1、1,第四節(jié)滅菌制劑與無菌制劑,2,滅菌制劑與無菌制劑,滅菌與無菌制劑是指直接注入體內(nèi)或直接接觸創(chuàng)傷面、粘膜等的一類制劑。,3,滅菌與無菌技術(shù),目的：殺滅活除去所有微生物繁殖體和芽孢， 最大限度提高藥物制劑的安全性，保護(hù)制劑的穩(wěn)定性， 保證制劑的臨床療效。,滅菌法分為： 物理滅菌法重點(diǎn)介紹 化學(xué)滅菌法 無菌操作法,4,滅菌方法,火焰滅菌法,藥液滅菌法,物理滅菌法,化學(xué)滅菌法,濕熱滅菌法,濾過除菌法,紫外線滅菌法,微波滅菌法,輻射滅菌法,流通蒸氣滅菌法,煮沸滅菌法,低溫間歇滅菌法,射線滅菌法,滅菌方法,氣體滅菌法,干熱空氣滅菌法,干熱滅菌法,熱壓滅菌法,5,（一）物理滅菌技術(shù),利用蛋白質(zhì)與核酸具有

2、遇熱、射線不穩(wěn)定的特性，采用 加熱、射線和過濾方法，殺滅或除去微生物的技術(shù)稱為 物理滅菌法，亦稱物理滅菌技術(shù)。 該技術(shù)包括：干熱滅菌法、濕熱滅菌法、過濾滅菌法和 射線滅菌法。,6,在干燥環(huán)境下進(jìn)行滅菌的方法， （1）火焰滅菌法：系指用火焰直接灼燒滅菌的方法。 滅菌迅速、可靠、簡便，但只適用于耐火焰的物料， 適用于金屬、玻璃等，不適用于藥品。,1、干熱滅菌法,7,（2）干熱空氣滅菌法：系指用高溫干熱空氣滅菌的方 法。適用于耐高溫的的金屬、玻璃、粉末化學(xué)藥品以及 不允許濕氣穿透的油脂類（如油性軟膏基質(zhì)、注射用油 等），不適于橡膠、塑料及大部分藥品的滅菌。,在干燥狀態(tài)下，由于熱穿透力較差，微生物的耐

3、熱性 較強(qiáng)，必須長時(shí)間受高熱作用才能達(dá)到滅菌目的。 干熱空氣滅菌法采用的溫度一般比濕熱滅菌法高。 一般規(guī)定為：135145滅菌35h；160170 滅菌24h；180200 滅菌0.51h。,8,系指用飽和蒸汽。沸水或流通蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。 由于蒸汽潛熱大，穿透力強(qiáng)，容易使蛋白質(zhì)變性或凝固， 因此該法滅菌效果比干熱滅菌法高，是藥物制劑生產(chǎn)過程 常用的方法。,可分為： 熱壓滅菌法 流通蒸汽滅菌法 煮沸滅菌法 低溫間歇滅菌法,2、濕熱滅菌法,9,系指用高壓飽和水蒸氣加熱殺滅微生物的方法。 適用于耐高溫耐高壓的的所有藥物制劑、玻璃容器、 金屬容器、瓷瓶、橡膠塞、濾膜過濾器等。 熱壓滅菌所需溫度（蒸

4、汽表壓）與時(shí)間關(guān)系為：115 （67kPa）、30min；121 （97kPa）、20min； 126 （139kPa）、15min 特殊藥品和特殊情況下，可通過實(shí)驗(yàn)確認(rèn)合適的滅菌 溫度和時(shí)間。,（1）熱壓滅菌法,10,（2）流通蒸汽滅菌法：在常壓下，采用100 流通蒸汽 加熱殺滅微生物的方法。滅菌時(shí)間常為3060min。 適用于消毒及不耐高熱制劑的滅菌。不能保證殺滅所有 的芽孢，是非可靠滅菌法。,（3）煮沸滅菌法：將待滅菌物置沸水中加熱滅菌的方法。煮沸時(shí)間常為3060min。該法滅菌效果較差，常用于注射器、針頭等器皿的消毒。,11,（4）低溫間歇滅菌法：系指將待滅菌物置6080 的水或流通蒸

5、汽中加熱60min，殺滅微生物繁殖體后，在室溫條件下放置24h，讓待滅菌物的芽孢發(fā)育成繁殖體，再次加熱滅菌、放置，反復(fù)多次，直至殺滅所有芽孢。適用于不耐高溫。熱敏感物料和制劑的滅菌。 缺點(diǎn)是費(fèi)時(shí)、工效低、滅菌效果差。,12,3、過濾滅菌法：適合于對(duì)熱不穩(wěn)定的藥物溶液、 氣體、水等 物品的滅菌。為有效除盡微生物，濾器 孔徑必須小于芽孢體積（0.5m）。 常用除菌過濾器有：0.22m或0.3m的微孔濾膜濾 器和 G6垂熔玻璃濾器。 要在無菌條件下進(jìn)行操作。,13,4、射線滅菌法：系指采用輻射、微波和紫外線殺滅 微生物和 芽孢的方法。 （1）輻射滅菌法采用放射性同位素（60Co和137Cs） 放射的

