1、寵物傳染病生物制品,第一節(jié) 犬瘟熱（cd）,一、病況與病原概述： （一）、病況： 1、概念：犬瘟熱是由犬瘟熱病毒引起的犬和肉食目中許多動物的一種熱性高度接觸性傳染病。 2、流行特點：主要感染犬和水貂，幼犬和幼貂感染死亡率高達30-80%。該病不同年齡、性別和品種的犬都可感染，但2月齡以內(nèi)的仔犬由于受母源抗體的保護，80%不受感染，3-12月齡的幼犬易感性最高，2歲以上的犬發(fā)病率逐漸降低。犬瘟熱病康復犬可獲終身免疫力。,3、主要癥狀： 呼吸道癥狀：表現(xiàn)為支氣管炎、卡他性肺炎、咳嗽、氣喘、呼吸困難。 神經(jīng)癥狀：表現(xiàn)為癲癇、轉(zhuǎn)圈、共濟失調(diào)、肌肉強直痙攣等。 消化道癥狀：嚴重病犬腹瀉水樣糞便，惡臭，混

2、有血液。 特征性癥狀：雙相熱型，少數(shù)病犬的鼻和足墊可發(fā)生角質(zhì)化過度。,犬瘟熱足掌角質(zhì)化,犬瘟熱全身抽搐,（二）、病原：cdv，只有一個血清型。 1、分類地位及形態(tài)結(jié)構(gòu)特征：該病毒屬于副粘病毒科副粘病毒亞科麻疹病毒屬。病毒核酸為單股rna，病毒粒子外觀呈球形，大小直徑150-200nm。核衣殼呈螺旋狀立體對稱。有囊膜，37時有的毒株可以凝集雞的紅細胞，只有一個血清型。 2、生長繁殖特征：適應雞成纖維細胞的犬瘟熱病毒在雞胚上傳100代后不致病可做疫苗。該病毒在犬、雪貂、犢牛腎、脾、肺、睪丸等細胞上都可生長，在乳地鼠和乳小鼠腦內(nèi)可傳代，也可用vero細胞（非洲綠猴腎細胞株）培養(yǎng)。,二、疫苗與免疫：

3、（一）疫苗：現(xiàn)用于犬的犬瘟熱疫苗有弱毒疫苗和滅活疫苗。包括犬瘟熱組織滅活疫苗、細胞培養(yǎng)滅活疫苗、雪貂組織活疫苗、雞胚活疫苗、雞胚細胞活疫苗和犬六聯(lián)疫苗、犬七聯(lián)疫苗。目前多使用六聯(lián)疫苗和七聯(lián)疫苗。,1、犬瘟熱雞胚細胞活疫苗：毒株為犬瘟熱病毒雞胚化弱毒株適應于雞胚成纖維細胞的傳代毒，用雞胚成纖維細胞增殖病毒，制成弱毒疫苗。用以免疫犬和水貂，安全有效。歐美國家廣泛用于水貂犬瘟熱的預防。我國用于配制犬的六聯(lián)疫苗或七聯(lián)疫苗，廣泛用于預防犬的犬瘟熱。,制苗過程如下： （1）毒種：低溫保存的毒種使用前經(jīng)雞胚成纖維細胞培養(yǎng)傳23代。腦內(nèi)接種12日齡小白鼠，最小發(fā)病量不低于10-3/0.03ml。1520g小鼠

4、腦內(nèi)接種0.03 ml或皮下注射0.5 ml，觀察10d無異常反應為合格。 （2）制苗：取911日齡spf雞胚制備雞成纖維細胞，待細胞長成單層后按2.5%3%比例將種毒接入維持液，37恒溫培養(yǎng)。接毒后35d出現(xiàn)細胞腫大、聚集如星芒狀、拉網(wǎng)變圓，脫落，當cpe達85%以上時，收獲培養(yǎng)物，反復凍融3次，加入抗生素即成弱毒疫苗原液。加5%蔗糖脫脂乳凍干成凍干疫苗。,（3）疫苗檢驗：疫苗病毒毒價應達10-3.5/ml以上，安全檢驗時用1618g小鼠4只，每只腹腔接種0.2ml；另用250300g豚鼠2只腹腔接種0.5ml，觀察10d應健活。 （4）保存與使用：凍干疫苗27保存，有效期2年。使用時，每只

