1、體外受精、 胚胎移植、 胚胎分割、 胚胎冷凍保存 性別控制 胚胎干細(xì)胞,胚胎工程：,研究的重要內(nèi)容： （技術(shù)手段）,研究的對(duì)象：,生殖細(xì)胞、受精卵和早期胚胎,理論基礎(chǔ)：,胚胎發(fā)育學(xué),體外受精,1、概念： 哺乳動(dòng)物的精子和卵子在體外人工控制的環(huán)境中完成受精過(guò)程的技術(shù)。 2、過(guò)程： （1）采集精子 （2）采集卵母細(xì)胞 （3）受精,（一）采集精子,1)采集的方法： 2)獲能處理:,（牛、羊）一定濃度的肝素、 A23187溶液（鈣離子載體）溶液,假陰道法,（二）采集卵母細(xì)胞,大型動(dòng)物:（牛，豬等一般用抽吸法） 小型動(dòng)物:（小鼠、兔等一般用機(jī)械破碎法）,閱讀課本P82，找出對(duì)不同動(dòng)物,采集卵母細(xì)胞的方法

2、分別是什么，有哪些有優(yōu)缺點(diǎn)？,采集的方法：,抽吸法、機(jī)械破碎法,（三）受精,在獲能溶液或?qū)Ｓ檬芫芤褐型瓿?受精過(guò)程。,胚胎體外培養(yǎng),概念：將受精卵在人工環(huán)境下培養(yǎng)成早期胚胎。 培養(yǎng)液：（不同時(shí)期成分不同） 水、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動(dòng)物血清等。 胚胎培養(yǎng)比組織、細(xì)胞培養(yǎng)要難。 目前只能進(jìn)行少數(shù)幾種動(dòng)物的不同階段的胚胎培養(yǎng)，還無(wú)從受精卵到新生兒的全體外培養(yǎng)技術(shù)。,胚胎移植,1.概念：也稱“借腹懷胎” 將良種母畜配種后，從其生殖道取出受精卵或早期胚胎，移植到生理狀態(tài)相同的同種母畜體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育成為新個(gè)體的技術(shù)。 供體： 提供胚胎的個(gè)體。 受體： 接受胚胎的個(gè)體。,良

3、種雌性動(dòng)物。,一般品種的雌性動(dòng)物。,選擇,供體母牛,受體母牛,同期發(fā)情處理,超數(shù)排卵,供體公牛,配種,取出早期胚胎,質(zhì)量檢查、培養(yǎng),胚胎移植,妊娠檢查,分娩（胚胎移植的犢牛）,2、胚胎移植的過(guò)程：,未配種,同期發(fā)情技術(shù)：主要是借助外源激素剌激卵巢，使其按照預(yù)定的要求發(fā)生變化，使處理母畜的卵巢生理機(jī)能都處于相同階段，從而達(dá)到同期發(fā)情。,為什么胚胎移植能成功?,移動(dòng)到任何一頭動(dòng)物子宮內(nèi)都能發(fā)育嗎? 同種動(dòng)物發(fā)情排卵后,在一端時(shí)間內(nèi)供體受體具有相同的生理環(huán)境。 為什么能收集到胚胎? 早期胚胎一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)。 供體和受體會(huì)不會(huì)發(fā)生排斥？ 同種動(dòng)物之間基本上不排斥。 移植的胚胎能保留供體雙親的特

4、性? 遺傳特性不受受體的影響。 胚胎雖然與受體有生理和組織上的聯(lián)系,但與受體的遺傳物質(zhì)無(wú)關(guān),.,.,3.胚胎移植成功與否要有兩個(gè)條件,（1）胚胎移植一般應(yīng)在同種的雌性供體和受體之間進(jìn)行。 （2）進(jìn)行胚胎移植的供體和受體的生理狀態(tài)要相同。,胚胎移植的優(yōu)勢(shì)：,充分發(fā)揮雌性個(gè)體的繁殖潛力 縮短供體本身的繁殖周期 保持供體優(yōu)良特性 大規(guī)模繁殖 節(jié)約成本費(fèi)用 可用于保護(hù)珍稀動(dòng)物 ,.,.,胚胎分割,1.概念:,2.優(yōu)勢(shì):,用顯微手術(shù)的方法將一枚胚胎分割成二分胚、四分胚甚至八分胚。經(jīng)體內(nèi)或體外培養(yǎng)后植入受體，已得到同卵雙生或同卵多生后代的技術(shù)。,后代具有相同的遺傳物質(zhì)。,可成倍增加胚胎數(shù)量，可以快速繁殖良

5、種畜。,3.特點(diǎn):,1、分割什么時(shí)期的胚胎? 發(fā)育良好的，形態(tài)正常的32細(xì)胞期或囊胚. 2、用什么儀器來(lái)分割? 實(shí)體顯微鏡和顯微操作儀；切割刀、切割針,.討論,.時(shí)期,4、胚胎分割的基本過(guò)程,胚胎移入培養(yǎng)液； 分割胚胎（機(jī)械法、酶處理）； 移植胚胎給受體； 著床產(chǎn)仔。,胚胎干細(xì)胞,1.概念：（ES細(xì)胞），是由早期胚胎（囊胚）的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出來(lái)的一類細(xì)胞。 2.特點(diǎn): 1)形態(tài)：體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯. 2)功能：具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。 3）體外培養(yǎng)ES細(xì)胞可以增殖而不分化。對(duì)它可以進(jìn)行冷凍保存，也可以進(jìn)行遺傳改造。,.加圖，歸納,.特點(diǎn),胚胎干細(xì)胞：內(nèi)細(xì)胞

6、團(tuán)細(xì)胞；,胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng),培養(yǎng)關(guān)鍵： 需要一種能促進(jìn)胚胎干細(xì)胞的生長(zhǎng)，但抑制其分化的一種培養(yǎng)體系。 培養(yǎng)過(guò)程： 1、 制備飼養(yǎng)層（胚胎成纖維細(xì)胞）； 2、培養(yǎng)液中培養(yǎng)胚胎到內(nèi)細(xì)胞團(tuán)突出飼養(yǎng)層； 3、酶消化或機(jī)械剝離內(nèi)細(xì)胞團(tuán)； 4、分為單個(gè)細(xì)胞。 5、加飼養(yǎng)層培養(yǎng)。,胚胎干細(xì)胞核移植,概念： 將胚胎干細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中，經(jīng)過(guò)胚激活、胚胎培養(yǎng)、胚胎移植后直接由受體完成克隆動(dòng)物的技術(shù)。 過(guò)程： 細(xì)胞核移植；胚胎培養(yǎng)；胚胎移植。,胚胎干細(xì)胞的主要用途： 可用于研究哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)生和發(fā)育規(guī)律； 是在體外條件下研究細(xì)胞分化的理想材料，在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可以誘導(dǎo)E

7、S細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理提供了有效的手段； 可以用于治療人類的某些頑疾，如帕金森綜合癥、少年糖尿病等； 移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能； 隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展，通過(guò)ES細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化，定向培育出人造組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題。,胚胎干細(xì)胞的應(yīng)用前景,.優(yōu)點(diǎn),按分化潛能分： (1)全能干細(xì)胞：具有形成完整個(gè)體的分化潛能。如胚胎干細(xì)胞。 (2)多能干細(xì)胞：具有分化出多種細(xì)胞組織的潛能，失去發(fā)育成完整個(gè)體的能力。 (3)專能干細(xì)胞：只能向一種類型或密切相關(guān)的兩種類型分化的細(xì)胞。如骨髓干細(xì)胞、皮膚生發(fā)層細(xì)胞等。 按來(lái)源分