6、射線殺滅微生物和芽孢的方法，適用于 熱敏物料和制劑的滅菌。 （2）微波滅菌法：采用微波（頻率為300MHz300kMHz） 照射產(chǎn)生的熱能殺滅微生物和芽孢的方法。 適合于液體和固體物料滅菌。,14,（3）紫外線滅菌法：波長一般為200300nm， 該法是利用產(chǎn)生的臭氧使細(xì)菌的蛋白質(zhì)變性而 達(dá)到殺菌的目的。 滅菌力最強(qiáng)的波長為254nm。屬于表面滅菌。 一般用于物體表面、無菌室空氣及蒸餾水滅菌。 普通玻璃吸收紫外線，裝于玻璃容器中的藥物 不能用紫外線滅菌。紫外線對(duì)人體有害，照射 時(shí)間過長易發(fā)生結(jié)膜炎、皮膚燒灼等傷害。 生產(chǎn)中一般在操作前開啟紫外燈12小時(shí)， 操作時(shí)關(guān)閉。,15,（二）化學(xué)滅菌法：

7、用化學(xué)藥品直接作用于 微生物而將其殺滅的方法。 1、氣體滅菌法：如環(huán)氧乙烷、甲醛、丙二醛、 過氧乙酸蒸汽等。 2、藥液滅菌法：常作為其他滅菌法的輔助措施， 適用于無菌器具、設(shè)備、皮膚等。如75乙醇、 0.1苯扎溴銨溶液等。,16,（三）無菌操作法：整個(gè)過程控制在無菌條件下進(jìn)行。 適合一些不耐熱藥物的注射劑、眼用制劑、皮試液、 創(chuàng)傷制劑的制備。 無菌操作室/滅菌/無菌操作,17,三 空氣凈化,（一）概述 空氣凈化是指以創(chuàng)造潔凈空氣為目的的空氣調(diào)節(jié)措施。 工業(yè)凈化是除去空氣中懸浮的塵埃粒子，創(chuàng)造潔凈的空氣環(huán)境，如電子工業(yè)等。 生物凈化不僅除去空氣中懸浮的塵埃粒子，而且要求除去微生物等以創(chuàng)造潔凈的空

8、氣環(huán)境，如制藥工業(yè)、生物實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)院手術(shù)室等。,18,（二）潔凈室空氣凈化標(biāo)準(zhǔn),凈化方法分為三大類： 一般凈化 以溫度、濕度為主要指標(biāo)的空氣調(diào)節(jié)。 中等凈化 除對(duì)溫度、濕度有要求外，對(duì)空氣中的含塵量和塵埃粒子也有一定指標(biāo)，如允許含塵量為0.15-0.25mg/m3，塵埃粒子粒徑不得1.0m 。 超凈凈化 除對(duì)溫度、濕度有要求外 ，對(duì)空氣中的含塵量和塵埃粒子有嚴(yán)格要求。,19,四 注射劑,20,注射劑的定義 注射劑的分類,注射劑（injection）是指指用藥物制成的供注人體內(nèi)的滅菌的溶液、乳濁液或混懸液，以及供臨用前配成液體的無菌粉末。,溶液型注射劑 乳劑型注射劑 混懸型注射劑 注射用無菌粉末

9、,21,二、注射劑的特點(diǎn),1、藥效迅速、作用可靠，其藥液直接注入組織或血管， 吸收過程很短或無吸收過程，血藥濃度可迅速達(dá)到高峰 發(fā)揮作用。 可用于搶救危急病人； 2、適用于不宜口服的藥物：被消化液破壞、首過 效應(yīng)明顯、口服吸收差、消化道刺激性強(qiáng) 3、適用于不宜口服的病人：不能吞咽、昏迷、嚴(yán) 重嘔吐,22,4、產(chǎn)生局部定位作用 5、使用不方便、注射疼痛 6、易交叉污染、安全性差，若劑量不當(dāng)或注射速度過快， 或藥品質(zhì)量存在問題，可能給患者帶來危害， 7、制備過程復(fù)雜、質(zhì)量要求高、成本高,23,三、質(zhì)量要求,1、無菌：不得含有活的微生物和芽孢 2、無熱原： 3、澄明度：不得有肉眼可見的渾濁或異物，