5、犬皮下或肌肉注射1ml，間隔23周加強免疫一次，保護期1年。,2、組織滅活疫苗： （1）制苗：犬瘟熱病毒感染雪貂或犬發(fā)病，無菌采集病死犬肝、脾、淋巴結(jié)制成20%組織乳懸液，凍融三次，三層紗布過濾，加入終濃度0.1%甲醛，37滅活24h。 （2）疫苗檢驗：無菌檢驗按常規(guī)進行，安全檢驗用健康小犬2只，皮下或肌肉注射10ml，觀察7d，無不良反應，判為合格。 （3）使用方法：每只犬皮下接種5ml，間隔2-3周加強免疫一次，免疫保護期3-6個月。,（二）免疫程序： 1、犬瘟熱雞胚弱毒凍干苗： 首免：9周齡剛斷奶犬注射一針。 二免：15周齡加強免疫一次。 免疫期一年，以后每年加強免疫一次。,2、犬六聯(lián)或

6、七聯(lián)苗： 首免：斷奶（45-60日齡）幼犬注射1頭份。 二免：首免后15天再注射1頭份。 三免：二免后15天再注射1頭份。 免疫期一年，以后每年免疫一次兩針（首免1頭份，15天后二免1頭份）。,第二節(jié) 犬細小病毒?。╟pd）,一、病況與病原概述： 1、病況： 概念：該病又稱犬傳染性腸炎（拉稀呈番茄醬樣發(fā)出特殊腥臭味）。是由犬細小病毒（cpv）引起的一種急性接觸性致死性傳染病。 流行特點：多發(fā)生于幼犬，病死率1050%。小于4周齡的仔犬和大于5歲的老犬發(fā)病率低，一般分別為2%和16%。,特征性病變： 表現(xiàn)為出血性腸炎和心肌炎。34周齡犬感染后以心肌炎為主，810周齡犬感染后以腸炎為主，先嘔吐，后

7、腹瀉，拉出灰黃色或番茄醬樣稀糞發(fā)出難聞的特殊腥臭味。,2、病原：cpv。 該病毒屬于細小病毒科細小病毒屬。病毒核酸為單股dna，病毒粒子大小直徑20-22nm，病毒粒子外觀呈足球形，蛋白質(zhì)衣殼為20面體立體對稱 ，無囊膜。該病毒在4和25能凝集豬和恒河猴的紅細胞，但不能凝集其它動物的紅細胞?？稍谌I、貓腎細胞上增殖并產(chǎn)生cpe。,二、疫苗和免疫： （一）疫苗：目前用于預防犬細小病毒病的疫苗主要有cpv滅活疫苗、cpv弱毒疫苗(犬細小病毒-犬鉤端螺旋體二聯(lián)疫苗、犬瘟熱-cpv-犬傳染性肝炎-副流感-犬鉤端螺旋體五聯(lián)疫苗、狂犬病-犬瘟熱-cpv-犬肝炎-副流感-犬鉤端螺旋體六聯(lián)疫苗)。,1、cpv

8、細胞培養(yǎng)滅活疫苗： (1)種毒：cpv-gn毒株。 (2)制苗：用cpv-gn種毒接種crfk（貓腎細胞株）細胞，37培養(yǎng)24h形成單層后換入維持液，37繼續(xù)培養(yǎng)7296h，待cpe達80%以上時(ha1:1024)，收獲病毒，凍融3次，3000r/min離心15min，取上清，除去細胞碎片,上清加入終濃度0.25%甲醛，37持續(xù)攪拌24h，ha1:512，再加入7%8%氫氧化鋁膠混勻即成cpv滅活疫苗。,（3）疫苗檢驗： 安全檢驗：選取5只斷奶幼犬，3只皮下或肌肉接種疫苗35ml，另2只作對照，觀察710d均應健活，糞便檢查ha為陰性。 效價檢驗：ha1:512。,（4）保存與使用： 于4保

9、存，有效期1年。斷奶幼犬肌肉注射1ml，間隔23周再接種1ml，懷孕犬產(chǎn)前20d肌肉注射疫苗1ml，免疫保護期1年。,2、異源滅活疫苗： (1)種毒：貓泛白細胞減少癥病毒fnf8毒株，由病死貓分離并鑒定，tcid5010-5.5/ml。 (2)制苗：種毒稀釋后接種crfk （貓腎細胞株）單層細胞。37培養(yǎng)7296h，當細胞出現(xiàn)80%以上cpe時收獲病毒。凍融3次，3000r/min離心20min，取上清，除去細胞碎片。用bei（二乙烯亞胺）滅活病毒。加5%氫氧化鋁膠混合，制成cpv異源滅活疫苗。,（3）疫苗檢驗：一次免疫后1015dhi抗體效價在1:40以上，2次免疫后效價可達1:80以上，并

