1、,DNA指紋技術(shù),犯罪現(xiàn)場遺留的血跡,第3節(jié) DNA復(fù)制,DNA結(jié)構(gòu)如何保證復(fù)制準(zhǔn)確進行,一、探究DNA復(fù)制的方式,根據(jù)DNA的結(jié)構(gòu)，請猜測 DNA復(fù)制的方式？,（一）做出假設(shè),探究,探究,選擇實驗材料：,大腸桿菌,（細(xì)胞分裂一代時間可知）,區(qū)分親子代DNA：,同位素標(biāo)記法,檢測方法：,密度梯度離心,思考：通過什么技術(shù)方法可以區(qū)別母鏈或子鏈？,（二）設(shè)計實驗,1958年，M.Meselson（梅塞爾森）和F.W .Stahl（斯特爾）的大腸桿菌DNA密度梯度離心實驗證明了DNA的復(fù)制方式。,大腸桿菌在含15NH4CL的培養(yǎng)液中培養(yǎng)多代,轉(zhuǎn)移至含有14NH4CL的培養(yǎng)液中培養(yǎng),P,F1,F2,細(xì)

2、胞分裂一次（DNA復(fù)制一次）,細(xì)胞再分裂一次（DNA再復(fù)制一次）,提取DNA,提取DNA,提取DNA,P DNA,F1 DNA,F2 DNA,探究,輕帶,中帶,重帶,密度梯度,14N 14N,14N15N,15N15N,密度(g/ml): 1.710 1.717 1.724,探究,（三）演繹推理，預(yù)測實驗結(jié)果,小組活動：根據(jù)兩種“假說”，分別演繹推理出 F1及F2的DNA復(fù)制結(jié)果。 （注意：P母鏈含15N用紅色線表示 新合成的子鏈含14N用黑色線表示）,探究,1、每個人先單獨在學(xué)案上完成（4分鐘） 2、小組交流討論（3分鐘） 3、每個組將兩種復(fù)制方式演繹推理的結(jié)果寫在 大白紙上（3分鐘）,依據(jù)

3、不同假說，演繹推理得出預(yù)期結(jié)果,（三）演繹推理，預(yù)測實驗結(jié)果,小組活動：根據(jù)兩種“假說”，分別演繹推理出 F1及F2的DNA復(fù)制結(jié)果。 （注意：P母鏈含15N用紅色線表示 新合成的子鏈含14N用黑色線表示）,探究,1、每個人先單獨在學(xué)案上完成（4分鐘） 2、小組交流討論（3分鐘） 3、每個組將兩種復(fù)制方式演繹推理的結(jié)果寫在 大白紙上（3分鐘）,依據(jù)不同假說，演繹推理得出預(yù)期結(jié)果,15N,14N,15N,14N,14N,14N,15N,15N,14N,14N,15N,15N,14N,14N,3個,1個,2個,2個,1個,1個,全保留復(fù)制,半保留復(fù)制,P F1 F2,重,中,輕,預(yù)測實驗結(jié)果,P

4、F1 F2,（三）演繹推理，預(yù)測實驗結(jié)果,探究,依據(jù)不同假說，演繹推理得出預(yù)期結(jié)果,梅塞爾森&斯特爾實驗結(jié)果分析,（四）分析實驗結(jié)果 ，得出實驗結(jié)論,14N對照,P 15N對照,F1,F2,(1)F1的實驗結(jié)果能否定哪種假說？能否定“彌散復(fù)制”假說么？為什么？ (2)F2的實驗結(jié)果能支持哪種假說？為什么？,探究,二、DNA復(fù)制的過程,DNA分子的復(fù)制過程,DNA分子的復(fù)制過程,A G G T A C T G C C A,T C C A T G A C G G T,+,親代DNA,復(fù)制過程中形成的復(fù)制叉,子代DNA,思考：DNA復(fù)制是如何做到高度精確的？,思考：細(xì)胞為什么要進行DNA復(fù)制？,2.

5、宮頸癌細(xì)胞DNA按照DNA長度和復(fù)制速度計算，完成復(fù)制需要27小時，但實際上只需要20分鐘就可以完成復(fù)制，DNA復(fù)制是如何做到如此高效的？,1.體外DNA復(fù)制（PCR）與體內(nèi)DNA復(fù)制需要的條件一樣嗎？,1958年，赫伯特泰勒（Herbert Taylar）將蠶豆根尖首先放置于3H的培養(yǎng)液中進行有絲分裂，然后又讓細(xì)胞在不含3H的培養(yǎng)液中再次進行有絲分裂，經(jīng)放射自顯影技術(shù)，觀察細(xì)胞中染色單體的放射性。,真核生物的DNA復(fù)制,A,DNA復(fù)制的過程也是染色體形成兩條染色單體的過程 將植物根尖分生區(qū)放在含BrdU（與T結(jié)構(gòu)類似）的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，每經(jīng)過一個細(xì)胞周期取出用姬姆薩染料染色，含BrdU的脫氧核苷酸鏈著色很淺。,色差染色法,依據(jù)不同假說，演繹推理得出預(yù)期結(jié)果,15N,14N,15N,14N