10、輸液（100ml）控制微粒數(shù)。 4、pH值：49,24,5、滲透壓：等滲，可稍高滲，不可低滲 6、安全性：無毒、無刺激性、無“三致”反應(yīng) 7、穩(wěn)定性：使用與儲(chǔ)存不變質(zhì) 8、其它：降壓物質(zhì)、含量、色澤、裝量等符合藥 典規(guī)定。,25,四、注射劑的給藥途徑,靜脈注射：靜推和靜滴，非水溶液、混懸液不能使用， 所用注射劑不得添加抑菌劑，PH49。 靜滴50 ml 以上。靜脈推注一次劑量20 ml以內(nèi)， 可產(chǎn)生溶血或使血漿蛋白沉淀的藥物不能靜脈給藥。 脊椎腔注射（全麻）注入脊椎四周蛛網(wǎng)膜下腔內(nèi)。由于 腦脊液量少，循環(huán)較慢，神經(jīng)敏感，注射劑的滲透壓和pH 應(yīng)與脊椎液相等，只能制成水溶液，劑量不超過10ml

11、肌肉注射：劑量15ml，刺激性太大的藥物不宜使用。,26,皮下注射（局麻）：注射于真皮和肌肉之間 ，藥物 吸收速度稍慢，水溶液為主，劑量12ml。 小兒靜脈過細(xì)不易靜脈注射時(shí)亦可經(jīng)皮下滴注 皮內(nèi)注射（皮試）：注射于表皮與真皮之間， 劑量0.2ml以下，常用于過敏性試驗(yàn)或疾病診斷。 其他途徑：穴位注射、腹腔注射、關(guān)節(jié)腔注射、動(dòng)脈 注射。,27,一、注射用原輔料二、注射用溶劑三、注射用附加劑,抗氧劑、抑菌劑、局部止痛劑、pH調(diào)節(jié)劑、等滲調(diào)節(jié)劑、其他附加劑,注射用水 注射用油 其他注射用溶劑,必須符合中國藥典2010年版或國家藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的各項(xiàng)要求,注射劑的溶劑與附加劑,28,注射用水,中國藥

12、典規(guī)定： （1）注射用水為純化水經(jīng)蒸餾所得的蒸餾水； （2）滅菌注射用水為經(jīng)滅菌后的注射用水； （3）純化水為原水經(jīng)蒸餾法、離子交換法、反滲透法或其他適宜的方法制得的供藥用的水。 純化水可作為配制普通藥劑或試驗(yàn)用水，不可配制注射劑；注射用水才可配制注射劑；滅菌注射用水用作粉針的溶劑。,29,注射用水,注射劑用水的質(zhì)量要求 藥典規(guī)定：除一般蒸餾水檢查項(xiàng)目，如酸堿 度、氯化物、硫酸鹽、鈣鹽、硝酸鹽、亞硝酸鹽、氨、 二氧化碳、易氧化物、不揮發(fā)物及重金屬等均應(yīng)符合 規(guī)定外，還必須熱原檢查合格 制備后12小時(shí)內(nèi)使用。,無菌 無熱原 澄明度 安全性,滲透壓 pH 穩(wěn)定性 降壓物質(zhì)（安全）,30,熱 原,定

13、義-能引起人體致熱反應(yīng)的物質(zhì)。 熱原是微生物代謝產(chǎn)生的內(nèi)毒素，由磷脂、脂多糖 和蛋白質(zhì)組成， 大多數(shù)細(xì)菌都能產(chǎn)生熱原 （革蘭陰性桿菌產(chǎn)生的熱原致熱能力最強(qiáng)）,31,2、熱原的性質(zhì) （1）耐熱性 （2）濾過性 （3）水溶性 （4）不揮發(fā)性 （5）強(qiáng)酸、堿、氧化劑、超聲波,32,3、熱原污染的途徑 （1）從溶劑中帶入 （2）容器、用具、管道、裝置 （3）制備過程中污染 （4）輸液器 （5）原輔料,33,4、除去熱原的方法,溶液中熱原的除去方法 （1）吸附法 常用活性炭或硅藻土?；钚蕴康囊话?用量為0.1%0.2%（gml）。 （2）離子交換法 制純水 （3）（重）蒸餾法 制注射用水（隔沫裝置） （

