polyphylla Smith. 的根莖又名七葉一枝花、蚤休、草河車 拳參為蓼科Polygonum bistra L.的根莖又名草河車,Friday, August 21, 2020,藥物分析,7,生長環(huán)境、采收季節(jié)及部位差異,GAP 中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范,Friday, August 21, 2020,藥物分析,8,Friday, August 21, 2020,藥物分析,9,不同部位人參皂苷的含量,重量比(%) 總皂苷含量(%),周皮 6.9 2.60,韌皮 46.6 3.04,木質(zhì)部 46.5 0.31,

3、Friday, August 21, 2020,藥物分析,10,五倍子 鞣質(zhì)（70%） 槐米 蘆?。?0%） 長春花 長春新堿（百萬分之一） 美登木 美登木堿（千萬分之一）,各種有效成分含量相差懸殊,3.,Friday, August 21, 2020,藥物分析,11,中藥藥效的發(fā)揮是多種成分 協(xié)同作用的結(jié)果，因此應(yīng)從整體 上來控制中藥的質(zhì)量,成分復(fù)雜且大多數(shù)有效成分尚不十分清楚,Friday, August 21, 2020,藥物分析,12,Friday, August 21, 2020,藥物分析,13,例,三黃瀉心湯干浸膏,有效成分與濃縮干燥方法的關(guān)系(%),大黃酸葡萄糖苷 41.1 51

4、.6 96.8,小檗堿 34.5 37.5 94.5,黃連堿 6.3 12.0 93.7,黃岑苷 77.4 77.6 98.5,Friday, August 21, 2020,藥物分析,14,丸、散、片、錠、合、酒、酊、 膏、露、茶、栓、顆粒、糖漿等,劑型繁多，輔料干擾大,Friday, August 21, 2020,藥物分析,15,針對不同的劑型，采用相應(yīng)的方法進(jìn)行分離純化后測定,蠟丸 蜂蠟 蜜丸 蜂蜜 糊劑 糯米粉、黃米粉 曲劑 發(fā)酵 膠劑 豆油、黃酒、冰糖,Friday, August 21, 2020,藥物分析,16,中國藥典（2000年版）一部（二十六種）,丸劑 膠劑 膏藥 顆粒劑

5、 滴眼劑 散劑 合劑 露劑 糖漿劑 軟膏劑 片劑 酒劑 茶劑 滴丸劑 注射劑 錠劑 酊劑 搽劑 膠囊劑 滴鼻劑 栓劑 巴布膏劑 橡膠膏劑 氣霧劑噴霧劑 煎膏劑（膏滋） 流浸膏劑與浸膏劑,Friday, August 21, 2020,藥物分析,17,用藥材提取物制備的液體制劑,合劑、糖漿劑、酒劑、茶劑、酊劑 滴鼻劑、滴眼劑、露劑、搽劑等,（無植物組織與細(xì)胞，故無顯微鑒別）,Friday, August 21, 2020,藥物分析,18,合劑系指藥材用水或其他溶劑，采用適宜方法提取，經(jīng)濃縮制成的內(nèi)服液體制劑,Friday, August 21, 2020,藥物分析,19,酒劑,酊劑,藥材用蒸餾酒

6、提取制成的澄清液體制劑,藥物用規(guī)定濃度的乙醇提取或溶解而制成的澄清液體制劑,一般檢查項(xiàng)目,Friday, August 21, 2020,藥物分析,20,軟膏,常用基質(zhì) 油脂性、水溶性 乳劑型（乳膏劑）,藥物、藥材細(xì)粉、藥材提取 物與適量基質(zhì)混合制成的半 固體外用制劑,Friday, August 21, 2020,藥物分析,21,藥材提取液的濃縮液,煎膏劑(膏滋) 流浸膏劑與浸膏劑（半流體或固體）,（無植物組織與細(xì)胞， 故無顯微鑒別）,Friday, August 21, 2020,藥物分析,22,藥材用水煎煮、去渣濃縮后，加煉 蜜或糖制成的半流體制劑,應(yīng)無焦臭、異味，無糖結(jié)晶析出,Frid

