1、學(xué)校代碼 10126 學(xué)號 分 類 號 密級 本科畢業(yè)實習(xí)報告瑞舒伐他汀鈣UV溶出度檢查方法學(xué)研究學(xué)院、系 化學(xué)化工學(xué)院、化學(xué)系專業(yè)名稱 應(yīng)用化學(xué)專業(yè) 年 級 2008級 學(xué)生姓名 倪移 指導(dǎo)教師 胡瑞生 教授 實習(xí)單位 北京天衡藥物研究院 2012 年 5月 28日瑞舒伐他汀鈣UV溶出度檢查方法學(xué)研究摘 要：瑞舒伐他汀鈣是一種新型全合成單一對映異構(gòu)體他汀類藥物，化學(xué)品溶出度是指在規(guī)定的溶劑和條件下，藥物從片劑、膠囊劑、顆粒劑等固體制劑中溶出的速度和程度。本報告以(+) (3R, 5S)-雙7-4-(4-氟苯基)-6-異苯基-2-(N-甲基-N-甲磺?；被? 嘧啶-5-基-3, 5-二羥基-

2、6-(E)-庚烯酸鈣為原料藥，對其進(jìn)行UV溶出度檢查方法學(xué)研究試驗。通過本試驗，確定了瑞舒伐他汀鈣的溶出試驗條件和紫外檢測條件，符合瑞舒伐他汀鈣國家藥監(jiān)局藥品注冊標(biāo)準(zhǔn)。關(guān)鍵詞：瑞舒伐他汀鈣 溶出度 方法學(xué) UVMethodology Study on Dissolution Test and UV Detection of Rosuvastatin CalciumStudent: Ni YiTutor: Hu RuishengAbstract: Rosuvastatin Calcium is a novel drug of HMG-CoA reductase inhibitors, and D

3、issolution rate is the rate and extent of drugs dissolve from solid formulations of tablets, capsules, granules etc. in specified conditions. In this report, (+)-(3R,5S)bis(E)-7-4-(4-fluorophenyl)-6-isopropyl-2-methyl(methylsulfonyl)aminopyrimidin-5-yl(3,5-dihydroxyhept-6-enoicacid)calcium, as the r

4、aw material, was researched. Through this experiment, the condition of dissolution test and UV detection of Rosuvastatin Calcium were identified, which conform the SFDA drug registration standards.Key Words: Rosuvastatin Calcium, Dissolution rate, Methodology, UV目錄第一章 緒論11.1瑞舒伐他汀鈣藥物簡介11.1.1他汀類藥物簡介11

5、.1.2瑞舒伐他汀鈣簡介11.1.3瑞舒伐他汀鈣藥理作用21.2 化學(xué)藥品UV溶出度檢查試驗21.2.1紫外-可見分光光度計法(UV)21.2.2化學(xué)藥品溶出度方法研究4第二章 瑞舒伐他汀鈣UV溶出度檢查試驗62.1試驗樣品、試劑和儀器62.1.1主要試驗樣品62.1.2主要試驗試劑62.1.3主要試驗儀器62.2 UV溶出度檢查研究試驗72.2.1樣品檢測波長的確定72.2.2空白輔料對原料藥吸收波長的影響82.2.3工作曲線的繪制82.2.4儀器精密度的確定92.2.5回收率試驗92.2.6原料穩(wěn)定性試驗112.2.5兩批樣品（素片和包衣片）溶出度檢查122.3溶出度檢查方法比較試驗（包衣

6、片）152.3.1方法及轉(zhuǎn)速比較152.3.2溶出介質(zhì)比較16第三章 結(jié)論18致謝19參考文獻(xiàn)20第一章 緒論1.1 瑞舒伐他汀鈣藥物簡介1.1.1 他汀類藥物簡介他汀類藥物是20世紀(jì)80年代后期開發(fā)的羥甲戊二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑。該類藥物的問世是降脂藥治療史上的重大進(jìn)展，其除具有調(diào)脂作用強(qiáng)、耐受性好等優(yōu)點外，在冠心病的一級和二級預(yù)防中也發(fā)揮著重要作用，即可降低心血管事件發(fā)生率和心血管疾病死亡率。目前，已經(jīng)上市的他汀類藥物包括：洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、阿托伐他汀、瑞舒伐他汀鈣等。其中瑞舒伐他汀鈣的療效和安全性最好，匹伐他汀是潛在的“超級他汀”。1 1.1.2 瑞舒伐他汀