14、4）反滲透法 （5）凝膠濾過法 分子篩（二乙胺基乙基葡萄糖凝膠） 制備無熱原純水,34,器具中熱原的除去方法 （1）高溫法 能夠耐高溫處理的容器、用具，洗 凈后250加熱半小時(shí)以上 （2）酸堿法 采用重鉻酸鉀濃硫酸液浸泡容器， 或用2NaOH洗滌輸液瓶。,35,熱原檢查,1、家兔法：用于熱原檢查/家兔的熱原反應(yīng)與人基本類似/一定量供試品靜脈注入家兔，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)，觀察家兔體溫升高情況，判斷供試品是否符合規(guī)定 2、鱟（hou）試驗(yàn)法：用于細(xì)菌內(nèi)毒素檢查/利用鱟試劑來檢測和量化由革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)毒素，以判斷供試品內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定/原理是當(dāng)被檢測的樣品中含有內(nèi)毒素時(shí)，鱟試劑會(huì)變混濁；

15、內(nèi)毒素含量與混濁程度成正比關(guān)系。,36,注射用水制備方法工藝流程 原水處理 自來水處理成為純化水方法 1.離子交換法 2.電滲析法 3.反滲透法,原水,純化水,注射劑用水,滅菌注射用水,37,注射用油,一般為精制的植物油，常用的油有麻油、茶油、大豆油 （一 ）注射用油要求： 1、10時(shí)應(yīng)保持澄明，無異臭，無酸敗味； 2、重要指標(biāo)（三值）應(yīng)符合規(guī)定 碘值 酸值 皂化值 3、含水量及雜質(zhì)均0.2，并不得檢出礦物油,38,其它注射用溶劑,注射用溶媒除注射用水、注射用油外，常見的還有乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、油酸乙酯等。 （一）親水性溶劑 作用：增加藥物溶解度和穩(wěn)定性 乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇

16、、二甲基亞砜(DMSO)。 （二）油脂性溶劑 油酸乙酯、二甲基二乙酰胺（DMA）與注射用油合用，可降低溶液粘度，使油不易結(jié)凍。,39,注射劑的附加劑,為了提高注射劑的“三性”，可加入適宜附加劑，附加劑的選用應(yīng)根據(jù)主藥性質(zhì)和給藥途徑?jīng)Q定。常有以下幾種：,40,（一）助溶劑 使難溶性藥物生成可溶性復(fù)鹽、絡(luò)合物和分子締合物 常用KI、NaCl、有機(jī)酸及其鈉鹽、酰胺類 （二）增溶劑 1、吐溫80 作肌肉注射劑的增溶劑，常用量為0.5%1.0% 。 2、膽汁 是一種天然增溶劑、常用量為0.5%1.0%。 3、甘油 是酚性成分和鞣質(zhì)的良好溶媒，可用來防止這些成分產(chǎn)生沉淀，常用量為15%20%。,增加主藥溶

17、解度的附加劑,41,幫助主藥混懸或乳化的附加劑,1、靜脈注射劑用的乳化劑： 卵磷脂、豆磷脂、普流羅尼（Pluronic）F68 2、助懸劑： 吐溫-85，司盤-85，Pluronic F68，磷脂類等表面活性劑， 羧甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、明膠（無抗原性）等膠體溶液。,42,防止主藥氧化的附加劑,光線、溫度、溶液中存在微量金屬離子雜質(zhì)均能加速或催化藥物的氧化。,1、加抗氧劑 抗氧劑是一類極易氧化的強(qiáng)還原性物質(zhì)。當(dāng)它們與 易氧化藥物同時(shí)存在時(shí)，包裝容器內(nèi)的氧首先與還 原性物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，從而保護(hù)主藥不受氧化。選用 抗氧化劑主要根據(jù)主藥的化學(xué)結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)。,43,2、加入金屬絡(luò)合劑

18、氧化降解作用由于微量金屬離子的存在而催化加速。微 量金屬離子主要來源于原輔料、溶媒、容器，橡皮塞、 金屬設(shè)備等。 最常用的金屬絡(luò)合劑為依地酸二鈉或依地酸鈣鈉。 常用濃度為0.01%0.05%。,44,3、通惰性氣體 采用高純度的惰性氣體N2，CO2來取代藥液和容器中 的空氣 ,惰性氣體 N2 或CO2通入供配液的注射用水或已 配制好的藥液中使之飽和，從而驅(qū)除溶解的氧氣。并在 藥液灌入安瓿后立即通入惰性氣體，以置換液面上空間 的氧氣然后封口。,45,調(diào)節(jié)pH值的附加劑,調(diào)節(jié)（pH）以保證注射劑的穩(wěn)定性和減少刺激性 常用于調(diào)節(jié)pH的附加劑：酸和堿及其緩沖鹽 如鹽酸、枸櫞酸及其鹽、氫氧化鈉（鉀）、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉等。,46,抑制微生物增殖的附加劑,抑菌劑應(yīng)用范圍 采用低溫滅菌、濾過滅菌或無菌操作制備的注射液及多劑量包裝的注射液應(yīng)加入適量的抑菌劑 用于靜脈或脊髓等部位注射的注射液，一律不得加抑菌劑