7、ay, August 21, 2020,藥物分析,23,藥材用適宜的溶劑提取，蒸去部分或全部溶劑，調(diào)整濃度至規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)而制成的制劑,1ml流 浸膏 1g 原藥材 1g 浸膏 2 5g 原藥材,Friday, August 21, 2020,藥物分析,24,生產(chǎn)提取溶劑大多為水或稀醇,檢測時(shí)一般需經(jīng)有機(jī)提取后分析,對于流浸膏，有的測總固體量以控制其質(zhì)量,有效成分不明或無定量方法的，可 測一定溶劑的浸出物含量,有效成分明確且有適當(dāng)方法 ，測定有效成分的含量,Friday, August 21, 2020,藥物分析,25,藥材提取物、藥材粉末加賦形劑、制備而成,丸劑、膠劑、顆粒劑、散劑、片劑、 膠囊劑

8、、錠劑、膠劑、茶劑、栓劑,（有植物組織與細(xì)胞，可做顯微鑒別）,Friday, August 21, 2020,藥物分析,26,指藥材細(xì)粉或藥材提取物加適宜的黏合劑或其他輔料制成球形或類球形制劑，分為蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、濃縮丸、蠟丸、微丸等,Friday, August 21, 2020,藥物分析,27,裝量差異 (按一次劑量分裝的),水分、重量差異 (按丸或重量),溶散時(shí)限 微生物限度,檢查項(xiàng)目,Friday, August 21, 2020,藥物分析,28,大蜜丸、小蜜丸、濃縮蜜丸 15.0% 水蜜丸、濃縮水蜜丸 12.0% 水丸、糊丸、濃縮水丸 9.0%,高 低,Friday, Au

9、gust 21, 2020,藥物分析,29,Friday, August 21, 2020,藥物分析,30,一種或多種藥材混合制成的粉 末狀制劑，分內(nèi)服和外用散劑,Friday, August 21, 2020,藥物分析,31,取供試品適量置光滑紙上，平鋪 約5cm2，將其表面壓平，在亮處 觀察，應(yīng)呈現(xiàn)均勻的色澤，無花 紋、色斑,Friday, August 21, 2020,藥物分析,32,藥材提取物與適宜輔料或藥材細(xì) 粉制成的顆粒狀制劑，分為可溶性顆 粒劑、混懸性顆粒劑、泡騰性顆粒劑,Friday, August 21, 2020,藥物分析,33,粒度,Friday, August 21,

10、 2020,藥物分析,34,藥材提取物加藥材細(xì)粉或藥材細(xì) 粉與適宜輔料混勻壓制而成的園片狀 或異形片狀的制劑，分為浸膏片、半 浸膏片和全粉片,Friday, August 21, 2020,藥物分析,35,硬膠囊劑 軟膠囊劑 腸溶膠囊劑,Friday, August 21, 2020,藥物分析,36,第二節(jié) 中藥制劑分析的一般程序,提取 純化,Friday, August 21, 2020,藥物分析,37,利用溶質(zhì)在兩種互不相溶的溶 劑中溶解度的不同，使物質(zhì)從一種 溶劑轉(zhuǎn)移到另一種溶劑中，將測定 組分提取出來的方法,Friday, August 21, 2020,藥物分析,38,用于皂苷類,正

11、丁醇,氯仿,乙醚、石油醚,醋酸乙酯,（1）萃取溶劑的選擇.,用于生物堿類,用于黃酮類,用于揮發(fā)油,Friday, August 21, 2020,藥物分析,39,（2）水相pH的選擇,酸性成分 比其pKa低12個(gè)pH單位,比其pKa高12個(gè)pH單位 堿性成分,Friday, August 21, 2020,藥物分析,40,（3）儀器和提取次數(shù),（4）酒劑和酊劑先揮去乙醇,（5）防止和消除乳化,分液漏斗,鑒別1次,含量測定 3 4次,Friday, August 21, 2020,藥物分析,41,樣品置溶劑里，室溫下浸泡一段時(shí)間的提取方法,Friday, August 21, 2020,藥物分析

