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1、實(shí)驗(yàn)四 主要內(nèi)容 (一) 中性粒細(xì)胞的吞噬作用 (二) 溶菌酶試驗(yàn) (三) 巨噬細(xì)胞的吞噬作用示教,血液中的小吞噬細(xì)胞即中性粒細(xì)胞,具有很強(qiáng)的變形運(yùn)動(dòng)能力,是機(jī)體發(fā)生急性炎癥時(shí)的主要反應(yīng)細(xì)胞。具有對(duì)異物吞噬、殺死和消化的功能,是機(jī)體防御功能的重要組成部分。檢查其吞噬細(xì)菌的能力,有助于判斷人體的免疫功能。,中性粒細(xì)胞的吞噬作用,步驟與方法 1注射無菌肉湯1ml于小白鼠腹腔內(nèi),誘導(dǎo)漿液滲出,約需1小時(shí)。,中性粒細(xì)胞的吞噬作用(體內(nèi)法) (2人/組),2給小白鼠腹腔內(nèi)注射白色葡萄球菌菌液1ml,放入籠中,讓小鼠活動(dòng)。 3分別于40分鐘、60分鐘后,抽取腹腔液涂片、干燥。最后將小白鼠拉脫頸椎處死。,4
2、0,步驟與方法 4.瑞氏染色:干燥后的標(biāo)本片 瑞氏染液數(shù)滴(計(jì)數(shù)滴數(shù))1 min 加等量PBS繼續(xù)染5min 水洗 干燥 油鏡觀察,結(jié)果,可見細(xì)胞核及被吞噬的細(xì)菌染成紫色,而白細(xì)胞漿則為淡紅色。,中性粒細(xì)胞的吞噬作用(體外法),步驟與方法 1 取肝素溶液12滴加于玻片后端。 2用酒精棉球消毒無名指端或耳垂皮膚,用無菌采血針刺破,再用一牙簽刮取血液,即刻混在玻片的肝素溶液中抗凝。 3取一接種環(huán)葡萄球菌,加于血滴中,且使之混和。將此玻片置于鋪有濕濾紙濕盒內(nèi),加蓋,放入37恒溫箱45分鐘。,步驟與方法 4.取出玻片,作成推片。只能推一次,切勿來回推。 5.干燥后用瑞氏染色法染色,油鏡觀察。,結(jié)果,溶
3、菌酶是一種小分子蛋白質(zhì),存在于機(jī)體的血清、體液(淚液、唾液、痰液、尿液等)及細(xì)胞(白細(xì)胞等)中。測(cè)定它在血清、體液或分泌物中的含量及其變動(dòng)情況可作為了解機(jī)體防御功能的一個(gè)指標(biāo)。,溶菌酶試驗(yàn)(瓊脂平板法 ) (4人/組),步驟與方法 1.取混有溶壁微球菌的瓊脂平板(已制備完成),用打孔器在混有溶壁微球菌的瓊脂平板上打孔,再用注射器針頭將孔中瓊脂挑出。,1,2,4,3,步驟與方法 2.用稱量紙收集自己的唾液。 3.用滴管將自己的唾液加入孔中,向孔內(nèi)加樣時(shí),樣品不能溢出孔外,孔內(nèi)不能有氣泡。 4.置371518小時(shí)后觀察結(jié)果。 結(jié)果,1,2,3,4,巨噬細(xì)胞的吞噬作用(示教),巨噬細(xì)胞是固定于組織中的大吞噬細(xì)胞。具有對(duì)異物吞噬和消化的功能,是機(jī)體非特異性免疫中重要機(jī)制之一
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