巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1在多發(fā)性骨髓瘤中的表達(dá) 作者：王曉桃 ， 羅紹凱， 莫漢有， 李 娟， 莫東華， 周潤(rùn)華【摘要】 【目的】 探討巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1（MIP-1）在多發(fā)性骨髓瘤中的表達(dá)及臨床意義?！痉椒ā?夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）定量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組43例患者、15例對(duì)照組，以及隨訪37例治療3療程后骨髓血漿MIP-1的水平?！窘Y(jié)果】 65.1% 患者M(jìn)IP-1水平增高，其中實(shí)驗(yàn)組明顯高于對(duì)照組（t=3.569，P=0 0.01），實(shí)驗(yàn)組中的活動(dòng)進(jìn)展期患者明顯高于穩(wěn)定期、正常人及其他血液病患者（P均 0.05）；骨質(zhì)破壞2處患者明顯高于骨質(zhì)破壞2處的患者（t=5.56，P=0 0.01）。有效組經(jīng)治療3個(gè)療程后MIP-1水平明顯下降（t =3.237，P=0< 0.05）。MIP-1與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白蛋白、2-微球蛋白、骨損分、Durie-Salmon分期相關(guān)（P均 0.05）。【結(jié)論】 大部分多發(fā)性骨髓瘤患者骨髓MIP-1水平增高，MIP-1可作為反映骨質(zhì)破壞及瘤負(fù)荷的一項(xiàng)指標(biāo)，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)MIP-1可預(yù)測(cè)近期療效。 【關(guān)鍵詞】 多發(fā)性骨髓瘤； 巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1； 骨質(zhì)破壞； 瘤負(fù)荷 J SUN Yat-sen Univ(Med Sci), 2007, 28(2):152-154;157 多發(fā)性骨髓瘤是漿細(xì)胞的惡性腫瘤，可引起骨質(zhì)進(jìn)行性破壞。骨質(zhì)破壞主要是指骨質(zhì)重吸收增加而骨質(zhì)形成減少，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為其機(jī)制是瘤細(xì)胞同基質(zhì)細(xì)胞相互黏附產(chǎn)生的多種破骨細(xì)胞激活因子如IL-1、TNF-、IL-6等起作用。然而Choi等1發(fā)現(xiàn)在部分新診斷的伴骨質(zhì)破壞的期患者瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-1、TNF-、IL-6的水平并不增高，且在臨床上用抗IL-6、IL-1單克隆抗體治療多發(fā)性骨髓瘤的療效并不顯著。這表明還存在其它因子在多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。近來(lái)有學(xué)者發(fā)現(xiàn)MIP-1在骨髓微環(huán)境里參與破骨細(xì)胞的征集、分化，對(duì)多發(fā)性骨髓瘤骨病的發(fā)生起重要作用2。我們旨在通過(guò)檢測(cè)多發(fā)性骨髓瘤患者骨髓血漿中MIP-1水平，進(jìn)而探討MIP-1在多發(fā)性骨髓瘤中的臨床意義。 1 材料與方法 1.1 研究對(duì)象 實(shí)驗(yàn)組病例為2003年1月至2004年3月在中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院血液科住院的據(jù)國(guó)內(nèi)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)確診的多發(fā)性骨髓瘤患者43例3，男 29例，女14例，中位年齡53（2473）歲，其中包括難治復(fù)發(fā)病例7例，漿細(xì)胞白血病1例?；顒?dòng)進(jìn)展期15例，穩(wěn)定期28例。免疫分型中IgG型25例，IgA型6例，IgD型2例, IgE型1例,輕鏈型5例，輕鏈型4例。骨髓中各期漿細(xì)胞占0.070.84。2-微球蛋白(5 273.53 725.4) g/L。多發(fā)性骨髓瘤骨病分級(jí)參考文獻(xiàn)4報(bào)道，骨質(zhì)破壞以X線為標(biāo)準(zhǔn)，其中1級(jí)6例（14），2級(jí)15例（35），3級(jí)22例（51）。