12、,42,親脂性, 親水性,石油醚 苯 氯仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙醇 甲醇 水,Friday, August 21, 2020,藥物分析,43,樣品置有機(jī)溶劑中加熱回流的提取方法,通過更換溶劑，使提取更完全,Friday, August 21, 2020,藥物分析,44,Friday, August 21, 2020,藥物分析,45,樣品置有機(jī)溶劑中加熱，蒸發(fā) 的溶劑經(jīng)冷凝流回樣品管的提取方 法,Friday, August 21, 2020,藥物分析,46,Friday, August 21, 2020,藥物分析,47,適用于具揮發(fā)性的可隨水蒸氣蒸出的組分的測定,麻黃堿、檳榔堿、丹皮酚、揮

13、發(fā)油,Friday, August 21, 2020,藥物分析,48,超聲波振蕩器（超聲波清洗器）,簡便 省時(shí) 提取率高,利用超聲波的助溶作用進(jìn)行提取,原理 超聲波在液體中以疏密相間的形式向物體輻射，出現(xiàn)“空化”現(xiàn)象（氣泡的形成、產(chǎn)生及破裂現(xiàn)象），形成超過1000個(gè)大氣壓的沖擊力,Friday, August 21, 2020,藥物分析,49,（SFE法）,當(dāng)壓力和溫度超過氣體的臨 界點(diǎn)時(shí)所形成的單一相態(tài),Friday, August 21, 2020,藥物分析,50,氣體,超臨界流體,氣體,T 壓力,T 壓力,Friday, August 21, 2020,藥物分析,51,SFE 工藝流程,

14、Friday, August 21, 2020,藥物分析,52,超臨界流體萃取與化學(xué)法萃取相比有以下突出的優(yōu)點(diǎn)：,（1） 它具有與液體相似的密度，因而具有與液體相似的較強(qiáng)的溶解能力；,（2）溶質(zhì)在流體中的擴(kuò)散系數(shù)與氣體相似，具有傳質(zhì)快，提取時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)；,（3）超臨界流體的表面張力為零，易滲透到樣品中，帶走測定組分；,Friday, August 21, 2020,藥物分析,53,（4）超臨界流體在通常狀態(tài)下為氣體，萃取后溶劑可立即變成氣體而逸出，易達(dá)到濃集的目的；,（6） CO2價(jià)格便宜，純度高，容易取得，且在生產(chǎn)過程中循環(huán)使用，從而降低成本；,（5） CO2是一種不活潑的氣體, 萃取過程不

15、發(fā)生化學(xué)反應(yīng),且屬于不燃性氣體,無味、無臭、無毒，故安全性好；,（7） 該技術(shù)易與其他儀器聯(lián)用實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化,Friday, August 21, 2020,藥物分析,54,1、,萃取法,利用藥物與雜質(zhì)溶解性能的不同進(jìn)行分離,Friday, August 21, 2020,藥物分析,55,（1）保留測定組分在柱上，洗去雜 質(zhì)，再用適當(dāng)溶劑洗下組分,（2）保留雜質(zhì)于柱上,Friday, August 21, 2020,藥物分析,56,鑒定有臨床療效的已知成分,黃連 小檗堿（抗菌消炎） 麻黃 麻黃堿（支氣管哮喘） 烏頭 烏頭堿（毒性） 洋地黃 強(qiáng)心苷（強(qiáng)心） 延胡索 延胡索乙素（鎮(zhèn)痛）,Friday,