10、能經(jīng)受強毒口服的攻擊。 （4）保存與使用：于4保存，有效期1年。6周齡和14周齡犬分別免疫接種一次，每次皮下注射23ml，間隔34周。妊娠犬產(chǎn)前20d注射一次，可獲得良好的免疫效果。,3、cpv細胞培養(yǎng)活疫苗： (1)種毒：cpv-780916弱毒株，為cpv強毒株在犬腎原代細胞上傳代80115代，經(jīng)篩選獲得的適應弱毒。 (2)制苗：疫苗用犬腎原代細胞或mdck細胞（犬腎細胞株）生產(chǎn)病毒，加保護劑凍干而成。疫苗安全有效，免疫接種后4d即可產(chǎn)生高滴度的hi抗體。 (3)保存與使用：疫苗于15保存，保存期1年，皮下注射1ml，免疫2次，間隔時間23周，妊娠犬產(chǎn)前20d免疫一次，免疫期1年。,（二）

11、免疫程序： 首免：7-8周齡（斷奶60日齡）免疫接種一次弱毒苗； 二免：間隔2周加強免疫接種一次滅活苗。 以后每年加強免疫接種一次。,第三節(jié) 犬傳染性肝炎（ich）,一、病況與病原概述： 1、病況： 概念：ich是由ichv（犬型腺病毒）引起的一種急性、高度接觸性、敗血性的傳染病。 流行特點：主要感染犬和狐貍，可發(fā)生于任何季節(jié)，無年齡和品種差異。該病常見于1歲以內(nèi)的幼犬，剛斷奶的小犬最易發(fā)病，幼犬病死率高達2540%。幼犬患病時，常于12天內(nèi)突然死亡，如耐過48小時，多能康復。成年犬多能耐過，產(chǎn)生堅強的免疫力。,、臨床癥狀和病理變化特征： 表現(xiàn)為高熱稽留、貧血、血液不易凝結(jié)而出血不止，肝小葉中

12、心壞死，肝實質(zhì)和內(nèi)皮細胞出現(xiàn)核內(nèi)包涵體，康復犬的一眼或兩眼呈暫時性角膜色素炎癥稱肝炎性藍眼病?？祻腿L期帶毒，并獲得免疫力。,2、病原：ichv。 分類地位及形態(tài)結(jié)構(gòu)特征：該病毒屬于腺病毒科哺乳動物腺病毒屬犬腺病毒型病毒（cav-i），核酸為雙股dna，球形，正20面體對稱，大小直徑80100nm，無囊膜，衣殼頂角上有1根纖絲向外突出，長約2050nm。該病毒與引起犬傳染性支氣管炎（犬窩咳）的犬腺病毒型（cav-）具有共同的抗原決定簇，但在毒力、抗原結(jié)構(gòu)和致病性等方面都不同，兩者具有70%的相同基因，所以在免疫上能交叉保護。,、生長繁殖特征：該病毒能在犬、猴、豬、豚鼠和水貂等腎、肺原代細胞中增

13、殖，易形成蝕斑和核內(nèi)包涵體。通過細胞傳代可導致毒力減弱。 、凝集特征：能凝集人o型、雞、豚鼠紅細胞，但不能凝集犬紅細胞。,二、疫苗和免疫： （一）疫苗：用于預防犬傳染性肝炎的疫苗有滅活疫苗和弱毒疫苗。 1、組織滅活疫苗： (1)種毒：為cav-i標準毒株，也可選擇經(jīng)分離鑒定的犬傳染性肝炎病毒強毒株。種毒稀釋后，靜脈接種易感犬，發(fā)病后出現(xiàn)典型臨床癥狀時，捕殺，無菌采取肝、脾組織，用高速組織搗碎機搗碎，用pbs制成20%懸液，加入0.1%0.2%甲醛，37滅活24h，制成組織滅活疫苗。,(2)疫苗檢驗：按常規(guī)進行。 安全檢驗：選擇15g左右健康小鼠10只，5只腦內(nèi)接種0.03ml，5只腹腔接種0.

