中藥提取分離新技術(shù)研究進(jìn)展【關(guān)鍵詞】 中藥；提取分離；綜述現(xiàn)代中藥質(zhì)量控制及研究在很大程度上依賴于中藥有效成分提取分離的結(jié)果。常用的提取分離方法(如煎煮法、回流法、浸漬法、滲漉法等)在保留有效成分、去除無效成分方面,存在著有效成分損失大、周期長、工序多、提取率不高等缺點。近年來,在中藥提取分離方面出現(xiàn)了許多新技術(shù)、新方法,如超臨界流體萃取技術(shù)、大孔樹脂吸附法、半仿生提取法、高速離心分離技術(shù)等,這些新技術(shù)和方法的應(yīng)用,使得中藥提取既符合傳統(tǒng)的中醫(yī)藥理論,又能達(dá)到提高有效成分的收率和純度的目的。因此,運用新提取技術(shù)研究中藥,是實現(xiàn)中藥現(xiàn)代化的重要途徑,必將為中藥現(xiàn)代化研究注入新的活力。筆者就近年來幾種新方法在中藥提取過程中的應(yīng)用進(jìn)行簡單的概述。1 中藥提取新技術(shù)1.1 超臨界流體萃取技術(shù) 超臨界流體是指處于臨界溫度和臨界壓力以上,物理性質(zhì)介于氣體與液體之間的流體。這種流體兼有氣體和液體的特點,它具有和氣體相當(dāng)?shù)母邼B透能力和低粘度,又具有和液體相近的密度和對許多物質(zhì)優(yōu)良的溶解能力。超臨界流體萃取是以超臨界流體代替常規(guī)有機(jī)溶劑對目標(biāo)組分進(jìn)行萃取和分離的新型技術(shù),與傳統(tǒng)的提取分離法相比,其最大的優(yōu)點是可以在近常溫條件下提取分離不同極性、不同沸點的化合物,幾乎保留中藥中全部有效成分,無有機(jī)溶劑殘留,因此,其中藥有效成分提取的純度高,而且收率高,操作簡單、節(jié)能。葛氏等1研究了超臨界C02萃取柴胡揮發(fā)油和皂苷的工藝,大大提高收率,縮短提取時間,而揮發(fā)油的組成一致,只是各成分的含量有差異。黃氏等2研究了超臨界CO2萃取當(dāng)歸中藁苯內(nèi)酯,確定了工藝條件：萃取溫度40 ,壓力35 MPa,CO2消耗量6O mL。郁氏3對單味當(dāng)歸、川芎及復(fù)方當(dāng)歸和川芎在不同的工藝條件萃取結(jié)果進(jìn)行了比較,結(jié)果顯示,復(fù)方產(chǎn)物的提取率明顯高于單味產(chǎn)物提取率之和。1.2 大孔樹脂吸附法 大孔樹脂吸附分離技術(shù)是以采用特殊的吸附劑從中藥復(fù)方煎液中有選擇地吸附其中的有效成分、除去無效成分的一種提取精制的新工藝。此外,大孔吸附樹脂還可應(yīng)用于中藥有效成分樣品組成含量測定前的預(yù)分離。該方法具有設(shè)備簡單、操作方便、節(jié)省能源、成本低、產(chǎn)品純度高、不吸潮等優(yōu)點,因此,大孔樹脂吸附法在中藥研究和生產(chǎn)中的應(yīng)用日益廣泛,取得了相當(dāng)顯著的成果。近年來,大孔吸附樹脂法已廣泛地應(yīng)用于中藥有效成分的分離與精制。麻氏等4用大孔樹脂分離銀杏葉黃酮取得良好回收率。陳氏等5利用大孔吸附樹脂分離銀杏總內(nèi)酯,得到質(zhì)量合格而穩(wěn)定的銀杏葉提取物。蘆氏等6利用大孔樹脂法分離絞股皂苷得到良好收率。耿氏等7用大孔吸附樹脂對三七葉中的總皂苷進(jìn)行分離純化,工藝流程已基本成熟,并進(jìn)入日處理莖葉40 kg的中試階段,所得三七葉苷含量達(dá)95%以上,提取率6%以上。