16、 August 21, 2020,藥物分析,57,（含生藥粉制劑）,丸劑、片劑、膠囊劑、散劑,快速，簡便，覆蓋面大,Friday, August 21, 2020,藥物分析,58,1、水牛角濃縮粉,2、麝香,3、珍珠,4、朱砂,5、雄黃,6、黃連,7、梔子,8、郁金,9、黃芩,安宮牛黃丸,Friday, August 21, 2020,藥物分析,59,抗干擾能力差,顯色、熒光,Friday, August 21, 2020,藥物分析,60,TLC法應(yīng)用最多 （Rf、顏色、熒光）,GC法 適用于含揮發(fā)性成分 的藥物,HPLC法常與含量測定同時(shí)進(jìn) 行,Friday, August 21, 2020

17、,藥物分析,61,陰、陽對照法,陽性對照 將要鑒別的藥材按制劑 工藝處理，再按鑒別方 法提取的溶液,陰性對照 把制劑中要鑒別的藥材 除去，用剩下的各味藥 按制劑工藝處理，再按 鑒別方法提取的溶液,Friday, August 21, 2020,藥物分析,62,O O O O O O O O O O ,例,陽性對照,陰性對照,樣品,Friday, August 21, 2020,藥物分析,63,大補(bǔ)陰丸 黃柏的TLC法鑒別,例,Friday, August 21, 2020,藥物分析,64,薄層板的選擇,硅膠G板（可加0.3% 0.5% CMC-Na） 多用,氧化鋁板 常用于生物堿類藥物,聚酰胺

18、板 常用于黃酮類及酚類 藥物,纖維素板 常用于氨基酸類藥物,定義： 中藥材或中藥制劑經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標(biāo)定該中藥材或中藥制劑特性的共有峰的圖譜,（四）中藥鑒別新技術(shù)中藥指 紋圖譜,Friday, August 21, 2020,藥物分析,66,2. 色譜指紋圖譜的基本屬性,模糊性 強(qiáng)調(diào)分析、比較指紋圖譜的相似性，而不是完全相同。,是一種綜合的、量化的色譜鑒別手段。,整體性 將指紋圖譜作為一個(gè)整體來分析和比較它的綜合特征以達(dá)到鑒別的目的。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,67,色譜指紋圖譜在中藥質(zhì)量評價(jià)中能夠盡可能多地反應(yīng)中藥的全貌。 不需要清

19、楚每一個(gè)組分的化學(xué)結(jié)構(gòu)；不需要對每一個(gè)組分都進(jìn)行定量；只要求不同批號的同一種藥品的指紋圖譜保持一致。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,68,3. 指紋圖譜的應(yīng)用,Friday, August 21, 2020,藥物分析,69,雅蓮,云蓮,味蓮,雅蓮,云蓮,Friday, August 21, 2020,藥物分析,70,I,III,II,訶 子,小訶子,大訶子,絨毛訶子,Friday, August 21, 2020,藥物分析,71,人參須根,人參主根,Friday, August 21, 2020,藥物分析,72,不同產(chǎn)地高良姜的氣相指紋圖譜,Friday, Augu

20、st 21, 2020,藥物分析,73,指紋圖譜研究過程中的注意事項(xiàng)： 1、在藥效學(xué)指導(dǎo)下進(jìn)行研究，保證指紋圖譜反映的化學(xué)成分包括中藥材中有效部位所含的絕大部分成分或有效成分的全部。 2、樣品的預(yù)處理過程及測定方法應(yīng)簡便、經(jīng)濟(jì)、易行，且專屬性、準(zhǔn)確度與重現(xiàn)性好。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,74,水分 總灰分和酸不溶性灰分 重金屬 砷鹽 殘留農(nóng)藥,主要項(xiàng)目,Friday, August 21, 2020,藥物分析,75,雜質(zhì)來源及檢查意義,水分 結(jié)塊、霉變或有效成分水解,灰分 控制藥物本身及泥土、沙石 等無機(jī)雜質(zhì),砷鹽 劇毒，常由除草劑、殺蟲劑 或化肥引入,重金屬