14、5ml，觀察7d應無異常反應；也可選擇敏感犬5只，3只皮下接種5.0ml，2只作對照，觀察21d無異常反應。 效力檢驗：取免疫犬3只和對照犬2只，用強毒攻擊，觀察14d，免疫犬應健活，對照犬出現(xiàn)嚴重癥狀至少1只死亡。,（3）保存與使用： 于4保存，有效期1年。體重3kg以下犬皮下接種3ml，3kg以上犬皮下接種5ml，免疫保護期6個月。,2、細胞培養(yǎng)滅活疫苗：制苗過程： (1)種毒：用cav-i強毒株。 (2)制苗：毒種稀釋后接種mdck（犬腎傳代細胞株）單層細胞，37吸附30min，加入eme維持液，繼續(xù)培養(yǎng)4872h，出現(xiàn)80%以上cpe時收獲病毒，tcid5010-6.0/ml。凍融3次

15、，3000r/min離心20min取上清，加入0.2%0.3%甲醛37滅活24h。滅活后進行無菌檢驗，合格后加入5%7%的氫氧化鋁膠，即成犬傳染性肝炎細胞培養(yǎng)滅活疫苗。,（3）疫苗檢驗： 常規(guī)檢驗：進行無菌檢驗，應無菌生長。 安全檢驗：選12月齡未經(jīng)免疫健康犬3只，其cav-i抗體效價小于1:4，每只皮下注射疫苗2ml，在1周內(nèi)應無體溫升高、白細胞減少及注射部位紅腫等不良反應。,（4）保存與使用： 在48保存期1年。妊娠犬產(chǎn)前20d免疫，仔犬在7周齡和9周齡各免疫1次，皮下或肌肉注射1ml/只。,3、犬傳染性肝炎活疫苗： 種毒選用已適應犬腎原代細胞的cav-i弱毒株。將種毒稀釋后接種mdck（

16、犬腎傳代細胞株）細胞，37吸附30min，加入mem維持液，培養(yǎng)至cpe達85%以上時收獲病毒，凍融3次后，離心除去細胞碎片，加入5%蔗糖脫脂乳保護劑，凍干制成凍干疫苗。效力檢驗，可取疫苗稀釋后做tcid50測定，tcid5010-4.0/ml。,（二）免疫程序：用弱毒苗。 首免：9周齡斷奶犬接種一次。 二免：15周齡加強免疫一次。 以后每半年加強免疫一次。 犬型腺病毒弱毒苗接種后會出現(xiàn)111天輕度角膜混濁水腫反應。也可用犬型腺病毒弱毒苗接種，既可預防該病，又不會發(fā)生角膜水腫。犬傳肝的免疫預防在獸醫(yī)實踐中是見效的，原因是疫苗弱毒被接種犬排放到環(huán)境，其它犬與之接觸而獲得免疫，造成了高水平的群體免

17、疫。,第四節(jié) 貓泛白細胞減少癥（fp）,第四節(jié) 貓泛白細胞減少癥（fp）,一、病況與病原概述： 1、病況： 概念：貓泛白細胞減少癥也叫貓瘟熱、貓傳染性腸炎、貓細小病毒感染,此病是由貓泛白細胞減少癥病毒(feline panleukopenia virus,fpv)引起的貓?zhí)貏e是幼齡貓的一種發(fā)熱性、高度接觸性、致死性傳染病。該病以體溫升高、嘔吐、腹瀉和白細胞減少為主要特征,傳染性極強。,流行特點 家貓對fpv易感，斷奶不久的幼貓最敏感。除此之外，大多數(shù)貓科動物(如山貓、豹貓、野貓、豹、虎、獅)和部分鼬科動物(水貂、臭鼬)也非常易感，浣熊科動物中的長吻浣熊、密熊及小熊貓也可被感染。貓一旦被感染便可

18、迅速流行，多數(shù)呈急性經(jīng)過，死亡率極高,往往形成地方性流行。經(jīng)過長途運輸、飼養(yǎng)條件劇變以及來源不同和不明的貓混合飼養(yǎng),也會引起該病的急性暴發(fā)，死亡率可達90%以上。在母貓繁育季節(jié)(冬末至春季)多發(fā)，特別是12月至來年的3月發(fā)病率可占全年的55.8%。1歲以內(nèi)的幼貓發(fā)病率很高，可達38.5%，隨著年齡的增長發(fā)病率會有所降低。同時，全窩幼貓發(fā)病的情況非常普遍。,臨床癥狀 潛伏期為 29 d，平均為 4 d。發(fā)病早期主要表現(xiàn)為精神倦怠，食欲減退。體溫升高到 40左右，持續(xù)24 h，然后恢復到正常，過 23 d 又再次升高，呈現(xiàn)明顯的雙相熱。隨著病程的延長，病貓精神極度沉郁，食欲廢絕，頻繁嘔吐，每天嘔吐幾次到幾十