1、實(shí)驗(yàn)一 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和人體表面微生物的檢查,一、目的要求 1證明實(shí)驗(yàn)室環(huán)境與體表存在微生物； 2比較來自不同場(chǎng)所與不同條件下細(xì)菌的數(shù)量和類型； 3體會(huì)無菌操作的重要性。,二、基本原理 平板培養(yǎng)基含有細(xì)菌生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)成分，當(dāng)取自不同來源的樣品接種于培養(yǎng)基上，在37溫度下培養(yǎng)，12天內(nèi)每一菌體即能通過很多次細(xì)胞分裂而進(jìn)行繁殖，形成一個(gè)可見的細(xì)胞群體的集落，稱為菌落（colony）。每一種細(xì)菌所形成的菌落都有它自己的特點(diǎn)，因此，可通過平板培養(yǎng)來檢查環(huán)境中細(xì)菌的數(shù)量和類型。,三、器材 肉膏蛋白胨瓊脂平板，無菌水，滅菌棉簽（裝在試管內(nèi)），接種環(huán)，試管架，酒精燈，記號(hào)筆，標(biāo)簽紙，廢物缸。,四、操作步驟

2、每組在“實(shí)驗(yàn)室”和“人體”兩大部分中各選擇一個(gè)內(nèi)容做實(shí)驗(yàn)，結(jié)果供全班討論。 1寫標(biāo)簽 根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，每組準(zhǔn)備4只培養(yǎng)皿，按課本P6要求寫好標(biāo)簽和做好記號(hào)。,2實(shí)驗(yàn)室微生物的檢查 （1）空氣 將一個(gè)肉膏蛋白胨瓊脂平板放在當(dāng)時(shí)做實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室，移去皿蓋，使瓊脂培養(yǎng)基表面暴露在空氣中；將另一肉膏蛋白胨瓊脂平板放在無菌室或無人走動(dòng)的其他實(shí)驗(yàn)室，移去皿蓋。1h后蓋上2個(gè)皿蓋。,（2）實(shí)驗(yàn)臺(tái)、桌面和門旋鈕 。 （a）取棉簽 根據(jù)課本P7，左手拿含有棉簽的試管，在火焰旁用右手的手掌邊緣和小指、無名指夾持棉塞（或試管帽），將其取出（圖-2，B），將管口很快地通過煤氣燈（或酒精燈）的火焰，燒灼管口；輕輕地傾斜試管

3、，用右手的拇指和食指將棉簽小心地取出（圖-2，C）。放回棉塞（或試管帽）（圖-2，D），并將空試管放在試管架上；,（b）弄濕棉簽 左手取滅菌水試管，如上法拔出棉塞（或試管帽）并燒灼管口，將棉簽插入水中，再提出水面，在管壁上擠壓一下以除去過多的水分，小心將棉簽取出，燒灼管口，放回棉塞（或試管帽），并將滅菌水試管放在試管架上； （c）取樣 將濕棉簽在實(shí)驗(yàn)臺(tái)面上擦拭約2平方厘米的范圍； （d）接種 將棉簽迅速?gòu)钠桨彘_啟處伸入，在標(biāo)有E區(qū)域滾動(dòng)一下，立即閉合皿蓋，棄去棉簽；,（e）重復(fù)步驟（a）、（b）、（c），在門旋鈕和桌面取樣，完成F、G的接種； （f）在H區(qū)接種無菌水作為對(duì)照。,3人體表面微生物的檢查 （1）手指（洗手前與洗手后） （a）移去皿蓋，將未洗過的手指在平板A區(qū)域輕按，而后迅速蓋上皿蓋； （b）用洗手液洗凈雙手，自然干燥后，在平板的B區(qū)域上輕按，迅速蓋上皿蓋；,未洗的手,漂洗的手(只用清水),洗凈的手(用皂液),洗凈的手(用消毒劑),（2）頭發(fā) 將你的12根頭發(fā)輕輕放在平板的C區(qū)域，迅速蓋上皿蓋。 （3）鼻腔 （a）按照實(shí)驗(yàn)臺(tái)檢查法的步驟（a）和（b），用濕棉簽在鼻腔內(nèi)滾動(dòng)數(shù)次，立即在D區(qū)域輕輕摩擦23次，迅速蓋上皿蓋。,（4）培養(yǎng) 將以上實(shí)驗(yàn)的平皿底面朝上，放在37溫度下培養(yǎng)12天，取出觀察，記錄并分析結(jié)果。,五思考題 （1）比較各種來源的樣品，哪一種樣品的