21、 環(huán)境污染和使用農(nóng)藥引入,殘留農(nóng)藥 有毒,Friday, August 21, 2020,藥物分析,76,烘干法（不含或少含揮發(fā)性成分） 甲苯法 （含揮發(fā)性成分） 減壓干燥法（含揮發(fā)性成分貴重藥） GC法,Friday, August 21, 2020,藥物分析,77,酸不溶性灰分的測定,總灰分的測定,Friday, August 21, 2020,藥物分析,78,Friday, August 21, 2020,藥物分析,79,干法破壞（ChP）,濕法破壞（USP）,Friday, August 21, 2020,藥物分析,80,堿融法破壞 濕法破壞,Friday, August 21, 20

22、20,藥物分析,81,Friday, August 21, 2020,藥物分析,82,中國藥典中藥制劑含量測定所占比例 版本 % 1977 1.48 1985 5.31 1990 8.73 1995 12.81 2000 62.09 （HPLC 36% TLCS 24% GC 3%),Friday, August 21, 2020,藥物分析,83,測定項(xiàng)目的選定原則,1 首選君藥及貴重藥、劇毒藥建立 含量測定方法 2 其次考慮臣藥及其他味藥 3 有效成分明確的，可選有效成分 4 成分類別清楚的，可測某一類總 成分的含量,Friday, August 21, 2020,藥物分析,84,5 檢測成

23、分應(yīng)歸屬某單一藥味 6 檢測成分應(yīng)與中醫(yī)用藥的功能主 治相近 7 確無法含量測定的，可測定浸出 物含量,Friday, August 21, 2020,藥物分析,85,重量分析法 容量分析法,特點(diǎn) A、準(zhǔn)確度、精密度高 B、抗干擾能力差,Friday, August 21, 2020,藥物分析,86,UV法 比色法,特點(diǎn) A、靈敏度高 B、簡便、快速 C、精密度稍低 D、干擾多,Friday, August 21, 2020,藥物分析,87,蘆丁,黃芩苷,小檗堿,丹皮酚,Friday, August 21, 2020,藥物分析,88,測定薄層板上斑點(diǎn)對單色光的吸 收或反射的強(qiáng)度而進(jìn)行定量的方法

24、,特點(diǎn) A、分離效果好 B、適用于無法用UV、HPLC 法測定的組分 C、準(zhǔn)確度、精密度低于HPLC,Friday, August 21, 2020,藥物分析,89,2000年版中國藥典（2000年版）薄層掃描法品種,品種數(shù)量 TLCS數(shù)量 占總數(shù)% 534（藥材） 20 3.74 458（成藥） 32 6.99 978（總數(shù)） 52 10.73,Friday, August 21, 2020,藥物分析,90,（1）薄層色譜條件,分離好 不拖尾,（2）檢測方法,吸收測定法 熒光測定法,反射法 透射法,（3）掃描方式,單波長 雙波長,線性掃描法 鋸齒掃描法,外標(biāo)法 內(nèi)標(biāo)法,Friday, Aug

25、ust 21, 2020,藥物分析,91,（4）散射參數(shù)SX,薄層板的散射使,Kubelka-Munk方程,Friday, August 21, 2020,藥物分析,92,（1）薄層板 均勻、平整,（2）點(diǎn)樣量 準(zhǔn)確,（4）顯色劑 均勻、適當(dāng),（5）保護(hù)斑點(diǎn) 用相同大小潔凈玻璃蓋住薄層板，并用透明膠紙封住邊緣，以起固定和隔絕空氣作用,（3）斑點(diǎn) 應(yīng)完全分離，不拖尾,Friday, August 21, 2020,藥物分析,93,外標(biāo)法（兩點(diǎn)校正法）,Friday, August 21, 2020,藥物分析,94,Friday, August 21, 2020,藥物分析,95,RP - HPLC