1.3 半仿生提取法 半仿生提取法8是指從生物藥劑學(xué)的角度,模仿13服藥物及其在胃腸道的轉(zhuǎn)運過程,采用一定DH的酸水和堿水依次連續(xù)提取,其目的是提取含指標(biāo)成分高的活性混合物。它與純化學(xué)觀點“酸堿法”是不能等同的 又因為此種提取方法的工藝條件要適合工業(yè)化生產(chǎn)的實際.不可能完全與人體條件完成相同,僅“半仿生”而已,故稱“半仿生提取法”。半仿生提取法的主要特點,一是提取過程符合中醫(yī)配伍和臨床用藥的特點和口服藥物在胃腸道轉(zhuǎn)運吸收的特點；二是在具體工藝選擇上,既考慮活性混合成分又以單體成分作指標(biāo),這樣不僅能充分發(fā)揮混合物的綜合作用,又能利用單體成分控制中藥制劑的質(zhì)量；三是有效成分損失少?？傊?它可以提取和保留更多的有效成分,能縮短生產(chǎn)周期,降低成本。 在對多個單味中藥和復(fù)方制劑的研究中,半仿生提取法已經(jīng)顯示出較大的優(yōu)勢和廣闊的應(yīng)用前景。有研究以阿魏酸、苦參堿、苦參總堿及干浸膏為指標(biāo),采用半仿生提取法和水提取法對當(dāng)歸苦參丸的提取工藝進(jìn)行比較研究,經(jīng)4個指標(biāo)綜合評價發(fā)現(xiàn),半仿生提取法優(yōu)于水提取法。但目前半仿生提取法仍沿襲高溫煎煮方式,容易影響許多有效活性成分,降低藥效。因此,有學(xué)者建議將提取溫度改為近人體溫度,在提取液中加入擬人體消化酶活性物質(zhì),使提取過程更接近于藥物在人體胃腸道的轉(zhuǎn)運吸收過程,更符合辨證施治的中醫(yī)藥理論。林氏等9以小檗堿、黃芩苷、梔子苷、總生物堿、總黃酮的含量、干浸膏得率等為指標(biāo),采用半仿生法提取法對黃連解毒湯的最佳藥材組合方式進(jìn)行篩選,結(jié)果表明,黃連解毒湯以黃連、黃柏與梔子合煎,黃芩單煎的提取方式最佳。1.4 酶工程技術(shù) 傳統(tǒng)的提取方法如煎煮、有機(jī)溶劑浸出醇處理方法等,提取時溫度高、提取率低、浪費乙醇、成本高、不安全,而中藥制劑的雜質(zhì)大多為淀粉、果膠、蛋白質(zhì)等,針對雜質(zhì)選用適當(dāng)?shù)拿?可以通過酶反應(yīng)溫和地將植物組織分解,加速有效成分的釋放提取。選用相應(yīng)的酶可將影響液體制劑澄清度的雜質(zhì)如淀粉、蛋白質(zhì)、果膠等分解祛除,也可促進(jìn)某些極性低的脂溶成分轉(zhuǎn)化成糖苷類易溶于水的成分而有利于提取。酶提取法在藥物提取中有較大的應(yīng)用潛力,但該技術(shù)也存在一定的局限性。酶提取法對實驗條件要求比較高,為使酶發(fā)揮最大作用,需先通過實驗確定,掌握最適合的溫度、pH值及作用時間等。王氏等10研究用酶提取法提取銀杏葉中黃酮,發(fā)現(xiàn)銀杏葉經(jīng)纖維索酶預(yù)處理后浸提,總黃酮得率可提高到2.01%,其酶解過程的最優(yōu)參數(shù)為：料液中酶的質(zhì)量濃度為0.125 g/L,酶與底物配比為11 200,酶解溫度45 ,自然pH值,酶解時間2 h。1.5 超微粉碎技術(shù)粉碎是中藥前處理過程中的必要環(huán)節(jié)。通過粉碎,可以增加藥物的表而積,促進(jìn)藥物的溶解與吸收,加速藥材中有效成分的浸出。超微粉碎就是近年來迅速發(fā)展起來的高新技術(shù),能把原材料加工成微米甚至納米級的微粉。尤適用于纖維多的植物類中藥材的粉碎,從而提高藥物吸收率、生物利用度,增強(qiáng)靶向性。