隨訪37例于化療3療程后復(fù)查相關(guān)指標(biāo)，據(jù)國(guó)內(nèi)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)判斷療效3。有效組30例（部分緩解11例，進(jìn)步19例），無(wú)效組7例。15例對(duì)照組中男9例，女6例，中位年齡49（1756）歲，其中正常健康人6名，特發(fā)性血小板減少性紫癜6例, 急性粒-單核細(xì)胞白血病3例。 實(shí)驗(yàn)抽取研究對(duì)象骨髓2 mL，肝素抗凝，常規(guī)離心取上清。 1.2 檢測(cè)方法 用ELISA定量檢測(cè)方法，步驟嚴(yán)格按照MIP-1 ELISA試劑盒（購(gòu)自ENDOGEN公司）的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。 1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 數(shù)據(jù)均用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理。參數(shù)檢驗(yàn)的計(jì)量資料以均數(shù)（）表示，兩均數(shù)比較用t檢驗(yàn)；變量之間的關(guān)系用線性相關(guān)、多重線性回歸分析，性別的比較用2檢驗(yàn)。 2 結(jié) 果 2.1 病人基線資料 實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組在年齡（t=1.546, P=0.053）及性別（?字=2.31,P=0.067）上的差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.2 實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組MIP-1水平 MIP-1水平高于正常值上限2s為顯著增高，實(shí)驗(yàn)組MIP-1水平（113.240.5）pg/mL，28例增高，占65.1%，對(duì)照組MIP-1水平（43.311.2）pg/mL，6名健康正常人無(wú)1例增高，9例血液系統(tǒng)其它疾病中有3例（20）增高，均為急性粒-單核細(xì)胞白血病患者。實(shí)驗(yàn)組明顯高于對(duì)照組（t=3.569，P= 0 0.01）。實(shí)驗(yàn)組中處于活動(dòng)進(jìn)展期患者（223.787.8）pg/mL明顯高于穩(wěn)定期（99.846.4） pg/mL、正常人（37.59.7）pg /mL、其它血液?。?1.912.8） pg/mL（t分別為3.42，7.56，6.04；P值分別為0.002，0，0）。 2.3 骨髓MIP-1水平與骨病間的關(guān)系 實(shí)驗(yàn)組中，骨質(zhì)破壞2處的患者17例，MIP-1水平為（67.555.9）pg/mL；骨質(zhì)破壞2處的患者26例，MIP-1水平為（216.3121.6） pg/mL；差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t =5.56, P =0 0.01）。 2.4 治療前后MIP-1水平 有效組化療前MIP -1水平（209.286.4） pg/mL，化療3療程后MIP -1水平（134.454.6） pg/mL，除3例輕微升高外，其余27例均有不同程度的下降，下降幅度在（9.6137.9） pg/mL，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t =3.237，P=0< 0.05）。無(wú)效組化療前MIP -1水平（274.694.6） pg/mL，化療3療程后MIP -1水平（228.674.5) pg/mL，其中有4例下降，下降幅度在4.662.37 pg/mL，其余2例有輕度上升，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t =0.889, P =0.209>0.05）。 2.5 MIP-1水平與實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)及臨床特征的關(guān)系 骨髓血漿MIP-1水平與患者性別、年齡、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、乳酸脫氫酶、2-微球蛋白、白蛋白、血沉、血鈣、堿性磷酸酶、骨損分、Durie-Salmon分期及療效分別做相關(guān)分析、多重線性回歸分析。