1、,蛙離體神經(jīng)干生物電信號(hào)與興奮性檢測(cè),A,A,“全”或“無”,單個(gè)細(xì)胞,神經(jīng)干/復(fù)合神經(jīng)纖維,非“全”或“無”,細(xì)胞內(nèi)外,細(xì)胞外,單向,雙向,刺激偽跡(Stimulus artifact),刺激偽跡是刺激電流通過導(dǎo)電介質(zhì)擴(kuò)散至兩引導(dǎo)電極而形成的電位差信號(hào)。,儀器連接,RM6240C微機(jī)生物信號(hào)處理系統(tǒng),神經(jīng)干標(biāo)本盒。,S+ S- E R1 - R1+ R2- R2+,神經(jīng)干標(biāo)本盒兩對(duì)引導(dǎo)電極分別接微機(jī)生物信號(hào)處理系統(tǒng)1、2通道,1.引導(dǎo)雙相動(dòng)作電位：儀器的連接：,1,2,粗,細(xì),實(shí)驗(yàn)觀察項(xiàng)目：,r1,r2,r3,r4,1,2,黑,紅,紅,紅,綠,綠,黑,黑,“實(shí)驗(yàn)”菜單中選擇自定義實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目“神

2、經(jīng)干動(dòng)作電位”進(jìn)入實(shí)驗(yàn)狀態(tài)。儀器參數(shù)：1、2通道時(shí)間常數(shù)0.020.002s、濾波頻率1KHz、靈敏度5mV，采樣頻率：40KHz，掃描速度：0.5ms/div。單刺激激方式，刺激幅度0.13V，刺激波寬0.1ms，延遲5ms，同步觸發(fā)。,1.5儀器連接和參數(shù),采樣頻率,通道模式,掃描速度,靈敏度,濾波頻率,時(shí)間常數(shù),(1)為什么能引導(dǎo)出雙相動(dòng)作電位，其原理是什么？,-,+,-+-,+-+,A = B,A B,A = B,+-+,-+-,-+-,+-+,A B,胞外,外,內(nèi),外,內(nèi),內(nèi),外,內(nèi),外,（2）為什么AP1較AP2出現(xiàn)早且波形幅度大呢？,粗,細(xì),r1,r2,r4,r3,閾強(qiáng)度：對(duì)神經(jīng)

3、干而言，閾強(qiáng)度是指神經(jīng)干剛好能產(chǎn)生動(dòng)作電位的刺激強(qiáng)度。最大刺激強(qiáng)度：能產(chǎn)生最大動(dòng)作電位的最小刺激強(qiáng)度。,“全”或“無”？,2. 閾強(qiáng)度、最大刺激強(qiáng)度,0V,0.25V,0.3V,0.4V,0.5V,0.6V,0.7V,0.8V,0.9V,為什么在一定范圍的閾上刺激內(nèi)，刺激強(qiáng)度越大，神經(jīng)干所形成的動(dòng)作電位越大？,1.復(fù)合AP 2.興奮性不同 3.最大刺激強(qiáng)度,復(fù)合動(dòng)作電位,（2）AP1與AP2的波峰的時(shí)差r1點(diǎn)與r3點(diǎn)間的距離,3.測(cè)定傳導(dǎo)速度(自動(dòng)/手動(dòng)),（1）V=S/t（m/s）,S1,S2,r1,r4,r3,r2,S(cm),4.檢測(cè)興奮性周期變化,絕對(duì)不應(yīng)期 相對(duì)不應(yīng)期 閾上 超常期

4、閾下 低常期 閾上,興奮性,0,閾值,最大刺激強(qiáng)度,雙刺激,調(diào)節(jié)間隔時(shí)間,保持刺激強(qiáng)度和波寬不變,隨著波間隔的縮小，越來越多神經(jīng)纖維在接受第二個(gè)刺激時(shí)已處于第一個(gè)刺激誘發(fā)的動(dòng)作電位的不應(yīng)期，所產(chǎn)生的復(fù)合動(dòng)作電位波幅逐漸減小直至消失。,S1,S2,r1,r4,r3,r2,5. 單相動(dòng)作電位,（1）徹底夾傷r1與r2之間神經(jīng)干 （2）產(chǎn)生單相AP原因： 興奮不能傳導(dǎo)至B點(diǎn),Am,Dm,條件：刺激電壓1V, 刺激波寬0.1ms,r1,r2,r4,r3,制備蛙離體坐骨神經(jīng)干標(biāo)本,1.破壞腦脊髓 2.剪除軀干上部及內(nèi)臟: 骶髂關(guān)節(jié)水平以上1cm處剪斷脊柱 3.剝皮,并洗凈手和用過的器械 4.游離坐骨神經(jīng),枕骨大孔,注意事項(xiàng),標(biāo)本盡量長(zhǎng) 不損傷神經(jīng)干 保持標(biāo)本濕潤(rùn),1.引導(dǎo)雙相動(dòng)作