7、鈣簡介瑞舒伐他汀鈣(Rosuvastatin Calcium) 化學(xué)名：(+) (3R, 5S)-雙7-4-(4-氟苯基)-6-異苯基-2-(N-甲基-N-甲磺?；被? 嘧啶-5-基-3, 5-二羥基-6-(E)-庚烯酸鈣，分子式：(C22H27FN3O6S)2Ca，分子量：1001.15。是日本鹽野義制藥公司研發(fā)的一種新型全合成單一對映異構(gòu)體他汀類藥物。其結(jié)構(gòu)式如圖1.1。瑞舒伐他汀鈣片于2002年11月在荷蘭批準(zhǔn)上市，2003年在美國正式獲準(zhǔn)上市，其商品名為Crestor。瑞舒伐他汀鈣適用于經(jīng)飲食控制和其它非藥物治療（如：運動治療、減輕體重）仍不能適當(dāng)控制血脂異常的原發(fā)性高膽固醇血癥（I

8、Ia型，包括雜合子家族性高膽固醇血癥）或混合型血脂異常癥（IIb型）。本品對光靈敏，需遮光，密封，在陰涼（不超過20干燥處保存。2 瑞舒伐他汀鈣具有強(qiáng)力的HMG-CoA還原酶抑制活性，并具有肝細(xì)胞作用選擇性，且其藥動力學(xué)性質(zhì)優(yōu)異，半衰期長，安全性好，符合理想的他汀類藥物的必備條件。經(jīng)過大量臨床試驗確認(rèn)，其降低LDL-C，升高HDL-C的作用優(yōu)良。瑞舒伐他汀鈣臨床耐受性好，無肝毒性和肌毒性。只需1日1次用藥，早、晚服用均可，患者順應(yīng)性好。3-5圖1.1 瑞舒伐他汀鈣結(jié)構(gòu)式1.1.3 瑞舒伐他汀鈣藥理作用瑞舒伐他汀鈣與HMG-CoA還原酶有相似結(jié)構(gòu)，能競爭性抑制HMG-CoA還原酶（該酶是膽固醇生

9、物合成中的限制酶），導(dǎo)致干細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量降低，因而刺激肝細(xì)胞表面LDL受體表達(dá)增加，促進(jìn)LDL和LDL前體從循環(huán)中清除。瑞舒伐他汀鈣還可以抑制肝臟合成載脂蛋白-100和減少富含甘油三酯脂蛋白的合成與分泌。6 瑞舒伐他汀鈣有典型的他汀鈣藥效集團(tuán)，通過獨有的甲基磺胺基(methyl sulfonamide) 與HMG-CoA還原酶結(jié)合，甲基磺胺基使瑞舒伐他汀相對親水。不同于其他他汀類藥物相對親脂，制劑在脂質(zhì)中溶解增加，不加鑒別地進(jìn)入所有細(xì)胞，瑞舒伐他汀鈣對肝細(xì)胞有高度選擇性，通過特異轉(zhuǎn)運蛋白進(jìn)入肝細(xì)胞，明顯抑制肝細(xì)胞膽固醇合成，但不抑制肝以外細(xì)胞的膽固醇合成。71.2 化學(xué)藥品UV溶出度檢查試驗