超微粉碎主要應(yīng)用于一些貴重藥材及稀有藥材的粉碎,如人參、珍珠、三七、天麻、全蝎、羚羊角等。但應(yīng)針對具體品種,確定其最適粒度,才能更好地發(fā)揮超微粉碎的作用。有些藥材則不適合用超微粉碎,如含淀粉、黏液質(zhì)較多的藥材,這些無效成分會因超微粉碎大量暴露而被釋放出來,影響有效成分的釋放與吸收。1.6 高速離心分離技術(shù)離心分離是通過離心機(jī)的高速運轉(zhuǎn),使離心加速度超過重力加速度的成百上千倍,而使沉降速度增加,以加速藥液中雜質(zhì)沉淀并除去的一種方法。結(jié)合運用多級過濾法,注射劑生產(chǎn)中的預(yù)濾,可以大大提高濾速和效果,省時省力,且能提高注射劑的澄清度。高速離心作為一種物理分離技術(shù),在其分離過程中能有效地防止中藥中有效成分的損失,最大限度地保存藥物的活性成分,且還可縮短工藝流程。它已廣泛應(yīng)用于中藥水提液澄清分離11。1.7 高速逆流色譜分離技術(shù)高速逆流色譜分離技術(shù)是一種不用任何載體或支撐體的液-液分配色譜技術(shù)。由于該技術(shù)分離效率高,產(chǎn)品純度高,不存在載體對樣品的吸附和污染,具有制備量大和溶劑消耗少等特點而尤其適用于制備性提取,可廣泛應(yīng)用于生物工程、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化工、食品等領(lǐng)域,應(yīng)用該技術(shù)研究生物堿、黃酮、蒽醌、香豆素、萜類等成分的分離都取得了較好的效果12。高速逆流色譜分離法不僅適用于非極性化合物的分離,也適用于極性化合物的分離,還可以應(yīng)用于進(jìn)行中藥粗提物中各組分的分離或進(jìn)一步的純化精制。該技術(shù)有望成為中藥有效成分質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究、分析的一種新方法,也會成為中藥制劑生產(chǎn)的一種新型分離技術(shù)。1.8 分子印跡分離技術(shù)分子印跡分離技術(shù)是以待分離的化合物為印跡分子(也稱模板、底物),制備對該類分子有選擇性識別功能的高分子聚合物分子印跡聚合物,然后以這種分子印跡聚合物為固定相來進(jìn)行色譜分離的技術(shù)。其最大的特點是分子識別性強(qiáng),選擇性高,而且制得的分子EP跡聚合物有高度的交聯(lián)性,固定相不易變形,有良好的機(jī)械性能和較長的使用壽命。分子印跡分離技術(shù)是一種高效的中藥有效成分分離技術(shù)13-14。2 小結(jié) 除上述新技術(shù)外,微波輔助萃取技術(shù)15、分子精餾和短程精餾16、中藥絮凝分離技術(shù)、雙水相萃取技術(shù)17-18、液泛法19、空氣爆破法20等,都已在中藥有效成分提取分離技術(shù)中得到了應(yīng)用。這些現(xiàn)代新技術(shù)對于推動中藥現(xiàn)代化步伐將起到深遠(yuǎn)的影響。【參考文獻(xiàn)】 1 葛發(fā)歡,史慶龍,林香仙,等.超臨界CO2從柴胡中萃取揮發(fā)油及其皂苷的研究J.中國中藥雜志,2000,35(2)：84.2 黃寶華,張 琨,周曉輝,等.超臨界CO2萃取當(dāng)歸中藁本內(nèi)酯工藝條件的研究J.中草藥,2002,33(6)：514.3 郁 威,張 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