26、,PIC,反離子 氫氧化四丁基銨,色譜柱 ODS,RP - PIC,反離子 烷基磺酸鹽 無機(jī)陰離子,外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法,Friday, August 21, 2020,藥物分析,96,離子對色譜法（PIC） 極性流動(dòng)相中加入離子對試劑， 與被分析離子生成中性離子對，從而 增加在非極性固定相中的溶解度，使 分配系數(shù)增大,Friday, August 21, 2020,藥物分析,97,2000年版中國藥典（2000年版）HPLC法品種,品種數(shù)量 HPLC數(shù)量 占總數(shù)% 534（藥材） 54 10.11 458（成藥） 48 10.48 978（總數(shù)） 102 20.59,Friday, August

27、21, 2020,藥物分析,98,應(yīng)用實(shí)例-小青龍合劑,處方 麻黃125g 桂枝125g 白芍125g 干姜125 五味子125g 細(xì)辛62g 甘草(蜜炙) 法半夏188g NOTES：合劑是在傳統(tǒng)湯劑基礎(chǔ)上改進(jìn)后的一種新劑型,生物堿,桂皮醛,芍藥甙,揮發(fā)油,三萜皂甙,Friday, August 21, 2020,藥物分析,99,應(yīng)用實(shí)例-小青龍合劑,制法 以上八味，細(xì)辛、桂枝提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣與白芍、麻黃、五味子、甘草加水煎煮至味盡，合并煎液，濾過，濾液和蒸餾后的水溶液合并，濃縮至約1000ml。法半夏、甘姜照流浸膏劑項(xiàng)下滲漉法，用70%乙醇作溶劑，浸漬24小時(shí)后進(jìn)行

28、滲漉，漉液濃縮，與上述藥液合并，靜置，濾過，濾液濃縮至1000ml，加入苯甲酸鈉3g與細(xì)辛、桂枝揮發(fā)油，攪勻，即得。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,100,性狀 本品為棕黑色的液體；氣微香，味甜、微辛。 功能與主治 解表化飲，止咳平喘。用于風(fēng)寒水飲，惡寒發(fā)熱，無汗，喘咳痰稀。 用法與用量 口服，一次10-20ml，一日3次，用時(shí)搖勻。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,101,方藥分析： 君 麻黃發(fā)汗為君 臣 桂枝解表為臣 佐 甘草恐發(fā)汗太過, 佐以甘草緩 之 使 白芍、干姜、細(xì)辛、法半夏、五 味子幾藥合力共為使。 可外發(fā)汗，內(nèi)行水，散表里之

29、邪。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,102,漢代張仲景傷寒論小青龍湯 近代由重慶桐君閣中藥廠該湯劑為合劑 本方治療傷寒表不解，心下有水氣，干嘔，發(fā)熱而咳。近代也用于慢性支氣管炎，支氣管哮喘、肺氣腫，均見咳、喘、痰白清稀者。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,103,供試品溶液與陰性對照液的制備： 取合劑10 ml，石油醚分3次萃取，合并石油醚萃取液油層，濃縮至1ml，為供試品溶液A； 水層用Na2CO3調(diào)PH11-12，用氯仿萃取，合并氯仿萃取液，回收氯仿至干，殘?jiān)?ml甲醇溶解，為供試品溶液B； NOTES：陰性對照液如上法同步進(jìn)行。,F

30、riday, August 21, 2020,藥物分析,104,1. 桂皮醛的鑒別 取供試品液A、陰性對照液、桂皮醛對照液（1ug/ml）15ul，點(diǎn)于同一硅膠G板上，環(huán)己烷-乙酸乙酯（17：3）展開，晾干，噴2，4二硝基苯肼乙醇T.S，供試品A與對照品在相應(yīng)位置上顯相同的橙色斑點(diǎn)，而陰性對照液無此斑點(diǎn)。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,105,2. 細(xì)辛揮發(fā)油的鑒別 取供試品液A、陰性對照液、細(xì)辛揮發(fā)油對照液（1：10乙醚液）5ul，點(diǎn)于同一硅膠G板上，環(huán)己烷展開，晾干，噴10%香草醛濃硫酸T.S，加熱至顯色，供試品A與對照品在相應(yīng)位置上顯相同的粉紅色斑點(diǎn)，而陰性對