10、1.2.1 紫外-可見分光光度計法(UV)紫外-可見分光光度計法指通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)的吸光度，進(jìn)行定量或定性分析的方法。200400nm為紫外光區(qū)，400760nm為可見光區(qū)。一、原理單色（單波長）光穿過被測物質(zhì)溶液時，在一定濃度范圍內(nèi)，吸光度與溶液的濃度和吸收池厚度成正比。即 A=Ecl （比爾定律）其中A為吸光度；c為濃度(g/100ml)；E為吸收系數(shù)，指當(dāng)溶液濃度為1%(g/ml)、液層厚度為1cm時的吸光度；l為吸收池厚度，cm。通常使用1cm吸收池（當(dāng)濃度太小時可使用2或5cm吸收池），用對照品比較法測定。E、l為常數(shù)，則A1/A2=c1/c2，c1=A1

11、c2/A2二、溶劑的選擇在樣品能溶解的前提下，選無毒且便宜的溶劑。首選水；其次常用0.1MHCl、Ph6.8磷酸鹽緩沖液；水溶液不溶時選用有機(jī)溶劑如甲醇、乙醇等。三、波長的選擇方法：原料按1030ug/ml配制溶液，測定吸光度，根據(jù)A值找出恰當(dāng)濃度后，在200400nm范圍內(nèi)掃圖，并用與之匹配濃度的輔料掃圖。判斷標(biāo)準(zhǔn)：在檢測波長處，原料有最大吸收值，且空白輔料無明顯吸收。四、工作曲線原理：在一定范圍內(nèi)，吸收值A(chǔ)與濃度c呈線性關(guān)系。方法：取原料藥適量，精密稱定，配制濃溶液，移取不同體積稀釋成6個濃度（檢測濃度為中心），測定吸收值，計算r。判斷標(biāo)準(zhǔn)：r0.998（通常要求0.999）五、精密度取工

12、作曲線項下濃溶液稀釋成6份相同濃度的稀溶液，測定吸收值，A值的RSD2.0%。六、回收率目的：驗證輔料對原料溶解是否有干擾。原理：回收率(%)=主藥測得量/稱樣量*100%方法：取原料藥適量，精密稱定，加入處方量空白輔料，配制成相當(dāng)于檢測濃度80%、100%、120%的溶液（平行配制3份）測定吸收值。判斷標(biāo)準(zhǔn)：回收率應(yīng)為98.0%102.0%，RSD2.0%。七、穩(wěn)定性取精密度項下溶液，于0、2、4、8小時分別測定吸收值，要求RSD75%。122.3 溶出度檢查方法比較試驗（包衣片）試驗方案如表2.6，試驗結(jié)果如表2.7和圖2.5。表2.6 溶出度檢查方法比較試驗方案方法介質(zhì)轉(zhuǎn)速rpm取樣時間

13、h檢測波長nm方法比較一法（籃法）pH6.6枸櫞酸緩沖溶液5030min取樣10ml，補(bǔ)液242nm二法（槳法）轉(zhuǎn)速比較二法（槳法）pH6.6枸櫞酸緩沖溶液100同上75介質(zhì)比較二法（槳法）0.1mol/L鹽酸溶液50分別5、10、15、30、45、60min取樣10ml，補(bǔ)液pH6.6枸櫞酸緩沖溶液pH4.0緩沖液水2.3.1 方法及轉(zhuǎn)速比較表2.7.1 方法及轉(zhuǎn)速比較試驗對照品相對A值稱樣量/mgAA相對均值對照20.790.3920.4360.43820.280.3860.44表2.7.2 方法及轉(zhuǎn)速比較試驗結(jié)果方法及轉(zhuǎn)速比較一法-50rpm二法-50rpm二法-75rpm二法-75rp

14、m30min30min30min30minA0.4380.4380.4380.4410.4380.4430.4380.4380.4390.4360.4390.4380.4380.4410.4380.4420.4410.4410.4360.4380.4400.4380.4350.437溶出度%100.0100.0100.0100.7100.0101.1100.0100.0100.299.5100.2100.0100.0100.7100.0100.9100.7100.799.5100.0100.5100.099.399.8平均值%100.2100.399.8100.2 表2.7數(shù)據(jù)顯示，一法、二法