結(jié)果表明MIP-1水平與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、2-微球蛋白、白蛋白、骨損分、Durie-Salmon分期相關(guān)（P < 0.05），見(jiàn)表1。多元直線回歸分析只有紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、2-微球蛋白、白蛋白、骨損分進(jìn)入回歸模型，該模型的R2為0.69，F(xiàn)為32.42，SE為68.91。其方程式為Y=337.26-4.98 (白蛋白) +46.2(2-微球蛋白) -0.017(紅細(xì)胞計(jì)數(shù)) + 85.03(骨損分)。 3 討 論 MIP-1既是一種趨化因子，也是一種破骨細(xì)胞激活因子。我們發(fā)現(xiàn)約65% 多發(fā)性骨髓瘤患者骨髓MIP-1水平增高，這與其他學(xué)者報(bào)道基本一致1,5。其中處于活動(dòng)進(jìn)展期患者的MIP-1明顯高于正常人、其它血液病及穩(wěn)定期患者，增高的程度與疾病的活動(dòng)度相關(guān)。同時(shí)MIP-1增高的程度與骨質(zhì)破壞的程度呈正相關(guān)，3級(jí)患者明顯高于1、2級(jí)患者，說(shuō)明骨質(zhì)破壞越嚴(yán)重骨髓MIP-1水平越高，與其他報(bào)道一致6-8。其原因可能是骨質(zhì)破壞越嚴(yán)重，局限區(qū)域里破骨細(xì)胞激活因子越多，破骨細(xì)胞激活因子可能通過(guò)旁分泌途徑刺激瘤細(xì)胞增殖，從而促進(jìn)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞分泌的MIP-1增多。 MIP-1誘導(dǎo)骨質(zhì)破壞的機(jī)制可能是與破骨細(xì)胞表達(dá)的CCR1、CCR5受體結(jié)合后作用于破骨細(xì)胞分化的最后一階段，增強(qiáng)破骨細(xì)胞的活性，導(dǎo)致溶骨性的破壞7,10。 隨訪37例患者，有效治療可使多發(fā)性骨髓瘤患者M(jìn)IP-1水平下降，其原因可能有：有效化療殺滅部分多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞，由多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞分泌的MIP-1減少；多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞減少，MIP-1水平下降，阻斷由MIP-1促進(jìn)多發(fā)性骨髓瘤進(jìn)展的自分泌和旁分泌途徑。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)骨髓MIP-1可反映近期療效。治療前MIP-1水平與近期療效不相關(guān)，說(shuō)明治療前MIP-1水平不能反映近期療效。 骨髓MIP-1水平與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)呈負(fù)相關(guān)，這與Moller等9學(xué)者報(bào)道相一致，其機(jī)制是因?yàn)楣撬鐲D34+紅系祖細(xì)胞表達(dá)CCR1受體，MIP-1與CCR1受體結(jié)合后抑制紅系形成9。MIP-1水平與白蛋白呈負(fù)相關(guān)， 白蛋白作為負(fù)性急性期蛋白，其血清濃度與骨髓瘤細(xì)胞生長(zhǎng)因子白介素-6的活性、患者的體能狀態(tài)呈負(fù)相關(guān)。而多發(fā)性骨髓瘤骨病是影響病人體能狀態(tài)的主要因素，進(jìn)一步驗(yàn)證MIP-1與骨病相關(guān)。血2-微球蛋白主要是由B細(xì)胞系、單核細(xì)胞系等表達(dá)，在多發(fā)性骨髓瘤時(shí)2-微球蛋白大量合成并進(jìn)入血液循環(huán)，能較好地反映體內(nèi)瘤負(fù)荷；DS分期系統(tǒng)是最常用的分期系統(tǒng)，該系統(tǒng)側(cè)重評(píng)估患者的總體瘤負(fù)荷。MIP-1與2-微球蛋白、Durie-Salmon分期相關(guān)，從而可推測(cè)MIP-1能反映體內(nèi)瘤負(fù)荷，但多元直線回歸分析發(fā)現(xiàn)Durie-Salmon分期未進(jìn)入回歸模型。 大部分多發(fā)性骨髓瘤患者骨髓MIP-1水平增高，MIP-1在多發(fā)性骨髓瘤發(fā)病機(jī)制中可能起重要作用，這值得進(jìn)一步研究。【參考文獻(xiàn)】 HASHIMOTO T,ABE M,OSHIMA T,et al. 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