31、照液無此斑點(diǎn)。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,106,3. 麻黃堿的鑒別 取供試品液B，陰性對照液，麻黃堿對照品液（1mg/ml）各5ul，點(diǎn)于同一硅膠G，氯仿-甲醇-濃氨水 （20：5：0.5）展開，晾干，噴茚三酮T.S，加熱至斑點(diǎn)顯色，供試品B與對照品在相應(yīng)位置上顯相同的藍(lán)紫色斑點(diǎn)，而陰性對照液無此斑點(diǎn)。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,107,取合劑5ml，上聚酰胺柱，DW洗脫，洗脫液水浴濃縮至干，用1ml甲醇溶解，為供試品溶液C； 聚酰胺柱再用95%乙醇洗脫，棄取洗脫液，用3M氨乙醇液洗脫，收集洗脫液水浴蒸干， 1ml甲醇溶解，為供

32、試品溶液D。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,108,4. 芍藥甙的鑒別 取供試品液C、陰性對照液、芍藥甙對照液（1mg/ml）10ul，點(diǎn)于同一硅膠G板上，氯仿-乙酸乙酯-甲醇-冰醋酸-甲酸（8：1：2：0.04）展開，晾干，噴10%硫酸乙醇液，加熱至顯色，供試品C與對照品在相應(yīng)位置上顯相同的紫色斑點(diǎn)，而陰性對照液無此斑點(diǎn)。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,109,5. 甘草酸的鑒別 取供試品液D、陰性對照液、甘草酸銨對照液（2mg/ml）2ul，點(diǎn)于同一硅膠G板上，乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-蒸餾水（30：2：2：4）展開，晾干，噴10%硫酸

33、乙醇液，加熱至顯色，UV燈365nm觀察，供試品D與對照品在相應(yīng)位置上顯相同的紫色斑點(diǎn)，而陰性對照液無此斑點(diǎn)。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,110,含量測定,HPLC法測定芍藥甙的含量 儀器與色譜條件 BECKMAN 332型高效液相色譜儀 163型可變波長紫外檢測儀，220nm 427型記錄及數(shù)據(jù)處理儀 色譜柱為YWGC18 流動(dòng)相乙腈-水（15：85）,Friday, August 21, 2020,藥物分析,111,標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密稱取芍藥甙5.08mg，溶于水至50ml量瓶中，定容，分別吸取0.50、1.00、1.50、2.00ml于10ml量瓶中定容。

34、 回收率測定 精密吸取除去白芍制成的合劑（即陰性對照液）0.3ml與適量芍藥甙對照品液，通過0.5g聚酰胺柱，用水洗脫至50ml量瓶中至刻度，依前述條件測定，平均回收率為99.42%，RSD為0.23%（n=3）。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,112,樣品測定 取自制小青龍合劑搖勻，用濾紙過濾，精密吸取0.3ml濾液通過聚酰胺柱，以不同回收率測定條件進(jìn)行測定。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,113,Friday, August 21, 2020,藥物分析,114,分析實(shí)例萬氏牛黃清心丸,處方 牛黃10g 朱砂60g 黃連200g 黃芩1

35、20g 梔子120g 郁金80g,Friday, August 21, 2020,藥物分析,115,分析實(shí)例萬氏牛黃清心丸,制法以上六味，除牛黃外，朱砂水飛或粉碎成極細(xì)粉；其余黃連等四味粉碎成細(xì)粉；將牛黃研細(xì)，與上述粉末配研，過篩，混勻。每100g粉末加煉蜜100-200g制成大蜜丸，即得。,古方為糊丸，亦有水丸,Friday, August 21, 2020,藥物分析,116,性狀本品為紅棕色至棕褐色的大蜜丸；氣特異，味甜、微澀、苦。 功能主治清熱解毒，鎮(zhèn)驚安神。用于熱邪內(nèi)閉，煩躁不安，神昏譫語，小兒高熱驚厥。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,117,方藥分析 本方