15、及相應(yīng)的轉(zhuǎn)速對瑞舒伐他汀鈣的溶出試驗無明顯影響。因此，本品的溶出試驗選用一法（槳法），轉(zhuǎn)速為50rpm。2.3.2溶出介質(zhì)比較圖2.5.1 溶出曲線pH6.6緩沖液 圖2.5.2溶出曲線pH4.0緩沖液圖2.5.3溶出曲線0.1M HCl 圖2.5.4溶出曲線水 比較以上表1、2、3、4可知，瑞舒伐他汀鈣片在四種介質(zhì)中均能正常有效的溶出。將上述結(jié)果分別與臨床試驗比較，確定溶出曲線與血藥濃度試驗的相關(guān)性，從而選擇最為合適的溶出介質(zhì)。第三章 結(jié)論瑞舒伐他汀鈣適用于經(jīng)飲食控制和其它非藥物治療仍不能適當(dāng)控制血脂異常的原發(fā)性高膽固醇血癥）或混合型血脂異常癥。它具有強(qiáng)力的HMG-CoA還原酶抑制活性，并具

16、有肝細(xì)胞作用選擇性，且其藥動力學(xué)性質(zhì)優(yōu)異，半衰期長，安全性好，是理想的他汀類藥物。通過以上試驗可以得出，瑞舒伐他汀鈣的溶出度檢查試驗條件為：以50ml pH6.6枸櫞酸緩沖液為介質(zhì)，利用二法（槳法），轉(zhuǎn)速50rpm。瑞舒伐他汀鈣的UV檢測條件為：以242nm為檢測波長。并通過工作曲線、回收率試驗可知，紫外檢測所產(chǎn)生的誤差較小，檢測結(jié)果具有良好的準(zhǔn)確性。瑞舒伐他汀鈣在以上溶出度檢查試驗條件和UV檢測條件下的試驗結(jié)果符合瑞舒伐他汀鈣國家藥監(jiān)局藥品注冊標(biāo)準(zhǔn)中溶出度的規(guī)定范圍。致 謝本實驗和論文是在胡瑞生教授的悉心指導(dǎo)下完成的。胡老師孜孜不倦的教誨、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度、淵博的知識使我受益匪淺，胡老師不僅在

17、學(xué)業(yè)上給了我很多的指導(dǎo)，更是我生活中的向?qū)В擞焉?、為人謙和、不求名利的高尚情操永遠(yuǎn)是我們后輩學(xué)習(xí)的典范。在此謹(jǐn)向胡老師表達(dá)我由衷的謝意。 同時感謝北京天衡藥物研究院給我這次實習(xí)的機(jī)會，王曉強(qiáng)老師和孔利平老師在實習(xí)期給予我的幫助。在此期間，我學(xué)習(xí)到了許多專業(yè)知識和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度。對四年來教給我知識的老師們說一聲謝謝，對我在完成本科論文時給予支持的學(xué)長和同學(xué)致以敬意。最后，感謝我的父母家人多年的養(yǎng)育、關(guān)心與支持，使我長大成人，得以順利完成學(xué)業(yè)。參考文獻(xiàn)1 蔡正艷，寧奇 降血脂藥物研究新進(jìn)展期刊論文-世界臨床藥物 2004(1)2 Davidision MH. Rosuvastatin: a

18、highly efficacious statin for the treatment of dyslipidemia 20023 Jones PH. Davidision MH. Stein EA Comparison of the efficacy and safety of rosuvastatin versus atorvastatin, sinwastatin, and pravastatin across doses 2003(02)4 Gonzalez ML. Gonzalez Ruiz M. DUVOS E Atorvastatin-induced severe thrombocytopenia 1998(9136)5 Monika L. Fritz H. Gunther K Depressive syndrome in hypercholesterolaemic patients treated with pravastatine 1992(8824)6 Carswell CL. Plosker GL. Jarvis B Rosuvastatin 20027 Istvan ES Structural mechanism for