36、來源于明.痘疹世醫(yī)心法 ，本方為清心開竅劑，主治熱邪內(nèi)陷心包所致竅閉神昏癥。 方中牛黃，清心解毒，豁痰開竅為君藥；黃連、黃芩、梔子清熱瀉火，為臣藥；朱砂清心，重鎮(zhèn)安神，郁金行氣開竅共為佐使藥，合用以奏透邪瀉熱，開竅安神之效。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,118,方藥分析 牛黃清熱解毒藥，主含膽酸類成分。 黃連清熱燥濕藥，主要為小檗堿。 黃芩清熱燥濕藥，主要為黃酮類。 梔子清熱瀉火藥，主含梔子甙。 朱砂安神藥，主含硫化汞（HgS）。 郁金活血去瘀藥，主含揮發(fā)油。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,119,鑒別,顯微鑒別 郁金糊化淀粉團(tuán)塊幾乎無

37、色。 梔子種皮石細(xì)胞。 黃芩纖維淡黃色，梭形，厚壁，孔溝細(xì)。 黃連纖維鮮黃色，壁稍厚，紋孔明顯。 朱砂不規(guī)則塊狀物或顆粒狀物，暗紅棕色、鮮紅色或棕黃色。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,120,郁金糊化淀粉團(tuán)塊 梔子種皮石細(xì)胞 黃芩纖維 黃連纖維 朱砂不規(guī)則塊狀物或顆粒狀物，暗紅棕色、鮮紅色或棕黃色,Friday, August 21, 2020,藥物分析,121,化學(xué)鑒別,1. 朱砂的鑒別 取本品3g，加水適量，研勻，反復(fù)洗去懸浮物，可得少量朱紅色沉淀，取出，加入鹽酸1ml及銅片少量，加熱煮沸，銅片由黃色變?yōu)殂y白色。 HgS+2HCl+CuCuCl2+Hg+H2S

38、NOTES：在酸性條件下，朱砂與銅片發(fā)生置換反應(yīng)析出金屬汞，在銅片表面形成銀白色汞齊。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,122,2. 人工牛黃的鑒別 取本品，剪碎，加硅藻土0.6g，研勻，加氯仿10ml、冰醋酸0.5ml，加熱回流30min,放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。 膽酸和豬去氧膽酸加乙醇制成1ml含1mg的混合溶液，作為對照品溶液。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,123,TLC法 CMC-Na，硅膠G 展開劑 醋酸乙酯-正己烷-醋酸-甲醇 （32:6:1:1） 顯色劑 10%磷鉬酸乙醇液，

39、1100C,10min,Friday, August 21, 2020,藥物分析,124,人工牛黃,供試品,牛黃空白,豬去氧膽酸,膽酸,Friday, August 21, 2020,藥物分析,125,3. 黃芩的鑒別 供試品溶液的制備：取本品3g，剪碎，加硅藻土0.5g，研勻，加甲醇20ml，加熱回流1hr,放冷，濾過，濾液作為供試品溶液。 對照品溶液的制備：黃芩甙對照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,126,TLC法 CMC-Na，硅膠G （4%醋酸鈉） 展開劑 醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水 （5:3:1:1） 顯色

40、劑 2%三氯化鐵乙醇液,使斑點(diǎn)更為集中,-OH與Fe+3絡(luò)合,Friday, August 21, 2020,藥物分析,127,黃芩甙,供試品,黃芩空白,Friday, August 21, 2020,藥物分析,128,4. 梔子的鑒別 供試品溶液的制備：取本品3g，加乙醚15ml，研磨，棄去乙醚。殘?jiān)鼡]干乙醚，加醋酸乙酯30ml，加熱回流1hr,放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。 對照品溶液的制備：梔子甙對照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。,Friday, August 21, 2020,藥物分析,129,TLC法 CMC-Na，硅膠G 展開劑 醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水 （10 : 7 : 2 : 0.5） 顯色劑 10%硫酸乙醇 1050C, 10min,Friday, August 21, 20